Всаа аминокислоты как принимать: Как правильно принимать BCAA: в порошке, капсулах, таблетках

Как правильно принимать аминокислоты BCCA, высчитывать дозировку препарата и совмещать его с другими

Белки необходимы для восстановления мышечной массы после интенсивных тренировок. Обычно они образуются из двадцати стандартных аминокислот. Подавляющую их часть организм способен синтезировать самостоятельно, но существуют и те, которые должны поступать в него с пищей. Отсюда их название – незаменимые. 

Некоторые незаменимые аминокислоты кроме участия в строительстве мышечных тканей могут использоваться для обеспечения потребностей мышц в энергии. Это аминокислоты с разветвленной цепью: лейцин, валин и изолейцин. Они и объединены в комплекс BCAA (branched chain amino acids).

Высокое содержание качественного белка (21 г) в каждой порции и приятный привкус шоколада вам подарит Сывороточный протеин Fitness Catalyst (шоколадное печенье). Концентрат сывороточного протеина с отличным аминокислотным профилем без искусственных подсластителей, разрыхлителей, усилителей вкуса и консервантов подходит для поклонников активного образа жизни и профессиональных атлетов.

Разновидности

Препараты с BCAA производятся в капсульной, таблетированной и порошковой форме. Капсулы, как и таблетки, удобны в употреблении и имеют нейтральный вкус, в отличие от порошов, оставляющих во рту горьковатое послевкусие. Поэтому производители стараются добавить в порошки ароматизаторы или подсластители, чтобы смягчить вкус.

Некоторые порошки плохо растворяются в воде, поэтому лучше принимать их так: положить на язык порцию средства и проглотить, запив обильным количеством жидкости. Но есть и водорастворимые варианты с подсластителями и ароматизаторами.

Внимание! При покупке БАД проверяйте соотношение аминокислот. Классическим считается такое: 2 части лейцина, 1 – валина, 1 – изолейцина. Но возможны и другие соотношения, например, 4:1:1 или даже 8:1:1.

Валин, изолейцин и лецин содержит Комплекс аминокислот BCAA из линейки спортивного питания Siberian Super Natural Sport, который обеспечивает мышцы питательными веществами, помогает быстрее восстанавливаться, замедляет процессы катаболизма и устраняет ощущение перетренированности.

Правила приема

Схемы приема биокомплекса в тренировочные и посттренировочные дни разнятся. При повышенной физической нагрузке в организме запускаются противоречащие процессы: анаболические – формирование новых мышечных волокон, катаболические – расщепление энергетических субстратов, в том числе, частичное разрушение старых мышечных волокон, т. к. образующиеся при их распаде аминокислоты включаются в цикл синтеза глюкозы и других энергетических молекул. Задача – простимулировать первые и притормозить вторые.

Во время занятий спортом организму нужен вспомогательный источник энергии. Если не обеспечить его поступление извне, он начнет использовать резервные запасы внутри. Сперва расходуется запас глюкозы в мышцах, которого хватает на 5-10 секунд. Затем расщепляется весь гликоген, имеющийся в мышцах и наступает очередь гликогена, который хранится в печени. Этот процесс идет медленнее, чем окисление глюкозы, и является менее энергетически эффективным. Кроме того, в качестве источника энергии могут выступать жирные кислоты и аминокислоты в мышцах. Аминокислоты легче включаются в энергетический обмен, чем жирные кислоты. В качестве защитника аминокислот мышц и выступают БЦАА. Они быстро усваиваются и вовлекаются в процесс, не позволяя организму «поедать» собственные мышцы.

Внимание! Чтобы получить максимальную пользу от BCAA, принимайте их до и после занятий. Если оно длится больше часа, можно понемногу употреблять добавку на протяжении тренировки.

Катаболические процессы наиболее агрессивны в ходе спортивных занятий, но продолжаются и в последующие дни. Особенно молниеносно они развиваются после сна. Если съесть на завтрак белковую пищу, организм будет долго расщеплять ее до аминокислот. Например, мясо может перевариваться 6-8 ч. На помощь в этой ситуации приходит BCAA, компоненты которого быстрее проникают в толщу мышц. Рекомендуемая дозировка – 50% от ежедневной дозы.

Ещё один ключевой продукт для всех, кто занимается силовыми видами спорта, в удобном формате — Быстрорастворимый креатин — Siberian Super Natural Sport. Креатин в форме моногидрата быстро усваивается, увеличивает силовую выносливость, стимулирует увеличение мышечной массы, повышая эффективность тренировок. Совместный приём креатина и БЦАА помогает нарастить сухую мышечную массу, сбросить вес и при этом получить необходимую выносливость.

По сколько принимать?

Дозировку спортивного питания можно узнать из указанной на его упаковке инструкции по применению. Но желательно рассчитать ее с учетом своего веса и самочувствия, начиная с небольшой дозы и постепенно наращивая дозировку в течение 1-2 недель. Например, для кого-то идеальная норма потребления лейцина для проведения эффективной тренировки может составлять 33 мг на 1 кг массы тела человека. Учитывая наиболее распространенное соотношение составляющих BCAA (2:1:1), можно с легкость определить количество спортивного питания на прием.

К примеру, спортсмену весом 80 кг надо принять за тренировку 2640 мг лейцина: 80 x 33. Значит двух других кислот ему потребуется по 1320 мг: 2640/2. Общий объем BCAA составит 5280 мг, или примерно 5 г.

BCAA — пить или не пить?

Для нормальной жизнедеятельности организму нужны аминокислоты, которые в свою очередь синтезируются из белков поступающих в организм. Всего требуется 22 аминокислоты, но человеческий организм может произвести только 13. Все остальные, а именно 9 аминокислот, можно получить только через пищу или белковые пищевые добавки. К таким незаменимым «аминкам» относится изолейцин, валин, лейцин, которые имеют общее название — аминокислоты BCAA.

Что такое аминокислоты ВСАА?

Комплекс из трех аминокислот, которые являются незаменимыми и с разветвлением боковых цепей называют ВСАА. В спорте незаменимые помощники, они быстро восстанавливают спортсмена, дают дополнительную энергию и силу, наращивают мышцы. ВСАА при распаде минуют печень, распадаются они сразу в мышцах. Это является основной особенностью тройки незаменимых аминокислот. Если взять отдельно каждую «аминку» можно удивиться их работе. Изолейцин — нормализирует сахар, усиливает выносливость, восстанавливает ткани мышц. Валин — добавляем мышцам скорость роста, останавливает разрушение белка, ускоряет восстановление и заживление мышц. Лейцин — контролирует сахар в крови, усиливает гормон роста, восстанавливает кожу, кости и мышцы.В комплексе эти аминокислоты помогают сжечь жир, восстановить мышцы, предотвратить старение мышц.

ВСАА разделяют по видам добавок к ним.

Например ВСАА с глутамином, в этом сочетании глутамин добавляет предотвращение катаболизма и усиление иммунитета. ВСАА с энергетиками повышают продуктивность. За счет кофеина в составе, может служить как пред тренировочный комплекс. ВСАА с витаминными комплексами. Отлично заменяют мультивитамины, но в те периоды когда нагрузка не слишком велика, а сезонных фруктов и овощей достаточно. ВСАА имеет множество форм выпуска:

• ВСАА в форме порошка. Экономичная форма фасовки. Нужно смешивать с соком или чистой водой в шейкере. Пить просто порошок не стоит, вкус его очень неприятный.
• Форма выпуска в капсулах. Удобно в применении. Дороже порошковой формы ВСАА.
• ВСАА в форме таблеток. Средняя ценовая категория между порошковой формой и капсульной. Таблетки большие и некоторым не очень удобны в употреблении.
• Жидкие ВСАА. Дорогая форма выпуска и самая быстро расходуемая, но при этом лучше усваиваемая.

Идеальный баланс аминокислот в ВСАА 2(лейцин):1(изолейцин):1(валин). Для человеческого организма это оптимальное соотношение. Но в зависимости от сферы воздействия которую нужно питать, это соотношение меняется. В продаже можно найти разные соотношения незаменимых аминокислот ВСАА.
Способ применения ВСАА довольно прост. Принимать тогда когда организм больше всего нуждается в дополнительной загрузке аминокислотами. А это перед и после тренировки и сразу после пробуждения. При необходимость ВСАА можно использовать вместе с протеиновыми, гейнерами, креатином, а также с большинством других видов спортивного питания. Более 5 грамм за порцию, не нужно, просто не усвоиться. Исключение только если рост и вес позволяет увеличить порцию.

Так пить или не пить ВСАА?

Если брать со стороны побочных эффектов, то их нет. Максимум если у спортсмена имеется аллергия на дополнительный компонент. Ну и придерживаться суточной нормы, но ее превышение может вызвать разве что расстройства желудка и не более. А по поводу надобности употребления, нужно учитывать что это не основной прием пищи который волшебным способом нарастить огромные мышцы. Это пищевая добавка которая служит как помощник и помогать она создана спортсменам в их достижениях, а не для употребления всем подряд. Ведь работает ВСАА при повышенном употреблении белка, и именно спортсмены поддерживают нужную его норму. Хотя если человек не спортсмен, но ведет довольно активный образ жизни, прием ВСАА утром поможет восстанавливать организм после тяжёлого рабочего дня. А если человек занимается тем что целый день сидит или лежит, ВСАА не сможет ему помочь никак.

Незаменимые аминокислоты ВСАА — это отличная спортивная добавка. Поможет спортсмену и активному человеку держать организм в тонусе, быстро его восстанавливать. Укрепит иммунитет. Мы производим ВСАА в различной форме уже 20 лет и именно ВСАА был нашим первым продуктом.
С промокодом: «article» вы можете получить скидку 20% на весь заказ в нашем интернет-магазине!

Автор:

Хасанов Адам Алиевич подробнее

Для чего нужны BCAA и как их принимать: польза и вред, дозировки

BCAA (Branched-chain amino acids) — аминокислоты с разветвленными боковыми цепями — это комплекс 3 незаменимых аминокислот: лейцина, валина и изолейцина. Одна из самых популярных спортивных добавок после протеина и креатина.

Зачем нужны BCAA: польза и вред

Для здорового обмена веществ организму необходимы белки (протеины). Ученые выяснили это очень давно, даже слово «протеин» происходит от древнегреческого «протос» — первый. Белки синтезируются из 22 аминокислот, однако только 13 из них организм производит самостоятельно. Остальные 9 попадают в организм с пищей. 3 из них — аминокислоты BCAA.

BCAA — природный продукт. Они содержатся в мясе, курице, рыбе, яйцах, молочных продуктах, арахисе, бобовых. BCAA составляют около 25% всех аминокислот, необходимых организму и являются основным строительным материалом для мышц. Необходимость и польза аминокислот совпадает с функцией белка в организме, ведь белок содержит все аминокислоты, включая BCAA.

BCAA: польза и вред

Польза BCAA

• Основа для синтеза белка в организме
• Вспомогательный компонент для синтеза других аминокислот
• Энергия для мышц
• Подавление чувства голода и улучшение сжигания жира
• Улучшение обмена веществ
• Профилактика болезненности и микроповреждений мышц на тренировках
• В циклических видах спорта BCAA может отсрочить наступление усталости и улучшить результат у «медленных» бегунов на марафоне (медленнее 3:05)

Вред BCAA

BCAA могут нанести вред только в 2 случаях:

• Некачественное спортивное питание
• Передозировка

Низкое качество может привести к аллергии, отравлению и другим неприятностям, а регулярное превышение дозировки нарушит всасывание аминокислот из пищи. Если выбирать качественное спортивное питание и соблюдать дозировки, BCAA безопасны для здоровья.

Источник: trainforher.com

Нужно ли принимать BCAA

Польза будет существенной только при недостатке белка в питании. Если с питанием есть проблемы, потребность во всех аминокислотах может покрыть сывороточный протеин. И только в случае, если с питанием все плохо, а принимать протеин нет возможности, BCAA будут полезны.

BCAA иногда можно принимать как заменитель приема пищи — они притупляют чувство голода и сохраняют мышцы. Удобно использовать BCAA сразу после тренировки, особенно тем, кто любит принимать протеин с молоком, а в спортивной сумке молоко быстро киснет. BCAA будет отличной подпиткой после тренировки, пока не доберетесь до протеина.

Марафонцы, лыжники, велосипедисты, пловцы употребляют BCAA во время тренировок и соревнований длительностью более 2 часов. Как правило, для этого применяют изотоники с BCAA. На дистанции прием протеина может вызвать проблемы с пищеварением, поэтому BCAA — идеальный вариант.

BCAA необходимы только в следующих случаях:

• До и во время нагрузки (протеин может вызвать дискомфорт)
• Нет возможности выпить протеин сразу после тренировки
• Нужен низкокалорийный заменитель пищи

Оптимальное соотношение лейцина, изолейцина и валина в BCAA — 2:1:1. При повышенной потребности в лейцине можно принимать 4:1:1. Остальные пропорции, включая 8:1:1 и 10:1:1, не так эффективны и могут нарушить синтез белка в организме.

Как правильно принимать BCAA: дозировка, капсулы, таблетки, порошок

Рекомендуемая доза BCAA для компенсации затрат на тренировке — 0,3-0,5 г в час на 10 кг массы тела. Человеку массой 70 кг нужно 2,1-3,5 г BCAA в час.

Рекомендуемая суточная доза BCAA — 10-20 г в зависимости от массы тела, нагрузки и получения BCAA из других источников. Специалисты рекомендуют делить суточный объем на 2-5 приемов.

Неважно, работаете вы на рельеф, набор массы, развитие силовых показателей или пытаетесь похудеть: схема приема не меняется. Если тренировка длится больше 2 часов, можете принять 2-3 г BCAA во время тренировки. Это стимулирует обмен веществ, дает энергию и поможет быстрее восстановиться. Во всех остальных случаях принимайте BCAA до и после тренировки. Можно сочетать прием BCAA с протеином, гейнерами или другими спортивными добавками.

BCAA в дни отдыха

В дни отдыха организму нужно питание для восстановления, именно в этот период идет рост формы. Принимайте свою суточную норму BCAA утром, днем в промежутках между питанием, вечером перед сном.

Источник: eatthis.com

Как принимать BCAA в порошке

BCAA в порошке стоят ощутимо дешевле аналогов в капсулах или таблетках, но имеют несколько минусов:

• плохо растворяются в воде
• неприятный горький вкус

Самый простой способ приема порошковых BCAA: ложку сухих аминокислот запить большим количеством воды или напитка. Если вкус не напрягает или хотите принимать во время тренировки, BCAA можно разводить в любом напитке.

КУПИТЬ В ПОРОШКЕ

Как принимать BCAA в капсулах и таблетках

Капсулы и таблетки — самая удобная и распространенная форма BCAA. Капсулы удобно брать с собой и легко проглотить, не чувствуя горького вкуса аминокислот. Единственный минус этой формы — BCAA в капсулах и таблетках стоят дороже порошковых.

При покупке BCAA в капсулах обратите внимание не только на количество капсул в упаковке, но и размер порции. Посмотрите на этикетке размер порции и сколько чистых аминокислот в ней содержится. Например, в порции из 3 капсул может быть 5 г BCAA, а в порции из 4 капсул другого производителя — 3 г BCAA.

Важно! Перед применением любого спортивного питания изучите упаковку, инструкцию и следуйте рекомендациям производителя.

КУПИТЬ В КАПСУЛАХ | КУПИТЬ В ТАБЛЕТКАХ

Источник: bodynutrition.org

BCAA для похудения

BCAA, как и протеин, способствуют окислению жиров и притупляют аппетит. При этом, помогают сохранить мышцы во время похудения. Принимайте BCAA утром сразу после пробуждения, в течение дня в перерывах между едой, вечером перед сном. Однако, для этих целей экономичнее и эффективнее использовать сывороточный протеин. Он содержит весь комплекс аминокислот и не уступает по эффективности BCAA.

Кроме этого, можно построить питание так, чтобы получать необходимое количество протеина и BCAA из обычной еды.

BCAA в продуктах

Содержание BCAA в граммах на 100 г продукта:

• Филе индейки — 4,5 г
• Сыр — 4 г
• Куриная грудка — 4 г
• Арахис — 4 г
• Говядина — 4 г
• Рыба — 3 г
• Яйцо 1 шт — 1,5 г
• Молоко 100 мл — 0,7 г

Источник: verv.com

Почему BCAA не так эффективны, как протеин

Занимайтесь спортом, двигайтесь и путешествуйте! Если нашли ошибку или хотите обсудить статью — пишите в комментариях.

Подписывайтесь на нас в Telegram, ЯндексДзен, Вконтакте и Facebook

ВСЁ О ВСАА. РЕКОМЕНДАЦИИ К ПРИМЕНЕНИЮ

Мы предлагаем Вашему вниманию статью спортсменки Спарта-Про Ксении
Архиповой об одной из самых важнейших спортивных добавок — BCAA. Что это и
зачем необходимо организму, рекомендации к применению в тренировочные дни и во
время отдыха от тренировок — все это вы найдете в данной статье. Берите на
вооружение полезную информацию.

Для любого спортсмена белок – основополагающий фактор всех
восстановительных процессов. Как правило белок синтезируется из 20 стандартных
аминокислот. И если большинство из этих аминокислот организм может
синтезировать самостоятельно, то существуют незаменимые аминокислоты, которые
должны поступать в организм извне.

Роль BCAA для организма человека

Самыми важными для строительства мышечной массы являются три
незаменимые аминокислоты с разветвленными боковыми цепочками: лейцин, изолейцин
и валин. Именно эти три аминокислоты объединили в один препарат, который
получил название ВСАА. 

Прием аминокислотного комплекса ВСАА дает мощное ускорение
восстановления мышечных волокон, которые были повреждены во время тренировки,
стимулирует увеличение выработки организмом гормона роста и восстанавливает
энергетический баланс. 

Схемы приема в дни тренировок и в дни отдыха

Поскольку организм бодибилдера в дни тренировок и в дни отдыха,
когда происходит восстановление организма, испытывает различную потребность в
быстрых аминокислотах, то схема приема БЦАА в эти дни несколько отличается.

Когда спортсмен активно тренируется, то в его организме запускается
не только анаболические процессы (рост мышц), но и катаболические разрушающие
процессы. Задача бодибилдера состоит в стимулировании анаболических процессов и
торможении катаболических. Если анаболические процессы активизируются в дни
отдыха, то катаболические, наоборот, наиболее опасны во время тренировки. Во
время интенсивных нагрузок организм нуждается в дополнительной подпитке. И если
не дать эту подпитку извне, то он начнет искать дополнительные резервы внутри
тела. Первым делом расходуется запас гликогена в печени мышцах.

Если их недостаточно, организм начинает активно расщеплять
аминокислоты, из которых состоят мышцы. В этом случае в качестве помощника
выступает ВСАА. Для того, чтобы у организма не возникало даже желания начинать
пожирать самого себя, ему нужно дать «съесть» что-либо другое. Аминокислоты
БЦАА на эту роль подходят идеально!

Благодаря тому, что аминокислоты с разветвленной боковой цепью
моментально устаиваются, они активно включаются в процесс и не только не дают
развиться катаболизму во время тренировки, но и активно участвуют в наращивании
мышечной массы и сжигании массы жировой. ВСАА следует принимать непосредственно
перед тренировкой и сразу же после нее. Нелишним будет принять небольшое
количество аминокислот с разветвленной цепью и во время тренировки, если ее
продолжительность превышает 1 час.

Для приема во время тренировки идеально подойдут растворимые
аминокислоты в форме порошка. Они легко смешиваются и растворяются в обычной
воде, имеют приятный вкус и утоляют жажду.

Почему стоит принимать BCAA в нетренировочные дни

Бытует мнение, что принимать ВСАА в нетренировочные дни не
обязательно. Аргументируется это тем, что раз воздействия на организм не
производится, то и катаболизма нет. А для анаболического процесса белка хватает
и из обычного питания. Это не так. Катаболические процессы наиболее сильны
сразу после пробуждения. Если в этот момент получить белок из обычной пищи или
принять протеин, то организму потребуется некоторое время, чтобы расщепить
белок до аминокислот. Прием БЦАА в утренние часы решает эту проблему –
аминокислоты моментально попадают к мышцам. Рекомендуется принимать по 0,5-1 от
вашей стандартной порции сразу после пробуждения.

Автор: спортсменка Спарта-ПРо Ксения Архипова

ВСЕ, ЧТО ВЫ ХОТЕЛИ ЗНАТЬ О ВСАА

Сегодня аминокислоты с разветвленными цепями (BCAA) — одна из самых популярных спортивных добавок. Увеличение мышечной массы, силы, энергии и даже эффективное сжигание жира — вот неполный список целей, в достижении которых BCAA оказываются незаменимыми помощниками.

НА СЧЕТ ТРИ

Начнем с теории: BCAA включает в себя три незаменимые аминокислоты — лейцин, изолейцин и валин. В каждой из них имеется разветвленная боковая цепь, напоминающая «ветку дерева», отсюда и название — «аминокислоты с разветвленными цепями». Несмотря на тот факт, что существует порядка 20 аминокислот, которые мышцы используют для своего роста, BCAA составляют почти треть от всех аминокислот, находящихся в мышцах тела человека.

После поступления любых аминокислот в организм (как в виде добавок, так и в составе белков), они оказываются в печени, которая немедленно разлагает их на элементы и использует для выработки энергии или восстановления мышц и других тканей тела. Однако печень, как правило, оставляет целыми аминокислоты с разветвленными цепями, отправляя их непосредственно в мышцы для строительства или в качестве мышечного «топлива». Во время тренировок мышцы охотно используют ВСАА в виде энергии, а во время отдыха — например, после тренировки, — для строительства мышц.

ЗАЧЕМ ПРИНИМАТЬ ВСАА

Для дополнительной энергии во время тренировок

Мышцы с готовностью используют аминокислоты с разветвленными цепями в качестве топлива во время тренировок.

Интенсивные и длительные тренировки приводят к окислению аминокислот в мышцах и уменьшению их концентрации. Чтобы этому противостоять, необходимо принимать ВСАА непосредственно перед тренировкой. В таком случае они будут доступны мышцам в качестве прямого источника энергии.

Французские ученые нашли еще одно доказательство тому, что прием ВСАА способен вывести ваши тренировки на новый уровень: аминокислоты с разветвленными цепями влияют на количество поступающего в мозг триптофана, что в свою очередь снижает уровень особого гормона 5-HT, отвечающего за усталость. Это позволит вам заниматься дольше и интенсивнее.

Еще одно важное действие аминокислот — повышение аэробной и анаэробной производительности. Экспериментально доказано, что после 10 недель регулярного потребления ВСАА (по 12 г/день) производительность спортсменов на пике активности увеличивается примерно на 19% по сравнению с плацебо.

Для роста мышечной массы и быстрого восстановления после тренировок

Прием ВСАА стимулирует синтез белков, усиливая рост мышц. Исследование, опубликованное в издании Frontiers Physiology, показало, что у людей, принимающих добавку BCAA после силовой тренировки, фиксировали на 22% выше синтез мышечного белка, чем у контрольной группы, не получавшей порцию аминокислот до занятия.

Во время и сразу после физических нагрузок, потребности в аминокислотах резко возрастают, тогда как их запас расходуется намного быстрее, чем в состоянии покоя. Получение дополнительной порции аминокислот позволяет поддерживать высокий уровень мышечного гликогена во время тренировки и стимулирует рост мышечной массы после ее завершения.

Для усиления жиросжигающего эффекта тренировок

Доказано, что прием аминокислот с разветвленными цепями при соблюдении низкокалорийного рациона, способствует более эффективному сжиганию жира. Дело в том, что при регулярных физических нагрузках и соблюдении диеты, количество гормона лептина снижается, что приводит к повышению аппетита и замедлению метаболизма: таким образом организм пытается сохранить запасы энергии. BCAA подавляют аппетит, увеличивают расход калорий за счет сжигания жира и повышают скорость обменных процессов.

Из трех аминокислот скорее всего именно лейцин обеспечивает сжигание жира. В исследовании California State University было отмечено, что регулярное употребление лейцина в течение шести недель значительно снизило объем телесного жира у участников эксперимента. Ученые предположили, что усиление синтеза белков, стимулированное лейцином, увеличивает расход энергии, помогая организму эффективнее избавляться от жировой ткани. Таким образом, прием аминокислот позволяет увеличить расход калорий за счет сжигания жира, повысить метаболизм, и, главное, защитить мышцы от разрушения.

СООТНОШЕНИЕ АМИНОКИСЛОТ

Самая распространенная формула ВСАА 2:1:1. Это означает, что на две части лейцина в составе добавки содержится по одной части валина и изойлецина. Многие производители изменяют соотношение в пользу лейцина, выпуская добавки с пропорцией действующих веществ 4:1:1, 8:1:1 и даже 10:1:1.

В ход научного исследования одна группа участников принимала до и после тренировок лейцин, другая — добавку BCAA с соотношением 2:1:1 кислот в составе, третья — плацебо. Эксперимент показал, что синтез белка в мышцах проходил лучше у группы, принимающей BCAA, что в очередной раз доказало важность всех трех аминокислот в процессе роста мышечной массы и восстановления после тренировок. Добавки с увеличенным содержанием лейцина подходят тем, кто испытывает дефицит аминокислоты в рационе (например, при веганской диете).

ПРАВИЛЬНЫЙ ПРИЕМ АМИНОКИСЛОТ

В зависимости от цели (набор мышечной массы, сжигание жира, увеличение энергии) эксперты рекомендуют принимать примерно 4-8 г ВСАА до четырех раз в день: утром после сна, за полчаса до тренировки, в течение получаса сразу после тренировки и с последним приемом пищи.

Шесть причин, почему вам нужно начать принимать ВСАА уже сейчас

Наверняка вы пару раз слышали о BCAA от своих знакомых спортсменов, но вряд ли знаете, в чем их смысл и как включить их в свою программу тренировок и питания (если только вы не изучали биохимию).

ЗАЧЕМ НУЖНЫ BCАА?

Лейцин, изолейцин и валин – три аминокислоты с разветвленной цепью (сокращенно ВСАА). Аминокислоты – это строительные блоки для белков, а белки, как вы знаете, это строительные блоки для тканей организма. Аминокислоты либо вырабатываются нашим организмом (заменимые), либо поступают вместе с пищей (незаменимые).

ЧТО ДЕЛАЕТ ИХ НЕЗАМЕНИМЫМИ?

BСАА – незаменимые аминокислоты, т.е. они не синтезируются в нашем организме, однако при этом составляют одну треть мышечного белка человека! Основными источниками ВСАА считаются молочные продукты, яйца, мясо, мясо птицы и рыба. Пищевые добавки с ВСАА также широко распространены и часто включаются в спортивное питание. ВСАА отличаются от большинства других аминокислот тем, что они расщепляются не в печени, а в мышечной ткани.

У BCAA есть еще две отличительных особенности:

• Быстро усваиваются: ВСАА быстро всасываются в кровь, минуют печень и сразу же попадают в активные ткани (в первую очередь мышечные)
• Дополнительный источник энергии: BCAA предоставляют мышцам на тренировке дополнительный источник энергии, так как их расщепление увеличивает выносливость во время длительных тренировок. (1)

ШЕСТЬ ПРИЧИН ПРИНИМАТЬ ВСАА

1. ВСАА блокируют чувство усталости во время тренировки

Стало известно, что ВСАА препятствуют возникновению усталости во время тренировки, поэтому вы сможете заниматься активнее и дольше. Усталость бывает двух типов – центральная и периферийная. Периферийная усталость (состояние, когда ваши мышцы устают) блокируется, так как ВСАА превращаются в источник дополнительной энергии. Центральная усталость (состояние, когда ваш мозг устает) также отходит на второй план, так как ВСАА блокируют поступление аминокислоты триптофан, который вызывает чувство расслабления и сонливости. (2)

1. ВСАА повышают аэробную и анаэробную производительность, если их принимать регулярно

При недостаточном снабжении организма кислородом мышечная деятельность происходит преимущественно в анаэробных условиях. Способность выполнять мышечную работу в условиях дефицита кислорода называется анаэробной производительностью.

В ходе исследования, в котором принимали участие тренированные велосипедисты, выяснилось, что после 10 недель потребления ВСАА (по 12 г/день) их производительность на пике активности выросла на 19% по сравнению с плацебо. Результаты этих исследований говорят о том, что потребление ВСАА позволяет улучшить как анаэробную, так и аэробную производительность!

1. ВСАА укрепляют иммунную систему

Длительная интенсивная нагрузка может привести к усталости и ослаблению иммунитета, если спортсмен не дает себе возможность восстановиться между тренировками. Регулярный (долговременный) прием 12 г ВСАА в день позволяет укрепить иммунную систему. Но почему? Исследователи выяснили, что ВСАА используются в кишечнике как источник энергии, что позволяет иммунной системе более эффективно восстанавливаться и защищаться от опасных болезнетворных организмов. (3) Сильная иммунная система способствует восстановлению организма и помогает противостоять болезням.

1. ВСАА защищают ваши мышцы.

ВСАА защищают сухую мышечную массу от распада белка и мышечной атрофии во время марафонов на длинные дистанции. Во время нагрузки возрастает распад мышечного белка и, в частности, высвобождение энергии из ВСАA. (4) Если вы будете принимать ВСАА в виде пищевых добавок, ваш организм с меньшей вероятностью будет тратить собственные запасы белка. Воспринимайте их как страховку для своих мышц!

1. ВСАА способствуют синтезу мышечного белка.

Почему тяжелоатлеты не могут обходиться без ВСАА? Как упоминалось выше, лейцин (главная аминокислота) запускает механизм синтеза мышечного белка, необходимый для строительства мышц. Как правило, для запуска этого механизма хватает 2-3 г лейцина (доза зависит от массы тела). Такое количество содержится примерно в 140-170 г мяса, птицы или рыбы. Молочные продукты, в частности, сыворотка, также богаты ВСАА. Вот почему сывороточный протеин входит в состав нашего восстановительного напитка RECOVERY DRINK MIX!

1. ВСАА снижают болезненные ощущения и риск повреждения мышц во время физической нагрузки

Прием ВСАА до и после тренировки помогает сократить проявления и длительность синдрома отсроченной мышечной болезненности (СОМБ), болезненного ощущения, которое продолжается несколько дней после интенсивной или непривычной нагрузки. (5) Более того, в результате многочисленных исследований было доказано, что прием ВСАА снижает риск повреждения мышц во время любых тренировок, а значит это поможет вам быстрее восстановиться.

КАК ПРИНИМАТЬ ВСАА?

• Принимайте ВСАА по 4-20 г в день (как минимум, три капсулы аминокислот BCAA CAPSULES). Точная дозировка и соотношение аминокислот еще не определены, однако большинство исследователей склоняются к 4-20 г ВСАА в день, которые нужно разбить на несколько приемов.
• Не пропускайте прием ВСАА, и первые результаты станут заметны спустя неделю после начала приема. Для достижения желаемых результатов следует запастись терпением, так как активность ферментов, необходимая для расщепления ВСАА, возрастает постепенно.
• Принимайте ВСАА в любое время – до, во время и после тренировки. ВСАА можно принимать до, во время и после тренировки, чтобы быстро восстановить уровень аминокислот в крови, ускорить синтез или предотвратить распад белка. Также ВСАА можно принимать между приемами пищи, если вам кажется, что ваша диета недостаточно богата натуральными источниками ВСАА (мясо, рыба, яйца, молочные продукты и т.д.). Пищевые добавки с ВСАА выпускаются в форме твердых капсул (как наши аминокислоты BCAA CAPSULES) или ароматизированного порошка, который можно добавлять в напитки. Стоит учесть, что порошок ВСАА без ароматизатора может придавать жидкости горько-пресный вкус.

ВАЖНО!

ВСАА жизненно важны для спортсменов и людей, которые долго и интенсивно занимаются спортом. Также они могут быть необходимы тем, кто придерживается жесткой диеты, не включающей натуральные источники ВСАА, и всех тем, кому угрожает разрушение мышечной ткани. Исследователи доказали, что взрослым людям следует принимать 4-20 г ВСАА в день, а результаты становятся заметны уже спустя неделю непрерывного приема. Прием ВСАА небольшими порциями на протяжении длительной тренировки позволяет отсрочить наступление усталости и предотвратить разрушение мышечной ткани.

ИСТОЧНИКИ

• (1) Newsholme, E. A., Blomstrand, E. (2006). Branched-chain amino acids and central fatigue. The Journal of Nutrition, 136(1), 274S-276S.
• (2) Newsholme, E. A., Blomstrand, E. (2006). Branched-chain amino acids and central fatigue. The Journal of Nutrition, 136(1), 274S-276S.
• (3) Zhang, S., Zeng, X., Ren, M., Mao, X., Qiao, S. (2017). Novel metabolic and physiological functions of branched chain amino acids: a review. Journal of Animal Science and Biotechnology, 8(1), 10.
• (4) Shimomura, Y., Murakami, T., Nakai, N., Nagasaki, M., Harris, R. A. (2004). Exercise promotes BCAA catabolism: effects of BCAA supplementation on skeletal muscle during exercise. The Journal of Nutrition, 134(6), 1583S-1587S.
• (5) Shimomura, Y., Inaguma, A., Watanabe, S., Yamamoto, Y., Muramatsu, Y., Bajotto, G., Mawatari, K. (2010). Branched-chain amino acid supplementation before squat exercise and delayed-onset muscle soreness. International Journal of Sport Nutrition, 20(3), 236.

Об особенностях приема BCAA

Сколько пить BCAA и когда? Как пить BCAA? И нужно ли их пить вообще? Эти и многие другие вопросы волнуют любого, кто уже не раз слышал о данных аминокислотах и о том, какую пользу они несут организму.

​BCAA как принимать?

Во время тренировок или любой другой напряженной физической активности, повышается количество используемых организмом BCAA. Исследования говорят о том, что после аэробной нагрузки (это может быть кардио) и анаэробной нагрузки (это может быть силовая тренировка), уровень BCAA в мышцах стремительно снижается. Уменьшение их запасов в мышцах и в плазме крови приводит в итоге к быстрому спаду таких показателей как сила, выносливость и общая физическая производительность организма. Если не восполнять потерянные BCAA до оптимального уровня, вы рискуете потерять заработанную с большим трудом мышечную массу.

Хорошая новость – потребление BCAA до, во время и после тренировки предупреждает уменьшение уровня данных важных аминокислот в плазме крови и тем самым способствует повышению их концентрации в плазме крови. Вывод такой. Для повышения работоспособности, силы и выносливости, создания условий для мышечного роста наилучшее время для приема BCAA – это время до, во время и после тренировки.

BCAA сколько принимать?

Порция BCAA, которую следует принимать, может варьироваться в зависимости от ваших тренировочных целей и индивидуальных особенностей организма. Сколько BCAA принимать именно вам помогают вычислить различные формулы. Однако существует некая средняя общая цифра, которая говорит, сколько BCAA в день надо принимать для получения результата. Оптимальной считается порция 4-8 г до и после тренировки. Некоторые также могут принимать BCAA и во время тренировки. Опять-таки учитывать стоит свои потребности и цели. В меньшем количестве BCAA также эффективны, но при повышенных нагрузках и для эффективного восстановительного периода необходима увеличенная порция BCAA.

BCAA сколько в день?

Наиболее привычным прием BCAA считается в период до и сразу после тренировочной сессии. Некоторые не прочь принимать их и во время. Считается также, что потребление BCAA целесообразно с утра и перед сном. Здесь действует принцип – ориентируемся на свои личные нужды и цели.

BCAA сколько для сжигания жира?

BCAA используются не только для наращивания мышечной массы, но и для борьбы с лишним весом. Они помогают побороть чувство голода и тренироваться с большей отдачей. Рекомендуемое количество BCAA в данном случае – 4-6 г за одну порцию.

BCAA сколько принимать в дни отдыха?

Порция BCAA в дни отдыха может быть меньше порции, принимаемой в тренировочные дни. Кому-то будет достаточно половины порции. Однако нужно принимать во внимание тот факт, что именно во время отдыха наш организм больше нуждается в питательных веществах, т.к. он находится в стадии восстановления. Одна порция BCAA утром для восполнения резервов организма, другая перед сном для предотвращения мышечного катаболизма в ночной период. В дни отдыха данные аминокислоты можно принимать небольшими порциями в течение дня.

Ultimate Nutrition

Купить

Optimum Nutrition

Купить

Nutriversum

Купить

Maxler

Купить

​

Протеин

Купить

Аминокислоты

Купить

Спортивные батончики

Купить

Спортивные батончики

Купить

Maxler

Купить

Optimum Nutrition

Купить

Olimp

Купить

Maxler

Купить

Сывороточный альбумин человека — обзор

1 Введение

Сывороточный альбумин человека (ЧСА) является преобладающим белком во внутрисосудистом, внеклеточном пространстве, составляя около 60% общего белка. Он имеет молекулярную массу 66 кДа и ~ 19 отрицательных зарядов при pH 7,4. Его единственная негликозилированная полипептидная цепь с 67% α-спиралями и без β-листов содержит три гомологичных домена, каждый из которых содержит два субдомена. Альбумин выделяется из печени в кровоток, но постоянно попадает в кровоток и из него, так что ~ 60% распределяется во внесосудистых тканях, особенно в коже и мышцах.В среднем через 27 дней молекула разлагается. Физиологические функции альбумина включают поддержание осмотического давления коллоидов, а также связывание и транспорт нескольких лигандов, таких как жирные кислоты, гормоны, билирубин, гемин и лекарственные препараты (Peters, 1996).

Альбумин содержит 35 цистеинов. Все, кроме одного, образуют внутрибелковые дисульфиды, остается только один свободный тиол, Cys34, расположенный в щели 9,5–10 Å. Этот тиол может реагировать с разными мишенями. Например, он может реагировать с низкомолекулярными дисульфидами плазмы, а также с дисульфидным лекарственным средством дисульфирамом, образуя смешанный дисульфид альбумина (HSA-SSR).Он также может реагировать с активными формами кислорода и азота, вызывая функцию улавливания антиоксидантов. Реакционная способность тиола альбумина отражается в его неоднородности. Действительно, в ~ 30% циркулирующего альбумина тиол Cys34 окисляется до смешанных дисульфидов или до более высоких степеней окисления, таких как сульфиновая (HSA – SO ₂ H) и сульфоновая (HSA – SO ₃ H) кислоты, которые не могут быть восстановлен с помощью тиоловых реагентов. Гетерогенность альбумина может быть выявлена ​​с помощью масс-спектрометрии и хроматографии среди других методов (для обзора см. Turell et al., 2009 г.). Окисленные формы альбумина коррелируют с несколькими состояниями, включая заболевания почек (Musante et al. , 2006, 2007; Terawaki et al. , 2004), печеночную недостаточность (Oettl et al. , 2008) и старение ( Era et al., , 1995; Giustarini et al., , 2006; Leto et al., , 1970), таким образом, составляя потенциальные маркеры поглощающей активности тиола альбумина (для обзора см. Turell et al. , 2009).

Центральным промежуточным продуктом в окислении тиола альбумина является сульфеновая кислота (HSA – SOH).Эта неуловимая функциональная группа обнаруживается в растущем списке белков, где она выполняет каталитические и сигнальные функции. В альбумине относительно стабильная сульфеновая кислота образуется после воздействия окислителей, таких как перекись водорода, и предыдущая работа нашей группы привела к ее обнаружению, количественной оценке и характеристике (Alvarez et al. , 1999; Carballal et al. , 2003; Radi et al. , 1991a, b; Turell et al. , 2008). Работа с белком альбумина оказалась особенно сложной из-за возможности связывания различных реагентов, из-за аллостерических изменений и pH-зависимых структурных переходов, а также из-за присутствия 17 дисульфидных мостиков в дополнение к тиолу Cys34.В этой главе мы описываем методологию, которую мы использовали для изучения свойств сульфеновой кислоты HSA.

Ограничение аминокислот серы индуцирует π-класс экспрессии глутатион-S-трансферазы в первичных гепатоцитах крыс | Журнал питания

«> МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

«> Выделение и культивирование клеток.

самцов крыс Sprague-Dawley были приобретены в Национальном центре лабораторных животных и использованы для выделения гепатоцитов в возрасте 7-8 недель. Крыс лечили в соответствии с рекомендациями NIH (20). Гепатоциты выделяли двухэтапным методом перфузии коллагеназой, как описано ранее (21).Жизнеспособность клеток составляла> 90%, как определено по исключению трипанового синего. Выделенные гепатоциты суспендировали в среде для культивирования клеток L-15, содержащей 18 ммоль / л HEPES, 5 мг / л трансферрина, 5 мкг / л селена в виде селенита натрия, 1 г / л галактозы, 1 × 10 ⁵ / л пенициллина, 100 мг / л стрептомицина и 2,5% фетальной бычьей сыворотки. Клетки высевали на 60-миллиметровые пластиковые чашки для культивирования тканей (Falcon), предварительно покрытые коллагеном VII хвоста крысы при плотности 2,5 × 10 ⁶ клеток на чашку; чашки инкубировали в инкубаторе с увлажнением 37 ° C в атмосфере воздуха.Прикрепление клеток к культуральной чашке происходило через 4 часа после посева, после чего среду меняли. После этого среду меняли один раз в день, и клетки культивировали до 6 дней.

в исключ. 1 мы исследовали влияние ограничения серной аминокислоты на экспрессию GST Yp. В этом исследовании клетки культивировали либо в контрольной среде L-15, содержащей 0,5 ммоль / л L-метионина и 0,2 ммоль / л L-цистеина (среда с высоким содержанием серы с аминокислотами [HSAA]), либо в среде L-15, содержащей 0.1 ммоль / л L-метионина и 0,1 ммоль / л L-цистеина (среда с низким содержанием серы с аминокислотами [LSAA]). Кроме того, мы исследовали влияние на экспрессию GST Yp инсулина (5 мг / л) и дексаметазона (1 мкмоль / л), 2 обычно добавляемых факторов роста, которые способны модулировать экспрессию генов. Для всех обработок клетки собирали через 24, 48, 96 и 144 ч после посева.

в исключ. 2, 4 незаменимые аминокислоты в дополнение к L-метионину и L-цистеину (L-изолейцин, L-лейцин, L-лизин и L-фенилаланин) были протестированы, чтобы проверить, регулируется ли экспрессия GST Yp несерой аминогруппой. кислоты.В этом исследовании гепатоциты подвергались воздействию контрольной среды L-15 (0,5 ммоль / л Met, 0,2 ммоль / л Cys, 1 ммоль / л Ile, 1 ммоль / л Leu, 0,5 ммоль / л Lys, 0,75 ммоль / л. Phe) или среду, ограниченную одной аминокислотой (т. Е. 0,02 ммоль / л каждого из L-метионина, L-цистеина, L-изолейцина, L-лейцина, L-лизина или L-фенилаланина) на срок до 4 дней. . Использование 0,02 ммоль / л L-метионина было адаптировано из физиологической концентрации в сыворотке крови крыс, получавших диету с низким содержанием белка (3).

«> Нозерн-блот-анализ.

Суммарная РНК была экстрагирована с использованием реагента Trizol. Зонд кДНК получали с помощью ОТ-ПЦР, как описано ранее (23). Две пары олигонуклеотидных праймеров (прямой: 5′-TTCAAGGCTCGCTCAAGTCCAC-3 ‘; обратный: 5′-CTTGAT-CTTGGGGCGGGCACTG-3’) были сконструированы на основе опубликованной последовательности GST Yp (23,24). Условия ПЦР были следующими: денатурация при 94 ° C в течение 1 минуты, отжиг при 55 ° C в течение 1 минуты и удлинение при 72 ° C в течение 1 минуты в течение 35 циклов с последующим 7-минутным удлинением при 72 ° C.Полосу, соответствующую фрагменту ДНК GST Yp, метили α- ³² P-dCTP с использованием набора NEBlot (New England Biolabs) и использовали в качестве зонда. Для Нозерн-блот-анализа 20 мкг каждого образца РНК разделяли электрофоретически на 1% -агарозном геле, содержащем 6% формальдегида, а затем переносили на мембрану HyBond N ⁺ , как описано ранее (23). Мембрану прегибридизовали в течение 2 ч при 42 ° C в растворе, содержащем 10X реагент Денхардта (0,2% фиколла, 0.2% поливинилпиролидона, 0,2% бычьего сывороточного альбумина), 5X SSPE (750 ммоль / л NaCl, 50 ммоль / л NaH ₂ PO ₄ , 5 ммоль / л EDTA), 20 г / л SDS, 50% формамид, и 100 мг / л одноцепочечной ДНК спермы лосося. Затем мембрану гибридизовали в том же растворе с зондом кДНК GST Yp, меченным α- ³² P, при 42 ° C в течение ночи. После промывки проводили авторадиографию, экспонируя мембрану рентгеновской пленкой SuperRx (Kodak) при -80 ° C с усиливающим экраном. Полосы на рентгеновской пленке были измерены с помощью AlphaImager 2000 (Alpha Innotech).

«> Статистический анализ.

Данные были проанализированы с помощью однофакторного дисперсионного анализа, и тест Тьюки был использован для проверки значимости влияния времени культивирования или факторов роста в каждой группе, обработанной серной аминокислотой. Двусторонний дисперсионный анализ был использован для проверки взаимодействия серосодержащих аминокислот и факторов роста на уровне белка GST Yp. Группы LSAA и HSAA сравнивали с использованием теста Стьюдента t . Различия со значениями P <0,05 считались значимыми.Все статистические анализы были выполнены с помощью имеющегося в продаже программного обеспечения (SAS Institute).

«> Влияние серных аминокислот на уровень белка GST Yp.

Независимо от содержания серы и аминокислот в среде, экспрессия белка GST Yp увеличивалась со временем инкубации (рис. 1). Однако экспрессия GST Yp увеличивалась раньше в клетках, обработанных средой LSAA, и на 6 день относительный уровень GST Yp был на 94% выше в клетках, обработанных LSAA, чем в клетках, обработанных HSAA.

РИСУНОК 1

Влияние ограничения серной аминокислоты на уровни белка GST Yp в первичных гепатоцитах крысы. ( A ) После 4-часового периода прикрепления клетки оставляли инкубироваться в контрольной среде (HSAA: 0,5 ммоль / л L-метионина и 0,2 ммоль / л L-цистеина) или переводили на LSAA (0,1 ммоль / Л L-метионина и 0,1 ммоль / л L-цистеина) на срок до 6 дней. Для каждой дорожки 5 мкг цитозольного белка разделяли на 10% SDS-полиакриламидных гелях и проводили иммуноблоттинг.( B ) Белок количественно определяли денситометрией, и уровень d 1 для клеток, обработанных HSAA, рассматривали как 1. Каждое значение представляло среднее значение ± стандартное отклонение, n = 4 независимых эксперимента. ^abc Группы на одном носителе, не использующие одну букву, различаются, P <0,05. ^# В отличие от HSAA в это время инкубации, P <0,05.

РИСУНОК 1

Влияние ограничения серы аминокислот на уровни белка GST Yp в первичных гепатоцитах крысы.( A ) После 4-часового периода прикрепления клетки оставляли инкубироваться в контрольной среде (HSAA: 0,5 ммоль / л L-метионина и 0,2 ммоль / л L-цистеина) или переводили на LSAA (0,1 ммоль / Л L-метионина и 0,1 ммоль / л L-цистеина) на срок до 6 дней. Для каждой дорожки 5 мкг цитозольного белка разделяли на 10% SDS-полиакриламидных гелях и проводили иммуноблоттинг. ( B ) Белок количественно определяли денситометрией, и уровень d 1 для клеток, обработанных HSAA, принимали за 1.Каждое значение представляло собой среднее значение ± стандартное отклонение, n = 4 независимых эксперимента. ^abc Группы на одном носителе, не использующие одну букву, различаются, P <0,05. ^# В отличие от HSAA в это время инкубации, P <0,05.

«> Уровень мРНК GST Yp и активность фермента.

Нозерн-блоттинг показал, что экспрессия мРНК GST Yp согласуется с экспрессией белка. Уровни мРНК увеличивались со временем до дня 6 и были выше в клетках, обработанных LSAA в отсутствие инсулина и дексаметазона, чем в клетках, обработанных HSAA (рис. 3). Экспрессия мРНК подавлялась дексаметазоном, но не зависела от инсулина.На 6 день активность фермента GST была значительно выше в клетках, инкубированных в среде LSAA, чем в клетках, инкубированных в среде HSAA [59,1 ± 15,3 против 43,8 ± 7,2 нмоль / (мин · мг белка)].

РИСУНОК 3

Уровни мРНК

GST Yp в первичных гепатоцитах крысы. Клетки культивировали в среде HSAA или LSAA в отсутствие факторов роста (-) или в присутствии инсулина (Ins) или дексаметазона (Dex), соответственно, в течение до 6 дней. Значения представляют собой средние значения ± стандартное отклонение, n = 3 или 4. ^ab Группы, не использующие одну букву, различаются, P <0,05.

РИСУНОК 3

Уровни мРНК

GST Yp в первичных гепатоцитах крысы. Клетки культивировали в среде HSAA или LSAA в отсутствие факторов роста (-) или в присутствии инсулина (Ins) или дексаметазона (Dex), соответственно, в течение до 6 дней. Значения представляют собой средние значения ± стандартное отклонение, n = 3 или 4. ^ab Группы, не имеющие одной буквы, различаются, P <0,05.

. Время, д
. 0
. 1
. 3
. 4
. 6
. мг протеина / пластина HSAA —

7 7 7 7 7 7 5 1,03 ± 0,20 ^bcy 1,02 ± 0,08 ^bcxy 0,94 ± 0,16 ^c Ins 1,47 ± 0,38 ^a 1.65 ± 0,24 ^a 1,40 ± 0,17 ^ax 1,33 ± 0,26 ^ax 0,84 ± 0,13 ^b Dex 1,47 ± 0,38 ^a 1,42 ± 0,155 a 1,11 ± 0,17 ^abxy 0,97 ± 0,17 ^по 0,85 ± 0,07 ^b LSAA75

7547 ± 0,38 ^a 1,46 ± 0,22 ^a 1,28 ± 0,23 ^abxy 1,14 ± 0,25 ^abcxy 0,80 ± 0,23 ^c Ins7 1,45 1,61 ± 0,19 ^a 1,38 ± 0,20 ^abx 1,17 ± 0,25 ^bcxy 0,77 ± 0,15 ^c Dex 1,47 ± 0.38 ^a 1,51 ± 0,31 ^a 1,11 ± 0,27 ^abcxy 1,02 ± 0,22 ^bcxy 0,82 ± 0,18 ^c .

7 7 7 7 7 7 5 1,03 ± 0,20 ^bcy

75

7547 ± 0,38 ^a

Время, д .
0 .	1 .	3 .	4 .	6 .
	мг протеина / пластина
HSAA
—	1,02 ± 0,08 bcxy	0,94 ± 0,16 c
Ins	1,47 ± 0,38 a	1.65 ± 0,24 a	1,40 ± 0,17 ax	1,33 ± 0,26 ax	0,84 ± 0,13 b
Dex	1,47 ± 0,38 a	1,42 ± 0,155 a	1,11 ± 0,17 abxy	0,97 ± 0,17 по	0,85 ± 0,07 b
LSAA
1,46 ± 0,22 a	1,28 ± 0,23 abxy	1,14 ± 0,25 abcxy	0,80 ± 0,23 c
Ins	7 1,45	1,61 ± 0,19 a	1,38 ± 0,20 abx	1,17 ± 0,25 bcxy	0,77 ± 0,15 c
Dex	1,47 ± 0.38 a	1,51 ± 0,31 a	1,11 ± 0,27 abcxy	1,02 ± 0,22 bcxy	0,82 ± 0,18 c

ТАБЛИЦА 1

Изменения содержания белков в клетках гепатоциты, инкубированные в нормальной среде L-15 (HSAA) или в среде с ограничением серных аминокислот (LSAA) ^{1, 2}

7 7 7 7 7 7 6 1.47 ± 0,37 1.03 ± 0,20 ^bcy

.	Время, д .
	0 .	1 .	3 .	4 .	6 .
	мг протеина на пластину
HSAA
—	1,02 ± 0,08 bcxy	0,94 ± 0,16 c
Ins	1,47 ± 0,38 a	1,65 ± 0,24 a	1.65 ± 0,24 a ±	1.65	1,33 ± 0,26 ax	0,84 ± 0,13 b
Dex	1,47 ± 0,38 a	1,42 ± 0,14 a	1,11 ± 0,17	5 abxy .97 ± 0,17 по	0,85 ± 0,07 b
LSAA
—	1,47 ± 0,3846 0,29	1,28 ± 0,23 abxy	1,14 ± 0,25 abcxy	0,80 ± 0,23 c
Ins	1,47 ± 0,38 ab	1.61 ± 0,19 a	1,38 ± 0,20 abx	1,17 ± 0,25 bcxy	0,77 ± 0,15 c
Dex	1,47 ± 0,38 a	a		1,11 ± 0,27 abcxy	1,02 ± 0,22 bcxy	0,82 ± 0,18 c

7 7 7 7 7 7 6 1.47 ± 0,37 1.03 ± 0,20 ^bcy

.	Время, д .
	0 .	1 .	3 .	4 .	6 .
	мг протеина на пластину
HSAA
—	1,02 ± 0,08 bcxy	0,94 ± 0,16 c
Ins	1,47 ± 0,38 a	1,65 ± 0,24 a	1.65 ± 0,24 a ±	1.65	1,33 ± 0,26 ax	0,84 ± 0,13 b
Dex	1,47 ± 0,38 a	1,42 ± 0,14 a	1,11 ± 0,17	5 abxy .97 ± 0,17 по	0,85 ± 0,07 b
LSAA
—	1,47 ± 0,3846 0,29	1,28 ± 0,23 abxy	1,14 ± 0,25 abcxy	0,80 ± 0,23 c
Ins	1,47 ± 0,38 ab	1.61 ± 0,19 a	1,38 ± 0,20 abx	1,17 ± 0,25 bcxy	0,77 ± 0,15 c
Dex	1,47 ± 0,38 a	a		1,11 ± 0,27 abcxy	1,02 ± 0,22 bcxy	0,82 ± 0,18 c

Потому что и L-цистеин, и L-метионин, который превращается в L-цистеин посредством пути, являются лимитирующими аминокислотами для синтеза GSH, изучены изменения содержания GSH в печени.В среде HSAA внутриклеточная концентрация GSH постепенно увеличивалась и достигала максимума при d 3, а затем снижалась (рис. 4). По сравнению с исходным уровнем концентрации GSH были на 100% выше на день 3 (62,6 по сравнению с 30,6 нмоль / мг белка). В клетках, обработанных средой LSAA, GSH постепенно снижался в течение периода культивирования. На d 6 осталось только 18% GSH, измеренного на d 0.

РИСУНОК 4

Содержание GSH в гепатоцитах крысы, дополненное различными уровнями серосодержащих аминокислот.Клетки инкубировали в среде HSAA или LSAA до 6 дней. Содержание GSH определяли с помощью ВЭЖХ. Значения представляют собой средние значения ± стандартное отклонение, n = 5. ^abc Группы на одном носителе, не имеющие одинаковой буквы, различаются, P <0,05. ^# В отличие от LSAA во время инкубации, P <0,05.

РИСУНОК 4

Содержание GSH в гепатоцитах крысы, дополненное различными уровнями серосодержащих аминокислот. Клетки инкубировали в среде HSAA или LSAA до 6 дней.Содержание GSH определяли с помощью ВЭЖХ. Значения представляют собой средние значения ± стандартное отклонение, n = 5. ^abc Группы на одном носителе, не имеющие одинаковой буквы, различаются, P <0,05. ^# В отличие от LSAA во время инкубации, P <0,05.

«> ОБСУЖДЕНИЕ

Несколько линий доказательств указывают на то, что аминокислоты не только действуют как предшественники белков и нейротрансмиттеров, но также играют решающую роль в контроле экспрессии генов (28). В настоящем исследовании мы показали, что экспрессия π-класса GST, детоксикационного фермента фазы II, повышалась, когда гепатоциты культивировались в среде с ограниченным содержанием серы и аминокислот, и что такая модуляция не зависела от дексаметазона и инсулина.Кроме того, отсутствие эффекта других проверенных незаменимых аминокислот, например, L-изолейцина, L-лейцина, L-лизина и L-фенилаланина, предполагает, что индукция этого изофермента GST, вероятно, специфична для серной аминокислоты.

Аминокислоты необходимы для поддержания нормальной функции клеток. Перед лицом аминокислотного голодания происходит адаптация, которая усиливает биосинтез аминокислот за счет усиления экспрессии аспарагинсинтетазы (29) и замедляет скорость роста за счет усиления экспрессии IGFBP (3).Метаболизм лекарств в тканях печени также регулируется диетой с ограничением энергии (30). В отличие от подавления активности цитохрома P ₄₅₀ , экспрессия мРНК GST Ya2 / 3/5 и Yb1 повышается при таком недоедании. Более того, повышающая регуляция изоферментов GST снижается за счет пополнения рациона цистеином или метионином, открытие, которое предполагает критическую роль серосодержащих аминокислот в регуляции экспрессии GST за счет ограничения энергии белка (14). В настоящем исследовании мы также показали, что экспрессия изофермента Yp GST в гепатоцитах крысы увеличивается за счет ограничения поступления серосодержащих аминокислот в культуральную среду.Хотя усиление экспрессии Yp происходило в клетках, культивируемых в среде, ограниченной L-метионином, но не в среде, ограниченной L-цистеином, необходимо подчеркнуть, что нельзя исключить влияние ограничения L-цистеина на регуляцию экспрессии GST Yp. . Это отсутствие эффекта можно объяснить способностью гепатоцитов преобразовывать L-метионин в L-цистеин посредством пути транссульфурации. Этот недавно синтезированный L-цистеин сводит к минимуму нехватку L-цистеина в среде для культивирования клеток.Кроме того, L-цистеин в среде, вероятно, окислился до L-цистина, тем самым уменьшая доступность L-цистеина для клеток. По методу ВЭЖХ (28) через 24 ч приготовления среды оставалось 11,4 ± 3,9% L-цистеина ( n = 3). Эти ограничения затрудняют точное определение действительного эффекта L-цистеина на экспрессию Yp в этом исследовании.

Изофермент Yp GST, которого в нормальной печени крысы практически нет, постоянно экспрессируется после выделения клеток, и эта экспрессия модулируется различными составляющими среды, такими как дексаметазон (21,31).Кроме того, ранее мы сообщали, что FBS положительно влияет на индукцию GST Yp (32). В этом исследовании мы также демонстрируем, что доступность серосодержащих аминокислот модулирует экспрессию GST Yp в первичных гепатоцитах крысы. В первичной культуре гепатоциты подвергаются дедифференцировке. Индукция этого фермента детоксикации, по-видимому, является результатом дедифференцировки, и эта ассоциация может повысить выживаемость клеток после изоляции. Экспрессия GST Yp сильно индуцируется химическими канцерогенами и обычно используется в качестве биохимического маркера во время гепатоканцерогенеза (33).Сильная ассоциация экспрессии GST Yp с опухолевыми клетками рассматривается как механизм выживания, который обеспечивает усиленную пролиферацию в токсичной среде (34).

В настоящем исследовании in vitro только GST Yp, а не Ya или Yb, был активирован в ответ на ограничение серной аминокислоты. Это несоответствие в экспрессии изоферментов GST указывает на то, что генная регуляция GST Yp, вероятно, отличается от таковой Ya и Yb. Генная регуляция включает в себя каскад молекулярных событий, которые активируют факторы транскрипции, которые, в свою очередь, стимулируют экспрессию генов.В промоторных / энхансерных областях GST Ya были идентифицированы 2 важные консенсусные последовательности ДНК, элемент ответа на арилуглеводород и элемент ответа антиоксиданта (ARE) (35,36), ответственных за индукцию транскрипции, когда гепатоциты подвергаются воздействию различных ксенобиотики и прооксиданты, включая перекись водорода, менадион и трет, -бутилгидрохинон (фенольный антиоксидант) (35).

Данные свидетельствуют о том, что семейства белков Nrf и малых Maf факторов транскрипции связываются с ARE и индуцируют расположенные ниже гены (37,38).Было показано, что активация связывания Nrf-1,2 с ARE важна для активации мРНК GST Ya и Yb в печени у крыс, страдающих белково-энергетической недостаточностью (14). Было показано, что активация фосфатидилинозитол-3-киназы, вызванная истощением GSH, также важна для ARE-опосредованной индукции GST Ya2 в клетках гепатомы h5IIE, культивируемых в среде, лишенной метионина и цистеина (39). В настоящем исследовании уровень GST Ya не изменялся в гепатоцитах, обработанных LSAA, даже когда содержание клеточного GSH составляло 20% от содержания клеток, обработанных HSAA.Это повышает вероятность того, что активация ARE за счет истощения GSH является специфической для клеточного типа или что степень истощения GSH в гепатоцитах недостаточна для активации ARE-опосредованной экспрессии GST Ya.

По сравнению с GST Ya, доказательства молекулярной регуляции транскрипции GST Yp ограничены. Хотя в промоторной области GST Yp есть ARE-подобные элементы, их роль в транскрипции GST Yp еще полностью не изучена. Отсутствие нарушения экспрессии мРНК GST Yp, индуцированной олтипразом или 3H-1,2-дитиол-3-тионом, у мышей с нокаутом Nrf2 (40,41) предполагает, что экспрессия GST Yp не опосредуется путем Nrf2-ARE.Однако Икеда и др. (42) сообщили, что связывание Nrf2 с ARE-подобными сайтами связывания участвует в индукции гена GST Yp мыши. GST Yp крысы может быть активирован посредством Nrf2-опосредованной индукции в клетках гепатомы h5IIE, но не в нормальных клетках печени (43). Вместо этого ключевую роль может играть энхансер I GST Yp (GPEI), расположенный в -2,5 т.п.н. (44). GPEI содержит 2 форбол 12- O -тетрадеканот 13-ацетатный элемент ответа (TRE) -подобные элементы, которые имеют активирующий белок (AP) -1-подобные сайты связывания (45), и оба необходимы для базовой и индуцибельной экспрессии GST Yp (46,47).Например, TRE необходим для индукции транскрипции GST Yp 3,4,5,3 ‘, 4’-пента-хлорированным бифенилом в первичных гепатоцитах (46). Ингибирование мРНК GST Yp и экспрессии белка дексаметазоном, которое имело место в настоящем исследовании (рис.2 и 3), также считалось происходящим через путь AP-1, поскольку дексаметазон действует как антагонист фактора транскрипции AP-1 (31). . Хотя фактический молекулярный механизм индукции серной аминокислотой экспрессии гена GST Yp неясен, TRE вряд ли является единственным ответом, поскольку дексаметазон, по-видимому, неэффективен в блокировании позитивной регуляции рестрикции серных аминокислот (рис.2). Возможными кандидатами являются пути, отличные от подавленного глюкокортикоидами связывания AP-1 с TRE, такие как ARE, активируемый истощением GSH, и другие неидентифицированные факторы.

CHOP и аспарагинсинтетаза (AS) — два наиболее изученных гена млекопитающих, экспрессия которых регулируется аминокислотами. Обнаружение того, что ограничение лейцина индуцирует CAT-активность репортерных конструкций, содержащих промоторную область CHOP или AS, подтверждает участие элементов ответа и транскрипционных факторов в индуцированной аминокислотами транскрипции CHOP и AS (29,48).Даже в этом случае характер экспрессии CHOP и AS в ответ на ограничение аминокислот несколько различается. CHOP сильно индуцируется недостатком метионина и лишь незначительно индуцируется недостатком гистидина, цистеина или аспарагина. Однако AS постоянно индуцируется в ответ на депривацию любой из этих аминокислот (49). Несоответствие в экспрессии CHOP и AS в ответ на ограничение аминокислот указывает на то, что регуляция генов CHOP и AS в некоторой степени различается. Поскольку индукция GST Yp происходила исключительно с ограничением серной аминокислоты, а не с ограничением L-лейцина, L-изолейцина, L-лизина или L-фенилаланина, механизм регуляции GST Yp с помощью серосодержащих аминокислот, вероятно, отличается от механизма регулирования ЧОП и АС.

У млекопитающих некоторые физиологические функции, участвующие в защите от аминокислотного голодания или адаптации к нему, регулируются посредством регуляции экспрессии многочисленных генов. Результаты настоящего исследования ясно показывают, что экспрессия гена GST Yp активируется в первичных гепатоцитах крысы за счет ограничения L-метионина и L-цистеина. Отсутствие реакции на другие протестированные аминокислоты предполагает, что такой эффект, вероятно, специфичен для серной аминокислоты. Требуются дальнейшие исследования молекулярных механизмов, участвующих в регуляции экспрессии гена GST Yp с помощью L-метионина и L-цистеина.

«> Сокращения

• AP

• ARE

  элемент антиоксидантного ответа

• AS

• CA III

• CHOP

  CCAAT / энхансер-связывающий белок 927 Гомологичный белок C / EBP 27 927

  глутатион S -трансфераза Yp энхансер I

• GSH

• GST

  глутатион S -трансфераза

• 9000 -000 -трансфераза

• 9000-4000 HSAA

• 6

9273 1

• LSAA

• TRE

  форбол 12- O -тетрадеканот 13-ацетатный ответный элемент

Заметки автора

© 2005 Американское общество диетологии

Подход, подчеркивающий различия в локальной гидрофильности

Различия в первичной структуре HSA и BSA

Теперь мы сосредоточимся на определении молекулярного происхождения различий, происходящих от DEER, между структурами раствора BSA и HSA.С этой целью мы тщательно изучаем первичные аминокислотные последовательности обоих белков, особенно различия в их индивидуальной гидрофобности. Поскольку локальные термодинамические величины являются ключевыми величинами любого исследования биохимических процессов в растворе, гидрофильность и гидрофобность являются очень важными параметрами, описывающими взаимодействия между растворителем (для белков, по сути, водой) и растворенным веществом [38]. Биохимические причины аминокислотных различий могут быть самыми разными, помимо эволюционных различий, напримерДоступность определенных питательных веществ может играть роль, которая, как предполагалось, ведет к эпигенетическому образованию аллоальбуминов между отдельными видами [30].

В настоящее время используется множество различных методов оценки гидрофобных участков белков, например потенциал молекулярной гидрофобности, MHP [31], [32]. Мы проконсультировались с четырьмя довольно простыми шкалами гидропатии независимого происхождения, чтобы получить количественный анализ различий в гидрофобности / гидрофильности BSA и HSA. Мы придерживаемся шкал Engelman et al.(GES) [39], Eisenberg et al. (ES) [40], Надери-Манеш и др. (Нью-Мексико) [41] и Кайт и Дулиттл (К.Д.) [42].

Мы подробно сравнили кросс-корреляции между этими четырьмя шкалами в вспомогательной информации S1 и обнаружили линейную зависимость между шкалами, которую можно количественно оценить с помощью значения r Пирсона, которое во всех случаях составляет> ± 0,85 (Таблица S1 , Рис. S7). Таким образом, все шкалы гидропатии сильно коррелированы друг с другом, хотя имеют разные теоретические и экспериментальные основы.

После доказательства того, что все четыре шкалы гидропатии по существу и количественно приводят к одним и тем же результатам, и поэтому для следующего обсуждения мы в основном обсуждаем различия BSA-HSA с точки зрения шкалы гидропатии Kyte & Doolittle, которая является наиболее часто используемой и простой. , но интуитивно понятная шкала для термодинамической характеристики аминокислот. В частности, индекс гидропатии (HI) по шкале Kyte & Doolittle описывает изменение энергии Гиббса при воздействии воды на аминокислоту из чисто гидрофобной среды.Следовательно, отрицательные значения гидропатии обозначают полярные и сильно связывающие водород аминокислоты, а положительные значения обозначают гидрофобные аминокислоты. Мы сравнили каждую конгруэнтную аминокислоту HSA и BSA (т.е. диапазон окна по Кайту и Дулиттлу равен 1), чтобы получить результирующую чистую разность индекса гидропатии ΔHI путем вычитания соответствующих значений (см. Уравнение S1). Это позволяет акцентировать внимание на различиях и дополнительно снижает шумные масштабы. Положительные значения ΔHI можно интерпретировать как гидрофобные, а отрицательные — как гидрофильные сдвиги в HSA.При необходимости мы также сравниваем действующие аминокислоты и их гидропатии одну за другой (рис. S5 – S6). Обратите внимание, что шкала гидропатии KD часто используется для мембраносвязанных белков [42], [43] с диапазоном окон от 7 до 20 аминокислот.

Мы подробно исследуем индивидуальные остатки и не усредняем гидропатии, используя окна большего размера. Подробное объяснение этого обращения можно найти во вспомогательной информации S1.

Обратите внимание, что здесь мы просто пытаемся соотнести различия гидропатии и положения в кристаллической структуре с наблюдаемыми расхождениями в структурах наших растворов.

В целом, HSA (общая гидропатия Ω _HSA = −230,8, см. Уравнение S2) имеет превышение на 48,4 балла гидропатии по сравнению с BSA (Ω _BSA = −279,2), и, таким образом, HSA в целом должен быть более гидрофобным. Эту тенденцию можно подтвердить по всем другим 3 шкалам (баллы избыточной гидропатии HSA: GES: 9,4; ES: 16,8; NM: 34,8), когда они нормированы на KD (Таблица S2). Примечательно, что при изучении различных положений остатков становится очевидным, что эти отклонения не распределяются равномерно по всей последовательности, а возникают скорее сгруппированными (см.рис.S4). Аналогичное наблюдение было также сделано Billeter et al. [44] при сравнении структур прионных белков у разных видов млекопитающих.

Многие различия альбумина проявляются даже в остатках, которые находятся на поверхности, что важно, если иметь в виду, что HSA можно считать менее гидрофильным, чем BSA, о чем свидетельствует их Ω _x . Не претендуя на полноту, мы явно идентифицировали четыре региона, которые представляют большой интерес по структуре и функциям, которые демонстрируют накопление аминокислотных различий и экстремумов ΔHI между BSA и HSA: пересечение между субдоменами IB и IIIA, расположенными заметно в в центре белка — открытая поверхность петли в субдомене IIB и два сайта связывания FA, обычно называемые сайтами 2,4 и 5 [45].Эти области показаны на рис. 4. Интересно, что Majorek et al. [35] обнаружили очень похожие области во время идентификации эпитопов антител для иммунологических исследований бычьего (BSA), лошади (ESA) и сывороточного альбумина кролика (RSA). Таким образом, не будет надуманным предположить, что эти области обладают особой функциональностью в сочетании с водной средой для любого лиганда, который должен быть связан с альбумином.

Теперь мы более подробно описываем эти области и подробно сообщаем о различиях между BSA и HSA с точки зрения индекса гидропатии KD.Обратите внимание, что на рисунках 5–8 мы тем не менее представляем различия в гидропатии для всех четырех протестированных шкал гидропатии, чтобы прояснить, что наше обсуждение не привязано к выбранному индексу гидропатии. На рис. 5 показана область между субдоменами IB и IIIA, доступная для растворителя. За исключением одного аргинина, HSA и BSA различаются по аминокислотной последовательности по всей спирали между остатками 182 и 191 в IB, хотя образуют эквивалентный массив спиралей, как предположили Kabsch и Sander [46]. В то время как остатки 182, 185, 188, 189, 195 и 199 недоступны для растворителя, остатки 184, 190 и 191 подвергаются действию растворителя и доступны из воды.Было обнаружено, что ΔHI между обоими белками очень высока в этой области; HSA, по-видимому, обладает чрезвычайно сильными гидрофильными свойствами, в то время как BSA сильно гидрофобен по аналогичным остаткам 189 и 190.

Рисунок 5. Область пересечения.

( A ) Область пересечения между субдоменами IB и IIIA HSA со связанной стеариновой кислотой (pdb-ID: 1e7i). Идентичные аминокислоты в HSA и BSA окрашены в синий цвет, разные аминокислоты — в красный цвет. ( B ) График ΔHI для остатков 180–200 и 452–460.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0045681.g005

Рисунок 6. Область петли.

( A ) Субдомен IIB HSA со связанными стеариновыми кислотами (pdb-ID: 1e7i). Идентичные аминокислоты в HSA и BSA окрашены в синий цвет, разные аминокислоты — в красный цвет. ( B ) График ΔHI для остатков 297–320 и 351–380.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0045681.g006

Рисунок 7. Сайт 1.

( A ) Сайт 1 в субдомене IB в HSA со связанными стеариновыми кислотами (pdb-ID: 1e7i ).Идентичные аминокислоты в HSA и BSA окрашены в синий цвет, разные аминокислоты — в красный цвет. ( B ) График ΔHI для остатков 119–136 и 154–168.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0045681.g007

Рисунок 8. Сайт 5

( A ) Сайт 5 в субдомене IIIB в HSA со связанной стеариновой кислотой (pdb-ID: 1e7i). Идентичные аминокислоты в HSA и BSA окрашены в синий цвет, разные аминокислоты — в красный цвет. ( B ) График ΔHI для остатков 498–509 и 560–580.

https://doi.org/10.1371/journal.pone.0045681.g008

Если внимательно присмотреться, остаток 190 (K = -3,9) в HSA соответствует L = 3,8 в BSA. Это указывает на то, что эти домены могут иметь различную гибкость в соответствии с теорией Лам-Чандлера-Уикса (LCW-) [7]. Таким образом, их взаимодействия с водой явно различаются, что можно объяснить иммобилизацией двух доменов в BSA между гидрофобными остатками 455 (L) и 456 (I) и противоположными сегментами 189 (V) и 190 (L).В HSA эта область может просто оставаться доступной для воды из-за сильно гидрофильных остатков, а также может рассматриваться как указание на «настройку» топологии локальной структуры раствора с помощью воды. Кроме того, остаток 189 варьируется от G (-0,4) в HSA до более гидрофобного V (4,2) в BSA. Следовательно, BSA может создавать зону высыхания фазового перехода, которая снижает плотность воды между обоими доменами.

Последовательность, принадлежащая спирали от 455 до 457 в домене III B, также различается по составу, но в обоих белках ее можно рассматривать как чрезвычайно гидрофобную.В целом, учитывая заметное междоменное положение, гибкость настройки и взаимодействие с водой в этой точке вполне могут вызвать структурные различия в более крупном масштабе топологии.

Другой представляющий интерес сайт обнаружен в субдомене IIB, где обнаружены значительные аминокислотные различия между BSA и HSA (см. Фиг. 6). Петля между 295 и 312 подвержена воздействию растворителя, а остатки 297 и 300 показывают большие отклонения от гидропатии. HSA имеет набор более гидрофобных остатков от 300 до 320 по сравнению с соответствующими остатками в BSA.Другие существенные различия альбумина находятся в непосредственной близости от этой петли и расположены на противоположной петле, подверженной воздействию растворителя, в диапазоне от остатков 360 до 376. Существует сильный гидрофобный сдвиг в сторону HSA на остатках 363 и 364. Эти аминокислоты находятся прямо на наконечник указывает в объем воды. Гипотетически подвергая эту область воздействию воды, можно было представить, что она перевернется внутри белка и изменит форму белка, потенциально становясь немного более глобулярным.

Будучи соединенными с несколькими спиралями в HSA, можно предположить, что перестройки в этих заметно открытых петлях, которые обладают высокой степенью свободы движения, оказывают значительное влияние на третичную структуру. Обратите внимание, что очень похожие наблюдения были сделаны для кальмодулина и тропонина C [28], и такой аргумент также подтверждается Kim et al. [47], которые обнаружили методами ЭПР, что влияние растворенных веществ на конформационную выборку петель может приводить к более компактной (глобулярной) форме транспортеров наружной мембраны.В отличие от HSA, BSA (по крайней мере, без жирных кислот) очень вероятно подвергает эту область воздействию воды, имея набор сильно гидрофильных остатков от положения 363 до 367 (K, D, D, P, H) и от 311 до 323. на противоположной петле. Интересный взгляд на противоположные гидрофильные остатки был дан Бен Наимом [4], который утверждает, что молекулы воды могут сшивать два домена, образуя двойные водородные мосты между ними. Такое доменное соединение и лучшее включение этих петель в сеть водородных связей для BSA может вместе привести к снижению конформационной гибкости в этой решающей точке.

На фиг. 7 показан один из сайтов связывания жирных кислот, обычно обозначаемый как сайт 1. Он расположен в центре четырехспирального пучка субдомена IB. Этот сайт доступен для платежеспособности. Положения конгруэнтных аминокислот в HSA снова более гидрофобны по сравнению с BSA. Точнее, все значительно более гидрофобные остатки 120, 122, 126 в HSA расположены на небольшой открытой спирали. Положения 156 и 157 также в значительной степени гидрофобны в HSA, в то время как следующие четыре остатка из положений 159–162 являются чрезвычайно гидрофильными в обоих белках.Обратите внимание, что только две аминокислоты идентичны в диапазоне 156–164 (Y и A, см. SI рис. S5 и S6). Это может указывать на различие в том, как связываются ЖК в двух белках. Форма связывающего кармана может быть изменена, и экспозиция воды может быть настроена аналогично механизму, который можно предположить для субдомена IIB (рис. 6).

В случае сайта связывания жирных кислот 5 (см. Фиг. 8) наблюдаемая до сих пор картина, согласно которой HSA, как правило, более гидрофобен в отношении остатков, подверженных воздействию растворителя, фактически инвертирована.

HSA имеет сильно гидрофильные остатки от 560 до 577 по сравнению с остатками BSA. Сайт связывания 5 можно найти в гидрофобном канале субдомена IIIB. За исключением остатка 579, все аминокислоты в этой области подвергаются воздействию растворителя, а остаток 570 имеет очень высокое значение ΔHI -7,7 между HSA (E = -3,5) и BSA (V = 4,2). Он расположен далеко от точки входа в ТВС, но отмечает переход от спиральной к петлевой области, которая может управлять движением спиралей, образующих вход в ТВС.Вокруг сайта связывания 5 оба белка могут иметь явно разные конформации раствора, так как остаток 560, расположенный на другом конце этой петли, может способствовать формированию шарнирной задачи в HSA. При сравнении кристаллических структур HSA 1e7i с 1BM0 (со связанными FA и без них), именно участок 5 физически сдвигается примерно на полнанометра, когда связаны длинные цепочки FA [27].

Противоположная сторона точки входа связывающего канала образована петлей из остатков с 501 по 506, которые все открыты на поверхности.ΔHI резко меняется от остатка 501, где заряженная, сильно гидрофильная глутаминовая кислота в HSA сочетается с нейтральным, слегка гидрофобным аланином в BSA (E _HSA -A _BSA = -5,3), до остатка 504, где это инвертировано ( A _HSA -E _BSA = 5,3) и в остатке 506, где треонин в HSA с довольно нейтральным HI соответствует сильно гидрофобному лейцину в BSA (T _HSA -L _BSA = -4,5). В HSA этот полный ряд аминокислот чередуется между гидрофильными и гидрофобными, тогда как в BSA эта петля в целом гораздо более гидрофобна (см.рис.S5 C ). Следовательно, взаимодействие с водой поверхностной области сайта 5 в HSA явно отличается от взаимодействия в BSA. Для HSA область спирали 570–580 явно более гидрофильна, чем для BSA, т.е. также лучше «заякорена» в сети Н-связей.

Рассуждая о молекулярном механизме связывания FA, противоположная область петли может играть решающую роль, будучи перевернутой внутрь (закрытая) или наружу, подвергаясь воздействию растворителя (открытая). BSA также явно более гидрофобен в области петли, в то время как HSA снова дополняет интересный, чередующийся образец сильно гидрофильных и гидрофобных аминокислот.Этот паттерн — который, как можно предположить, не имеет сильной энергетической и энтропийной склонности ни подвергаться воздействию воды, ни быть похороненным — может снова привести к большей конформационной гибкости [48] и адаптивности HSA.

Корреляция различий в первичных структурах, кристаллических структурах и структурах раствора

Несмотря на схожую первичную структуру BSA и HSA, наши экспериментальные результаты DEER — насколько нам известно впервые — показывают, что BSA является довольно жестким в растворе и явно отличается по своей функциональной структуре от HSA на наноуровне.Мы идентифицировали четыре области в обоих белках (не обязательно полные), которые содержат сильно различающиеся аминокислоты. Хотя мы не можем напрямую проследить очевидную разницу между структурами растворов BSA и HSA с различиями в гидропатиях, мы можем правдоподобно утверждать, что кластерные различия аминокислот вполне могут привести к серьезным изменениям в структуре при воздействии воды, как это наблюдалось для других белков ранее [10], [28].

Поразительно, что сходство аминокислотной последовательности и кристаллической структуры между HSA и BSA отражено в структуре раствора BSA.В нашем «крупнозернистом» обзоре связанных ЖК мы находим отчетливую картину из трех пиков, сильно напоминающую распределение ЖК в кристаллической структуре HSA. Поскольку в настоящее время для BSA не существует кристаллической структуры, содержащей FA, можно сделать вывод, что кристаллическая структура HSA, которая, весьма вероятно, описывает конформацию, близкую к минимуму поверхности потенциальной энергии, является очень хорошим описанием энергетического минимума в загруженных FA. BSA тоже. Основываясь на наших результатах DEER, можно правдоподобно предположить, что в растворе HSA, в отличие от BSA, приобретает гораздо большую конформационную гибкость, а в общем конформационном ансамбле HSA гораздо более симметричная поверхность подвергается воздействию потенциальных лигандов для транспортировки.Кажется, что BSA не обладает такой гибкостью на поверхности, что на самом деле может влиять на функцию белка. Следует отметить, что хотя белки со схожими функциями у разных видов могут иметь сходные кристаллические структуры [49], их функциональные свойства в растворе могут существенно различаться. Это было, например, подтверждено недавними исследованиями, показывающими, что вода, взаимодействуя с растворенными веществами, может сильно влиять на функциональные свойства [6]. Непосредственная близость воды к протяженным поверхностям с гидрофобными свойствами энергетически невыгодна, поскольку сети водородных связей больше не могут поддерживаться.В результате плотность воды уменьшается вблизи гидрофобной поверхности, что приводит к переходу к высыханию, не в последнюю очередь в зависимости от масштаба [6], [7], [38]. Кроме того, мы недавно показали, что даже метильные группы метанола в смесях вода-метанол окружают небольшие неорганические дисульфонаты, так что они меньше всего нарушают сеть водородных связей [50].

Kabsch и Sander [46] очень четко объяснили, что гомологии аминокислотных последовательностей в белках не обязательно обнаруживают функциональные отношения между ними.Более того, гомологи последовательностей не обязательно должны иметь идентичные конформации в своих кристаллических структурах. Как видно из сравнения структур HSA и BSA (pdb-IDs 1BM0 и 3v03 соответственно), 75,52% гомологии последовательностей, с другой стороны, могут давать почти идентичные трехмерные кристаллические структуры (см. Рис. 4), что подтверждает, что Порог 3-D структурной гомологии для белков длиннее 80 остатков дает аналогичные структуры уже для 25% соответствия последовательности [51]. Эти аминокислотные различия, следовательно, не очень сильно изменяют энергетически минимизированное состояние, лишенное воды.Мы определили, что многие различия аминокислотных последовательностей сгруппированы в определенных областях белка, которые могут очень сильно влиять на связывание FA (сайты связывания 1 и 5) или даже на глобальную структуру (центральный интерфейс между субдоменами IB и IIIA и участками петель). в поддомене IIB). Например, кажущаяся жесткость, наблюдаемая в BSA, может быть аккредитована частично, по крайней мере, с гидропатическим «замком» в заметной области пересечения между субдоменами IB и IIIA (см. Рис. 5), в то время как в HSA вода может быть способна проникать более глубоко. проникнуть в эту область пересечения.Кроме того, область петли на конце субдомена IIB настолько сильно подвержена воздействию воды и одновременно связывает длинные спиральные области, что даже небольшие изменения гидрофобности (HSA, подвергающий несколько гидрофобных аминокислот воздействию воды) могут хорошо повысить структурную подвижность и прямые структурные изменения на кажущихся отдаленных участках. регионы аллостерическими эффектами. Судя по нашим измерениям функциональных структур в растворе, полученным с помощью DEER, эти различия, следовательно, кажутся скорее коррелированными с конкретными модификациями для настройки формы, гибкости, адаптивности и связывающей способности белка путем взаимодействия с окружающими молекулами растворителя и влияния на колебания. по плотности воды [5] — [7].

Существует очень интересный недавний подход ядерного магнитного резонанса (ЯМР) от Nucci et al. [10] с использованием отношения NOE / ROE в ЯМР и инкапсуляции обратной мицеллы для мониторинга гидратации белка. Авторы обнаружили, что по всей поверхности белка есть участки кластеров гидратации с сильно различающейся динамикой, что можно рассматривать как свидетельство того, что вода играет главную роль в изменении функций белка, таких как формирование, складывание, стабильность и динамика. Используя ¹³ C-ЯМР, Marlow et al.[48] ​​пошли еще дальше и связали гидрофобный эффект с конформационной энтропией, которая, как предполагается, играет ключевую роль в связывании лиганда. Наши результаты, полученные с учетом местных особенностей гидропатии и крупнозернистой (основанной на ЭПР) структурной информации, позволяют прийти к аналогичным выводам. Путем сравнения аффинности связывания бромкрезолового зеленого (БЦЖ) различных альбуминов сыворотки млекопитающих [15] было обнаружено, что замена только одной аминокислоты в области связывающего кармана, как показано с аллоальбуминами макаки-резуса, может дать существу эволюционное преимущество [15]. 30], или делает выбор между физиологически активными белками или их патологическим накоплением амилоидных фибрилл в ткани [52] — [54].Деполяризация фосфоресценции использовалась для понимания взаимосвязи между структурой раствора и кристаллической структурой HSA и BSA. Было обнаружено, что общая конформация в нейтральном растворе БСА очень похожа на сердцевидную структуру, наблюдаемую в кристалле ЧСА [12]. Вот что мы сейчас видим в деталях: поверхность BSA, зондированная 16-DSA, отражает кристаллическую структуру HSA. Напротив, мы показываем, что структура раствора HSA, исследованного с помощью 16-DSA, отличается от его кристаллической структуры.

Принимая во внимание, что переходные зоны высыхания возникают рядом с гидрофобными остатками [7], выраженная конформационная гибкость на поверхности HSA вполне может быть коррелирована с отсутствием энергетически выгодных взаимодействий с водой.Это количественно и отражается в сумме избыточной чистой гидропатии, равной 48,4 (Ω _{кД, HSA} — Ω _{кД, BSA} ) по сравнению с BSA, что означает, что HSA значительно менее гидрофильный. Обратите внимание, что локально многие из этих в целом различных, более гидрофобных сайтов в HSA явно подвержены воздействию воды. Можно предположить, что, подвергая воздействию большего количества гидрофобных аминокислот, HSA может лучше привлекать и предварительно связывать гидрофобные или амфифильные лиганды, такие как ЖК. Кроме того, менее индивидуальные благоприятные взаимодействия с водой (см.рис.6 и 7) в решающих точках или коротких последовательностях и меньшее включение в водородную сеть водородных связей может рассматриваться как снижение общей третичной структурной стабильности белка, что может вынудить HSA отбирать большее конформационное пространство и локально проявлять много повышенная гибкость. Согласно теории LCW [7], гибкость в наших терминах также может быть описана как плотность воды и, таким образом, снижение вязкости на гидрофобных поверхностях, что, конечно, приводит к увеличению среднеквадратичного смещения гидрофобных остатков, которые могут e.грамм. описываться простым и хорошо известным уравнением Стокса-Эйнштейна [55]. Все эти локальные изменения могут затем глобально складываться в структуру раствора, которая сильно отклоняется от соответствующей кристаллической структуры и которая может даже считаться специализированной для различных функциональных возможностей. В случае альбуминов, показанных в этом исследовании, этими функциональными особенностями являются образование, расположение, сродство и гибкость сайтов связывания для лигандов с низкой полярностью / гидрофильностью, таких как ЖК.

ALB — предшественник альбумина — Homo sapiens (человек)

51 Графическое представление

N-связанный (Glc) (гликирование) лизин; in vitro

Ручное утверждение, основанное на эксперименте в ⁱ

• Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ В LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.

902

75 1

Вариант Kenitra частично O-гликозилирован по Thr-620. Он имеет две новые дисульфидные связи Cys-600 с Cys-602 и Cys-601 с Cys-606.

Гликозилированный у больных сахарным диабетом.

Ацетилирован Lys-223 ацетилсалициловой кислотой.

Условное обозначение	Позиция (я)	Описание Действия	Графическое изображение	Длина
Этот подраздел раздела «PTM / Обработка» обозначает присутствие N-концевого сигнального пептида. Подробнее … Сигнальный пептид i	1–18	Добавить BLAST		18
В этом подразделе раздела PTM / Processing описывается пропептид, который является частью белка. который расщепляется во время созревания или активации. После расщепления пропептид обычно не имеет независимой биологической функции. Подробнее … Propeptide i PRO_0000001067	19–24			6
В этом подразделе раздела «PTM / Обработка» описывается протяженность полипептидной цепи в зрелом белке после процессинга или протеолитического расщепления. Подробнее … Цепь i PRO_0000001068	25-609	AlbuminAdd BLAST		585
Функциональный ключ	Положение (я)	Описание Действия	Длина
В этом подразделе раздела «PTM / Обработка» указываются положение и тип каждого измененного остатка, за исключением lipids , гликаны и перекрестные ссылки протеина . Подробнее … Модифицированный остаток i	29	Фосфосерин; по FAM20C Ручное утверждение на основе эксперимента в i «Одна киназа генерирует большую часть секретируемого фосфопротеома.» Tagliabracci VS, Wiley SE, Guo X., Kinch LN, Durrant E., Wen J., Xiao J., Cui J., Nguyen KB, Engel JL, Coon JJ, Grishin N., Pinna LA, Pagliarini DJ , Dixon JE Cell 161: 1619-1632 (2015) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract] Цитируется по: ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ В SER-29; SER-82; SER-89 И THR-107.		1
Этот подраздел PTM / Processing указывается положение и тип каждой ковалентно присоединенной гликановой группы (моно-, ди- или полисахарид). Подробнее … Гликозилирование i	36	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин Ручное утверждение на основе эксперимента в i Указано для: ГЛИКАЦИЯ НА LYS-36; LYS-223; LYS-257; LYS-305; LYS-341; LYS-375; LYS-463; LYS-549 И LYS-558.		1
Гликозилирование i	75	N-связанный (Glc) (гликозилирование) лизин; in vitro Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ В LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Этот подраздел раздела PTM / Processing «: / help / ptm_processing_section описывает положения остатков цистеина, участвующих в дисульфидных связях. Подробнее .. . Дисульфидная связка i	77 ↔ 86	Подтвержденная вручную информация, созданная автоматической системой аннотаций UniProtKB. Подробнее… Ручное утверждение в соответствии с правилами i Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и вычислительных данных i Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Цитируется по: DISULFIDE BONDS. Цитируется по: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2.65 АНГСТРОМОВ) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ ЕГО-91.
Модифицированный остаток i	82	Фосфосерин; by FAM20C Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и расчетных данных. i Цитируется по: ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ АНАЛИЗ] В SER-82, ИДЕНТИФИКАЦИЯ С ПОМОЩЬЮ МАССОВОЙ СПЕКТРОМЕТРИИ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ]. Процитировано для: ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ АНАЛИЗА] В SER-82; SER-89 И SER-513, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПОМОЩЬЮ МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ АНАЛИЗА]. Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i «Одна киназа генерирует большую часть секретируемого фосфопротеома». Tagliabracci V.S., Wiley S.E., Guo X., Kinch L.N., Durrant E., Wen J., Xiao J., Cui J., Nguyen K.B., Engel J.L., Coon J.J., Гришин Н., Пинна Л.А., Пальярини Д.Д., Диксон Дж. Э. Cell 161: 1619-1632 (2015) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат] Цитируется по: ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ В SER-29; SER-82; SER-89 И THR-107.		1
Модифицированный остаток i	89	Фосфосерин; по FAM20C Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и расчетных данных i Цитируется по: ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ АНАЛИЗ] В SER-82; SER-89 И SER-513, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПОМОЩЬЮ МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ АНАЛИЗА]. Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i «Одна киназа генерирует большую часть секретируемого фосфопротеома». Tagliabracci VS, Wiley SE, Guo X., Kinch LN, Durrant E., Wen J., Xiao J., Cui J., Nguyen KB, Engel JL, Coon JJ, Grishin N., Pinna LA, Pagliarini DJ, Dixon JE Cell 161: 1619-1632 (2015) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract] Цитируется по: ФОСФОРИЛИРОВАНИЕ В SER-29; SER-82; SER-89 И THR-107.		1
Дисульфидная связь i	99 ↔ 115	Ручное утверждение в соответствии с правилами i Ручное утверждение, выведенное из комбинации 9 i4000 экспериментальных и расчетных данных Ручное утверждение на основе эксперимента в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Цитируется по: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2.65 АНГСТРОМОВ) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ ЕГО-91.
Модифицированный остаток i	107	Фосфотреонин; by FAM20C Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i «Одна киназа генерирует большую часть секретируемого фосфопротеома». Тальабраччи В.С., Вайли С.Э., Го Х., Кинч Л.Н., Даррант Э., Вен Дж., Сяо Дж., Цуй Дж., Нгуен К.Б., Энгель Дж. Л., Кун Дж. Дж., Гришин Н., Пинна Л. А., Пальярини Д. Д., Диксон Д. Е. Cell 161: 1619-1632 (2015) [PubMed] [Europe PMC] [Реферат] Цит. -29; SER-82; SER-89 И THR-107.		1
Дисульфидная связь i	114 ↔ 125	Ручное утверждение в соответствии с правилами i Ручное утверждение, выведенное из комбинации 9 i4000 экспериментальных и расчетных данных Ручное утверждение на основе эксперимента в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Процитировано для: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2,65 АНГСТРОМА) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ HIS-91.
Дисульфидная связь i	148 ↔ 193	Утверждение вручную в соответствии с правилами i Утверждение вручную на основе комбинации экспериментальных и расчетных данных на основе 9000 на эксперименте в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Процитировано для: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2,65 АНГСТРОМА) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ HIS-91.
Гликозилирование i	161	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин; in vitro Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ В LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Гликозилирование i	186	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин; in vitro Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ В LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Дисульфидная связь i	192 ↔ 201	Утверждение вручную в соответствии с правилами i Утверждение вручную на основе комбинации экспериментальных и расчетных данных 6 9000 Утверждение, основанное на эксперименте в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Цитируется по: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2.65 АНГСТРОМОВ) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ ЕГО-91.
Гликозилирование i	223	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин; in vitro Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Цитируется по: ГЛИКАЦИЯ НА LYS-223 И LYS-549. Указано за: GLYCATION AT LYS-36; LYS-223; LYS-257; LYS-305; LYS-341; LYS-375; LYS-463; LYS-549 И LYS-558.		1
Дисульфидная связь i	224 ↔ 270	Ручное утверждение в соответствии с правилами i Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и расчетных данных 9 i400056 Ручное утверждение на основе эксперимента в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Цитируется по: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2.65 АНГСТРОМОВ) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ ЕГО-91.
Модифицированный остаток i	229	N6-сукциниллизин Ручное утверждение, выведенное из сходства последовательностей с i		1 9029		1	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин; in vitro Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ В LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Гликозилирование i	257	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин Ручное утверждение на основе эксперимента в i 2 PROTED для 93: SEED OF 250-264, ГЛИКАЦИЯ НА ЛИС-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии. Процитировано за: GLYCATION AT LYS-36; LYS-223; LYS-257; LYS-305; LYS-341; LYS-375; LYS-463; LYS-549 И LYS-558.		1
Дисульфидная связь i	269 ↔ 277	Ручное утверждение в соответствии с правилами i Ручное утверждение, выведенное из комбинации 955 9 i и расчетных данных 05 Ручное утверждение на основе эксперимента в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Процитировано для: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2,65 АНГСТРОМА) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ HIS-91.
Дисульфидная связь i	289 ↔ 303	Утверждение вручную в соответствии с правилами i Утверждение вручную, выведенное из комбинации экспериментальных и вычислительных доказательств 9000 на эксперименте в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Процитировано для: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2,65 АНГСТРОМА) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ HIS-91.
Модифицированный остаток i	297	Фосфосерин Ручное утверждение, выведенное из сходства последовательностей с i		1
	1
Дисульфидная связь i	302 ↔ 313	Ручное утверждение в соответствии с правилами i Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и вычислительных данных 9000 Утверждение, основанное на эксперименте в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Цитируется по: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2.65 АНГСТРОМОВ) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ ЕГО-91.
Гликозилирование i	305	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин Ручное утверждение на основе эксперимента в i -36; LYS-223; LYS-257; LYS-305; LYS-341; LYS-375; LYS-463; LYS-549 И LYS-558.		1
Гликозилирование i	337	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин; in vitro Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ В LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Дисульфидная связь i	340 ↔ 385	Ручное утверждение в соответствии с правилами i Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и 6 результатов 9000 i 6 9000 Утверждение, основанное на эксперименте в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Цитируется по: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2.65 АНГСТРОМОВ) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ ЕГО-91.
Гликозилирование i	341	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин Ручное утверждение на основе эксперимента в i -36; LYS-223; LYS-257; LYS-305; LYS-341; LYS-375; LYS-463; LYS-549 И LYS-558.		1
Гликозилирование i CAR_000226	342	N-связанный (GlcNAc…) аспарагин; в варианте Redhill		1
Гликозилирование i	347	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин; in vitro Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ В LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Гликозилирование i	375	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин Ручное утверждение на основе эксперимента в CE i 2 PROTED для 93: SEED для 93: SE. OF 250-264, ГЛИКАЦИЯ НА ЛИС-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии. Процитировано за: GLYCATION AT LYS-36; LYS-223; LYS-257; LYS-305; LYS-341; LYS-375; LYS-463; LYS-549 И LYS-558.		1
Дисульфидная связь i	384 ↔ 393	Ручное утверждение в соответствии с правилами i Ручное утверждение, выведенное из комбинации 955 9 i и расчетных данных 04 Ручное утверждение на основе эксперимента в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Процитировано для: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2,65 АНГСТРОМА) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ HIS-91.
Гликозилирование i	402	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин; in vitro Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ В LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Дисульфидная связь i	416 ↔ 462	Ручное утверждение в соответствии с правилами i Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и расчетных данных 9000 Утверждение, основанное на эксперименте в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Цитируется по: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2.65 АНГСТРОМОВ) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ ЕГО-91.
Гликозилирование i	437	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин; in vitro Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ В LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Модифицированный остаток i	443	Фосфосерин Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и расчетных данных i	1	Модифицированный остаток	444	Фосфотреонин Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и вычислительных данных i		1
Модифицированный остаток i	446 9276 902 и вычислительные данные i		1
Модифицированный остаток i	460	N6-сукциниллизин Утверждение вручную, выведенное из сходства последовательностей с i 5
Дисульфидная связь i	461 ↔ 472	Ручное утверждение в соответствии с правилами i Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и вычислительных данных i Ручное утверждение, основанное на эксперименте i Указано за: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Процитировано для: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2,65 АНГСТРОМА) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ HIS-91.
Гликозилирование i	463	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин Ручное утверждение на основе эксперимента в i -36; LYS-223; LYS-257; LYS-305; LYS-341; LYS-375; LYS-463; LYS-549 И LYS-558.		1
Гликозилирование i	468	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин; in vitro Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ В LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Дисульфидная связь i	485 ↔ 501	Ручное утверждение в соответствии с правилами i Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и вычислительных данных 9000 Утверждение, основанное на эксперименте в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Цитируется по: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2.65 АНГСТРОМОВ) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ ЕГО-91.
Дисульфидная связь i	500 ↔ 511	Утверждение вручную в соответствии с правилами i Утверждение вручную, выведенное из комбинации экспериментальных и расчетных данных на основе на эксперименте в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Процитировано для: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2,65 АНГСТРОМА) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ HIS-91.
Модифицированный остаток i	513	Phosphoserine Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и расчетных данных i PHOSA SER-82; SER-89 И SER-513, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПОМОЩЬЮ МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБ АНАЛИЗА].		1
Гликозилирование i CAR_000069	518	N-связанный (GlcNAc …) аспарагин; в варианте Casebrook		1
Дисульфидная связь i	538 ↔ 583	Ручное утверждение в соответствии с правилами i Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и вычислительных данных 5 9000 Ручное утверждение на основе эксперимента в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Процитировано для: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2,65 АНГСТРОМА) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ HIS-91.
Модифицированный остаток i	543	N6-сукциниллизин Ручное утверждение, выведенное из сходства последовательностей с i		1 9029		1	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин Утверждение вручную, основанное на эксперименте в i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКА 250-264, ГЛИКАЦИЯ ПО LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии. Цитируется по: ГЛИКАЦИЯ НА LYS-223 И LYS-549. Цитируется по: ГЛИКАЦИЯ В LYS-549. Указано за: GLYCATION AT LYS-36; LYS-223; LYS-257; LYS-305; LYS-341; LYS-375; LYS-463; LYS-549 И LYS-558.		1
Модифицированный остаток i	558	N6-метиллизин; альтернатива Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и расчетных данных i «Иммуноаффинное обогащение и масс-спектрометрический анализ метилирования белков.» Гуо А., Гу Х., Чжоу Дж., Малхерн Д., Ван Й., Ли К.А., Ян В., Агиар М., Корнхаузер Дж., Цзя Х., Рен Дж., Босолей С.А., Сильва JC, Vemulapalli V., Bedford MT, Comb MJ Mol. Cell. Proteomics 13: 372-387 (2014) [PubMed] [Europe PMC] [Abstract] Цитируется по: МЕТИЛИРОВАНИЕ [БОЛЬШОЙ МАСШТАБНЫЙ АНАЛИЗ] AT LYS- 558, ИДЕНТИФИКАЦИЯ С ПОМОЩЬЮ МАСС-СПЕКТРОМЕТРИИ [АНАЛИЗ В БОЛЬШОМ МАСШТАБЕ].		1
Гликозилирование i	558	4 в качестве альтернативы N-гликозилированию (Glc) эксперимент в i Процитировано для: ГЛИКАЦИЯ НА LYS-36; LYS-223; LYS-257; LYS-305; LYS-341; LYS-375; LYS-463; LYS-549 И LYS- 558.		1
Гликозилирование i	560	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин; in vitro Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ В LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Гликозилирование i	569	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин; in vitro Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ В LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Дисульфидная связь i	582 ↔ 591	Ручное утверждение в соответствии с правилами i Ручное утверждение, выведенное из комбинации экспериментальных и расчетных данных 9000 Утверждение, основанное на эксперименте в i Цитируется по: ДИСУЛЬФИДНЫЕ СВЯЗИ. Цитируется по: РЕНТГЕНОВСКАЯ КРИСТАЛЛОГРАФИЯ (2.65 АНГСТРОМОВ) 25-609 В КОМПЛЕКСЕ С ЦИНКОМ, ДИСУЛЬФИДНОЙ СВЯЗЬЮ, МУТАГЕНЕЗОМ ЕГО-91.
Модифицированный остаток i	588	N6-сукциниллизин Ручное утверждение, выведенное из сходства последовательностей с i		1 9029		1	N-связанный (Glc) (гликирование) лизин; in vitro Ручное утверждение, основанное на эксперименте в i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ В LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Функциональный ключ	Положение (я)	Описание Действия	Графическое представление	Длина
Сайт i	28	Без гликозилирования Ручное утверждение на основе эксперимента 2 i Процитировано для: ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ БЕЛКОВ 250-264, ГЛИКАЦИЯ НА LYS-75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	44	Не гликозилированный Ручное утверждение на основе эксперимента в i Цитируется для: БЕЗОПАСНОСТЬ БЕЗОПАСНОСТИ 250-2, ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ГЛИКИРОВКИ -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	65	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYS OFTEIN SEQUENCE -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	88	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: ПРОЦЕСС ПРОЕКТА GLYC -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	97	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: ПРОЦЕСС ПРОЕКТА GLYC -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	117	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION OFTEIN SEQUENCE -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	130	Без гликозилирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: ПРОЦЕДУРА БЕЗОПАСНОСТИ GLYC -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	160	Не гликозилированный Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: ПРОЦЕДУРА БЕЗОПАСНОСТИ 250-2, ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ GLYC -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	183	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Участок i	198	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: БЕЗОПАСНОСТЬ БЕЗОПАСНОСТИ 250-2 ОФИСНАЯ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Участок i	205	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: ПРОЦЕДУРА БЕЗОПАСНОСТИ ГЛИКИРОВКИ 250-2, ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТИ ГЛИКИРОВКИ -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	214	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитировано для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	219	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Участок i	229	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCING SEQUEN SEQUEN -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	236	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	264	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется по: GLYCATION L64, GLYCATION L64, -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Участок i	286	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION SEQUEN SEQUEN -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Участок i	298	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	310	Не гликозилированный Ручное утверждение на основе эксперимента в i Цитируется для: ПРОЦЕСС ПРОЕКТА GLYC -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	383	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется по: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	396	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется по: GLYCATION L64, GLYCATION L64, -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Участок i	413	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64, -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	426	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитировано для: GLYCATION L64, GLYCATION L64, -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	438	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	456	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется по: GLYCATION L64, GLYCATION L64, -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	460	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	490	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Участок i	499	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	524	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Участок i	543	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	548	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	562	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	565	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	581	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	584	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется по: GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Сайт i	588	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1
Участок i	598	Без гликирования Утверждение вручную на основе эксперимента в i Цитируется для: GLYCATION L64, GLYCATION L64 -75; LYS-161; LYS-186; LYS-249; LYS-257; LYS-300; LYS-337; LYS-347; LYS-375; LYS-402; LYS-437; LYS-468; LYS-560; LYS-549; LYS-569 И LYS-597, ОТСУТСТВИЕ ГЛИКАЦИИ НА LYS-28; LYS-44; LYS-65; LYS-88; LYS-97; LYS-117; LYS-130; LYS-160; LYS-183; LYS-198; LYS-205; LYS-214; LYS-219; LYS-229; LYS-236; LYS-264; LYS-286; LYS-298; LYS-310; LYS-383; LYS-396; LYS-413; LYS-426; LYS-438; LYS-456; LYS-460; LYS-490; LYS-499; LYS-524; LYS-543; LYS-548; LYS-562; LYS-565; LYS-581; LYS-584; LYS-588 И LYS-598, ИДЕНТИФИКАЦИЯ ПО масс-спектрометрии.		1

Что лучше btsaa или белок. Белок или хсаа, что лучше? Что лучше принимать

Иногда бывает очень сложно выбрать подходящую добавку.

Информация часто бывает неясной или даже противоречивой, потому что она не регулируется. Часто случается умышленный вброс ложной информации, направленной на получение дохода.

Но выбор правильной добавки очень важен для тренировки.Но для того, чтобы он получил максимально полезный эффект, необходимо сначала составить правильный сбалансированный рацион.

Что лучше пить протеин или BCAA — частая тема споров. Любая форма протеина является хорошей добавкой для каждого активного человека, но можно ли их смешивать и принимать вместе или лучше выбрать одну?

В этой статье мы постараемся разобраться, что лучше покупать BCAA или протеин, какие добавки принимать до и после тренировки и что выбрать для похудения.

Многие аминокислоты попадают в одно из пяти мест: мышечная ткань, мозг, сердце, печень или почки. Но большая его часть остается в мышцах. Вот почему BCAA так важны для набора мышечной массы.

Но прием слишком большого количества одной конкретной аминокислоты может вызвать дисбаланс, потому что она пытается занять место других. Или избыточные аминокислоты будут преобразованы в жир или глюкозу.

При рассмотрении 12 различных марок протеиновых порошков было замечено, что среднее содержание BCAA составляло примерно 20% или 5.5 грамм. Этого хватит любому спортсмену.

Так что прием BCAA вместе с белком — пустая трата денег и времени.

Разница между BCAA и протеиновыми добавками не только в их химическом составе, но и в их пользе для здоровья.

Здесь нужно получить реальную выгоду от потраченных денег, ведь это касается вашего здоровья. Таким образом, здесь мы рассмотрим:

• , что обеспечивают BCAA и белок при индивидуальном употреблении, а не вместе,
• получают выгоду от комбинации этих добавок,
• и соотношение денег, потраченных на пользу от добавок, как для BCAA, так и для протеиновый порошок.

Что такое концентрат сыворотки и из чего он сделан?

Ответить на этот вопрос просто — из коровьего молока. Но коровье молоко содержит два разных типа протеина:

• Сывороточный протеин
• Казеиновый протеин

Сыворотка используется людьми на протяжении сотен лет. Когда-то его скармливали домашним животным, использовали в качестве удобрения или выбрасывали.

Наконец, мы начали использовать его в качестве добавки во многие блюда. Но потом появилась химическая технология.

С тех пор молочную сыворотку можно использовать как элемент спортивного питания.

Все любители фитнеса были этому очень довольны, потому что он быстро усваивается, содержит все необходимые аминокислоты и стоит довольно дешево.

И после этого индустрия протеиновых добавок продолжала расти. Как химически, так и функционально. Это дало нам протеиновый порошок, который мы потребляем сегодня.

Какая дата для белка?

Благодаря долгому существованию, уже проведено множество исследований по его влиянию на человеческий организм.Он усваивается намного быстрее, чем казеиновая версия, и лучше стимулирует рост мышечных волокон и синтез белка.

Чтобы набрать мышечную массу, нужно потреблять 20 граммов протеина после каждой тренировки. Это стандартная доза для человека весом 80 кг.

Исходя из этих цифр, можно сказать, что будет нормой для любого человека.

Так что же такое BCAA?

Это аббревиатура с английского языка, обозначающая аминокислоту с разветвленной цепью.

Вернее, это три разные аминокислоты — лейцин, изолейцин и валин.Это три из девяти незаменимых аминокислот (которые человеческий организм не может производить самостоятельно и должен быть получен с пищей и добавками).

Почему они так называются? Все, что вам нужно знать, это то, что их химическая структура немного отличается, потому что они имеют ответвление из атомов углерода.

Итак, лейцин — самая важная аминокислота для наращивания мышечных волокон.

Как всасывается?

Чтобы попасть в мышечную клетку, BCAA используют инсулин.Они вызывают небольшой, но продолжительный всплеск инсулина. Это отличается от реакции на углеводы.

BCAA усваиваются быстрее, чем многие другие аминокислоты. Но всегда следует помнить, что белок усваивается даже быстрее, чем отдельные аминокислоты. Можно даже отметить, что организм использует другую транспортную систему для усвоения белка, чем для аминокислот.

Следовательно, если вы едите качественные белки, вам также не нужно употреблять BCAA.

Функции аминокислот BCAA

Они всегда выполняют одну и ту же функцию, независимо от их источника.

Эти три аминокислоты с разветвленной цепью высвобождаются печенью после переваривания белков. Оттуда они попадают в:

• Мышцы
• Сердце
• Почки
• или остаются в печени.

Но большая часть BCAA используется мышцами. Поэтому они актуальны как добавка для набора мышечной массы.

Во время тренировки аминокислоты катаболизируются, расщепляются. Это увеличивает потребность человека в BCAA, если он занимается интенсивными или силовыми тренировками.

Другие аминокислоты ведь тоже используются, но уже для синтеза ферментов или гормонов.

Больше не лучше, особенно в мире добавок.
Если одной аминокислоты в организме становится больше, чем другой, то избыток превращается в кетоны, жирную кислоту или глюкозу. Это плохо, но не очень опасно.

BCAA для тренировок и других целей

BCAA показали, что улучшают выносливость при упражнениях в условиях высоких температур.Для лифтеров это не очень важно, но если вы бегун на выносливость, то это свойство важно для вас.

По большей части они помогают наращивать мышцы в так называемом синтезе мышечного белка (особенно это касается лейцина).

Они также помогают уменьшить болезненность мышц после тренировки.

Абсолютно да. Лейцин, изолейцин и валин содержатся во всех белках. Некоторые компании даже добавляют больше. Обычный белок содержит в среднем 20 процентов BCAA по весу.Этого количества достаточно для наращивания мышечной массы и других целей. Поскольку вы получаете все необходимые BCAA с белком, а также со всеми другими аминокислотами, гораздо лучше инвестировать в белок. Таким образом, вы получите больше прибыли за ту же сумму денег.

BCAA против протеина: в чем разница?

BCAA — это три отдельные аминокислоты (лейцин, изолейцин и валин), которые имеют решающее значение для обеспечения питания мышц.

Сывороточный протеин — это сложный тип протеина, полученного из коровьего молока.Он содержит полный спектр аминокислот, не только BCAA, но и все другие аминокислоты. Также он очень хорошо впитывается.

Итак, единственная разница между белком и BCAA — это количество аминокислот. Белок содержит все необходимые человеку аминокислоты, а порошок BCAA содержит только те, которые участвуют в наращивании мышц.

Добавление BCAA в один и тот же протеиновый коктейль — это то же самое, что добавление еще большего количества заправки в салат. Все это без толку останется на дне чаши.

Чем полезны BCAA?

Это важный вопрос. На него можно ответить двумя способами.

1. Вы получите больше, если по каким-то причинам не можете принимать белок, например из-за аллергии или строгой диеты. Тогда BCAA действительно могут помочь вам нарастить мышечную массу. А еще вы быстрее восстановитесь после тренировки, так что в этом случае вам пригодятся BCAA.
2. Но если вы уже принимаете протеин, то вы получите минимальную пользу от BCAA. Ваши мышцы могут потреблять только определенное количество BCAA.Избыток будет преобразован в жир или глюкозу, что сделает добавку пустой тратой денег.

Чем полезен сывороточный протеин?

• Дешевле по сравнению с мясом;
• Быстро всасывается;
• Содержит все незаменимые аминокислоты в большом количестве;
• Содержит такие же BCAA;
• Намного легче потреблять, чем другие источники белка.

И, наконец, самый главный тезис этой статьи!

Мы обнаружили, что примерно пяти граммов BCAA в день достаточно для развития мышц.Также уменьшаются утомляемость и боль.

Мы также заметили, что чрезмерное потребление одной аминокислоты может вызвать дисбаланс из-за конкуренции между аминокислотами.

Большинство протеиновых порошковых добавок содержат 5 граммов BCAA на порцию.

А если вы уже пьете протеиновый коктейль, то не стоит тратить деньги на BCAA.

Единственный пример ситуации, когда вам нужны BCAA, — это соревнования по бодибилдингу. В этом случае вам придется исключить белок из рациона.Но это довольно редкая ситуация, а потому неактуальная.

Когда принимать протеиновые добавки — до, после или во время тренировки?

Это настолько интересный вопрос, что о нем можно написать отдельную статью.

Согласно результатам исследований, протеин лучше всего принимать:

• После тренировки: сразу после интенсивных силовых упражнений или упражнений на выносливость. Это поможет вам сохранить существующие мышцы или нарастить новые. Белки также помогут выздоровлению.
• Вы также можете принять добавку за полчаса до тренировки. Это предотвратит разрушение мышц для получения энергии.

Не принимайте протеиновые добавки перед тренировкой, если вы недавно ели богатую протеином пищу. Тогда коктейль станет лишним и не принесет вам пользы.

Выберите один. Белок нельзя принимать до или после тренировки. Во время силовых тренировок переваривание и усвоение питательных веществ значительно замедляется. Таким образом, ваше тело получает достаточно белка за один прием. Лучше всего принимать протеин сразу после тренировки.

Вот еще несколько ситуаций, в которых протеиновый коктейль может оказаться полезным.

• Перед сном, если вы пытаетесь нарастить мышцы. И здесь, оказывается, более актуален казеиновый белок.
• В качестве замены еды, если вы не можете много есть. Более полезного и эффективного питания для торопящегося невозможно представить.

Когда можно пить только BCAA?

Уже ясно, что нет смысла принимать оба вещества вместе.Но бывают и случаи, когда BCAA будут достойной заменой сывороточного протеина.

Если у вас аллергия на молочные продукты или вам просто не нравится вкус белка, то в качестве достойной альтернативы можно принять BCAA. Кроме того, строгая диета может помешать вам принимать белок.

Но как уже было сказано, в такой ситуации может оказаться только бодибилдер на соревнованиях.

Когда лучше всего принимать BCAA — до, после или во время тренировки?

Лучшее время приема:

• Перед тренировкой: непосредственно перед силовой тренировкой.Это поможет вам сохранить мышечную массу или нарастить дополнительную мышечную массу.
• После тренировки: сразу после тренировки. Это поможет мышцам быстрее восстановиться и вернуться в рабочее состояние.
• Утром после пробуждения: Помогает остановить катаболизм и сохранить объем мышц.
• Перед сном: зарядите мышцы энергией и позвольте им набрать массу за ночь.

Постоянный прием BCAA 4 раза в день — обычное дело, если для вас важно сохранить как можно больше мышц, особенно при дефиците калорий, например.

Но добавки нельзя использовать в качестве заменителя еды, что дает еще один аргумент в пользу сыворотки, хотя и не следует злоупотреблять ею.

Как сэкономить

Выбор протеина вместо BCAA может сэкономить вам много денег.

Просто убедитесь, что производитель протеина, которого вы выбираете, следит за тем, чтобы их продукт содержал 5,5 грамма BCAA.

Так что лучше: протеин или BCAA?

Все приведенные выше аргументы и результаты исследований показывают, что белок, особенно сыворотка, является гораздо более полезной добавкой, чем BCAA по следующим причинам:

• Он уже содержит достаточно BCAA для любых целей.
• Сывороточный протеин имеет гораздо более высокую биодоступность.
• В отдельности BCAA могут вызвать конкуренцию и дисбаланс при чрезмерном использовании. В случае с белком эта возможность исключена, поскольку он содержит здоровое соотношение всех аминокислот.
• Сывороточный протеин — дешевый, полезный для здоровья и, как правило, адекватный источник белка в рационе.

Похоже, это достаточное количество причин.

Заключение о добавках в целом:

Из всех добавок наиболее полезными являются креатин и сывороточный протеин.Фактически, они позволяют получить максимальную отдачу от потраченных денег.

К такому же выводу пришли многие ученые и спортсмены, которые исследовали и опробовали эти добавки на себе.

Употребление аминокислот не имеет смысла для людей, потребляющих достаточно белка.

Аминокислоты необходимы тем, кто занимается интенсивными тренировками. А кому еще может понадобиться добавка:

• Кто не любит белок
• Люди с аллергией на молоко
• Люди, соблюдающие строгую диету, не позволяющую им есть лишние калории.

Итак, если у вас нет таких особых требований, то лучше принимать только протеин.

Будь здоров!

Научная информация

Аминокислоты бывают глюкогенными или кетогенными (или и тем, и другим). Другими словами, глюкогенные аминокислоты могут служить предшественниками глюкозы. Это потому, что их углеродный скелет можно использовать для создания молекулы глюкозы. Кетогенные аминокислоты превращаются в молекулы жирных кислот или кетоновые тела.

BCAA — это оба:

• Лейцин кетоген
• Валин глюкогенен
• Изолейцин может использоваться как один, так и другой, в зависимости от ситуации.

Обновлено: 05.08.2019 11:50:39

Эксперт: Кауфман Михаил

Выбор спортивного питания требует самого ответственного подхода. Неправильная пищевая добавка может быть в лучшем случае бесполезной, а в худшем — даже навредить спортсмену. А то, что производители спортивного питания постоянно увеличивают ассортимент представленной продукции, только усложняет задачу, стоящую перед спортсменом.

Для новичков доступны различные добавки для наращивания мышечной массы или замедления катаболизма.Но чаще всего рекомендуются протеин и BCAA. Что лучше выбрать — непонятно.

В этой статье мы разберемся, что лучше — BCAA или протеин, а также проведем сравнение и подберем подходящее спортивное питание для разных спортсменов.

Как работает спортивное питание

Прежде чем разобраться, что лучше, давайте совершим небольшой экскурс в мир биохимии и обменных процессов в организме. Потому что это единственный способ подобрать правильное спортивное питание.

Практически любая пища, поступающая в организм, состоит из трех основных питательных веществ — белков, жиров и углеводов. Единственное исключение — простые неорганические соединения, такие как соль или вода. Но сахар уже является «органическим» и на 99% состоит из углеводов.

Позже все эти питательные вещества перевариваются. В желудке, кишечнике, печени и других внутренних органах они распадаются на более простые, но все же органические вещества. Итак, белки, представляющие собой макромолекулы, распадаются на небольшие аминокислоты. Пищеварительные процессы с участием белковых веществ начинаются в желудке и заканчиваются в тонком кишечнике.

Из тонкого кишечника аминокислоты всасываются непосредственно в кровь. Через сосуды вместе с другими жидкостями организма они попадают в печень, где используются для дальнейшего обмена веществ.

В печени аминокислоты превращаются в другие. Конкретный перечень продуктов обмена зависит от самого человека (точнее, от его генетического кода), а также от принимаемых продуктов питания. Например, при метаболизме белка образуется одна группа аминокислот, так называемые протеиногенные, а при расщеплении и усвоении растительных белков — другая.

Полученные аминокислоты уже отправляются в мышцы, где используются как «строительный материал» для мышечной ткани, а также — в рамках местного метаболизма — насыщают мышцы энергией.

Казалось бы, незаменимые аминокислоты полностью получают из белков. Зачем тогда нужны BCAA? Но не все так просто. Во-первых, синтез новых аминокислот во многом зависит от особенностей пищеварения и обмена веществ в организме. Во-вторых, не все необходимые вам питательные вещества получены из BCAA.

Организму спортивное питание необходимо в двух случаях:

Если требуются «нагрузочные дозы» белков или аминокислот. Это происходит при длительных интенсивных тренировках, которые развивают мышечную ткань. Белков, получаемых из ежедневного рациона, явно недостаточно для «наращивания» мышц;

При дефиците основных веществ в ежедневном рационе. Так, например, в некоторые сезонные периоды еда естественным образом ограничена. Или после болезней, когда организм исчерпал все свои ресурсы и требуется срочное выздоровление.

Таким образом, спортсменам, особенно бодибилдерам или набирающим вес, необходимы различные пищевые добавки, такие как протеин или комплекс аминокислот BCAA. Ибо белков в ежедневном рационе может просто не хватить.

BCAA — особенности и эффекты

BCAA — это протеиногенные аминокислоты с очень сложной структурой. Их главная особенность в том, что они не метаболизируются в печени. Из пищеварительной системы они попадают в кровоток, а оттуда направляются прямо в мышцы.

В мышечной ткани BCAA подвергаются катаболическим превращениям. То есть они распадаются на простые вещества с выделением энергии и молекул аденозинтрифосфата (АТФ). Все это нужно мышцам во время тренировок, чтобы они не начали сами разлагаться.

Дело в том, что во время физических тренировок мышцам как никогда нужна энергия. Им особенно негде его взять — либо пытаясь что-то сделать с углеводами, либо разлагая аминокислоты из собственных клеток.И второй вариант кажется мышцам наиболее эффективным. Катаболизм аминокислот высвобождает больше энергии, и они располагаются непосредственно в мышечной ткани.

В результате мышцы «разлагаются» сами. Это может привести к уменьшению их фактического объема, а также к появлению боли или других проблем с мышечной тканью.

Прием BCAA поможет избавиться от внутренних катаболических преобразований, влияющих на мышечную ткань. Непосредственно принятые аминокислоты разлагаются в энергию, а не накапливаются в самих мышцах.

В целом BCAA направлены на решение следующих задач:

Недостаток энергии в мышцах. Благодаря катаболическим процессам непосредственно в мышцах, BCAA повышают выносливость, продлевают время тренировки и улучшают результаты;

Появление мышечной боли после тренировки. Поскольку мышцы не «переваривают себя», они не разрушаются. Это означает, что риск возникновения боли после тренировки значительно снижается;

Улучшение анаболизма.Хотя сами BCAA не участвуют в наращивании мышц, ускоряя синтез специальных белков, они ускоряют и повышают эффективность «производства» новой ткани.

BCAA рекомендуется использовать непосредственно перед тренировкой. Они очень быстро попадают в кровоток из пищеварительной системы, откуда отправляются в мышцы. Кроме того, их можно пить после тренировки, просто чтобы снизить риск боли.

Преимущества

Используется как источник энергии, предотвращает разрушение мышечной ткани;

Повышают выносливость, помогают продлить время тренировки;

Снизить риск боли после тренировки;

Они быстро всасываются в кровоток — почти сразу после приема.

недостатки

Не обладают анаболическим действием. То есть сами по себе BCAA не ускоряют рост мышц, но из-за некоторых «побочных эффектов» могут немного увеличивать их объем;

Они требуют точной дозировки.

BCAA обычно используются бодибилдерами и другими спортсменами, тренировки которых связаны с высоким мышечным стрессом. Также их можно рекомендовать спортсменам кроссфита.

Протеин — действие и особенности

Protein — это полноценное белковое спортивное питание.Ну, точнее, он содержит только один-единственный белок, сам белок, в больших количествах — до 99% массы. Однако при переваривании он распадается на многие незаменимые аминокислоты.

В частности, белок содержит BCAA и другие важные вещества. Следовательно, это комплексное спортивное питание для решения сразу двух проблем — катаболизма и анаболизма.

Но есть два очень важных момента, которые следует учитывать. Во-первых, все аминокислоты в белке связаны.То есть желудочно-кишечному тракту нужно время, чтобы переварить и высвободить эти «более простые» вещества. Во-вторых, концентрация каждой отдельной аминокислоты довольно низкая. Но разнообразие велико.

Основная цель

Protein — увеличить мышечную массу. При метаболизме он распадается на многие аминокислоты, которые впоследствии используются в качестве «строительного материала» для новых мышц. Многие из них получаются только с этой диетической добавкой и никаким другим способом.

В целом белок направлен на достижение следующих эффектов:

Увеличение мышц.При его приеме образуется огромное количество аминокислот, которые используются как «строительный материал»;

Снижение катаболизма клеток мышечной ткани. При переваривании высвобождает BCAA, которые уменьшают боль и повышают выносливость;

Поддержание метаболизма в мышцах в положительном направлении при отсутствии тренировок. То есть белок способен обеспечивать «правильный» катаболизм ночью или во время длительных перерывов между занятиями.

Рекомендуется пить протеин каждый день.Если только дозировка не другая. Желательно употреблять больше протеина незадолго до тренировки, чтобы зарядить мышцы и улучшить анаболизм, а в дни без упражнений или перед сном — соответственно меньше.

Однако конкретные графики и дозировки варьируются в зависимости от диеты и желаемого эффекта.

Итак, подведем итоги.

Преимущества

Анаболический. Стимулирует рост мышц, увеличивает физическую силу и выносливость;

Содержит огромное количество незаменимых (в том числе незаменимых) аминокислот, которые направлены на улучшение метаболических процессов в мышцах, в том числе BCAA;

Стимулирует сжигание жира.

недостатки

Всасывается достаточно медленно. Так, в виде концентрата его можно переваривать за 1-2 часа, в зависимости от особенностей организма;

Вариантов много, поэтому выбрать подходящий довольно сложно.

Белок в основном используется бодибилдерами для ускорения роста мышц и повышения физической силы.

Теперь о видах протеина. Они различаются не только происхождением, но и действием.Итак, наиболее распространенным является сывороточный протеин, который содержит огромное количество молочных белков и поэтому может похвастаться высоким содержанием незаменимых аминокислот животного происхождения.

Соевый белок предназначен для веганов или людей с непереносимостью лактозы. Он может похвастаться высоким содержанием BCAA, но из-за отсутствия в нем аминокислот животного происхождения не может похвастаться выраженным анаболическим эффектом.

Сывороточный протеин бывает двух видов — концентрат и изолят.

Концентрат сывороточного протеина

представляет собой сухую сыворотку.В нем много дополнительных питательных веществ, но концентрация самого белка довольно низкая (30-80%). Он также содержит углеводы в виде молочного сахара (лактозы). Но главный недостаток — длительное переваривание, которое может занять до 1-2 часов в зависимости от особенностей обмена веществ.

Изолят сывороточного протеина содержит очень мало питательных веществ, а лактоза присутствует в следовых количествах. Но содержание чистого протеина до 99%, а скорость переваривания крайне низкая.

Сравнение

Итак, BCAA необходимы для защиты мышц и снижения риска боли, тогда как белок необходим для увеличения мышечной массы.Но разница не только в этом.

Характеристика
Состав	100% аминокислоты	Зависит от формы. До 99% белка, а в некоторых случаях также аминокислот и углеводов
Заявка	Повышение выносливости, уменьшение боли в мышцах	Рост сухой мышечной массы, повышение выносливости, уменьшение боли
Скорость ассимиляции	До 10-20 минут после введения	До 1-2 часов после введения
Эффект сжигания жира
Кому лучше использовать	Опытные спортсмены перед тренировками с высоким уровнем стресса	Для начинающих и опытных спортсменов на все время набора веса
Когда лучше пить	До и после тренировки	До, после, утром и вечером

BCAA и белок имеют разную направленность.И, в принципе, протеин — это комплексное спортивное питание, в состав которого входят BCAA. Так что при его приеме можно обойтись без других добавок.

Кроме того, BCAA и белок можно принимать вместе. Тогда эффект от использования обоих видов спортивного питания улучшится. Однако важно рассчитать дозировку и время приема.

В частности, лучше снизить дозировку BCAA. Рекомендуется пить комплекс аминокислот за 20-30 минут до протеина.В этом случае набор массы пойдет быстрее — больше продуктов белкового обмена будет использовано организмом для «наращивания» мускулов.

Рекомендуется проконсультироваться с врачом перед одновременным приемом протеина и BCAA. Конечно, риск вреда от этих препаратов минимален, но стоит учитывать индивидуальные особенности организма.

Содержимое:

Для каких задач и целей лучше потребление белка, а для каких — аминокислот bcaa.Их преимущества и виды.

Сегодня многие спортсмены принимают спортивное питание для улучшения физических показателей, быстрого набора мышечной массы и эффективного восстановления. И если опытные спортсмены уже испытали все варианты методом проб и ошибок, что делать новичкам? Можно ли еще пройти все виды спортивных добавок, проверяя организм на прочность?

Сомнения и мнения

Чаще всего сомнения возникают при выборе двух видов спортивных добавок — протеиновой и аминокислотной bcaa.И здесь есть несколько предположений. Некоторые спортсмены уверены, что белок лучше покупать, и отказываются от приема аминокислот BCAA. Другие настаивают на том, что аминокислоты BCA, наоборот, более эффективны благодаря лучшему усвоению. Есть также категория бодибилдеров, которые принимают обе спортивные добавки в комбинации и не ломают голову над этим вопросом. Но зачем тратить лишние деньги, если можно обойтись всего одной добавкой? Но какой?

Белок

Protein complex — популярная среди спортсменов пищевая добавка, основным элементом которой является чистый белок (его содержание может достигать 70-90%).Попадая в организм, белок превращается в аминокислоты, необходимые для роста мышечной ткани. Именно благодаря аминокислотам, которые есть в белке, при активных физических нагрузках тормозится разрушение и активируется процесс роста мышц.

Следует помнить, что существует несколько видов протеина:

1. Сывороточный протеин — самый популярный протеин среди спортсменов. Его главное преимущество — наличие аминокислот в составе полезных аминокислот.Кроме того, он имеет доступную цену, хорошо смешивается с другими видами белков и быстро усваивается организмами. Благодаря быстрому всасыванию его прием актуален до или после тренировки.
2. Казеин — медленно усваивающийся белок, его лучше всего пить на ночь. Он обеспечивает постоянное поступление аминокислот к мышечным волокнам. В то же время казеин, как и сывороточный белок, содержит аминокислоты, в том числе bcaa.
3. Соевый протеин — лучший вариант для представительниц прекрасного пола. Он хорошо усваивается, а его стабильное потребление — шанс снизить уровень холестерина в крови.Еще один плюс — наличие аминокислот. Однако эффективность этой добавки довольно низкая, и из-за повышенного уровня эстрогена мужчинам не рекомендуется ее принимать.
4. Яичный белок считается самым богатым аминокислотами BCAA. Но он полезнее не для набора мышечной массы, а, наоборот, для более эффективного похудания. Недостаток такого протеина — высокая цена.
5. Молочный белок дешев, хорош по составу, но из-за наличия лактозы может негативно сказаться на работе кишечника.

Таким образом, практически все типы белков содержат свободные аминокислоты. При этом, выбирая протеин, необходимо учитывать поставленные задачи. Для набора мышечной массы лучше покупать сывороточный протеин и казеин. Для похудения — яичный и соевый белок.

Аминокислоты

BCAA Amino Acids — мощный комплекс, разработанный для быстрого восстановления мышц. Он практически мгновенно усваивается организмом и отправляется по назначению, снабжая энергией мышечные волокна.В BCA аминокислот входят три основных компонента — лейцин, изолейцин и валин. Организм не в состоянии их вырабатывать, поэтому получать их можно исключительно с пищей.

Прием аминокислот bcaa позволяет ускорить метаболизм, повысить эффективность тренировок, сбросить (или набрать) вес и поддерживать его в течение длительного времени на одном уровне. Одной порции достаточно, чтобы повысить выносливость и выдержать даже самую тяжелую тренировку.

BCAA можно принимать по-разному в зависимости от задачи:

1. Для похудения — до занятия, во время (если речь идет о растворимых формах) и после.Для более быстрого похудения необходимо между приемами пищи пить аминокислоты (это снизит аппетит).
2. Для набора массы — прием BCAA актуален до, во время и после работы в тренажерном зале. При этом к аминокислотам желательно добавить несколько столовых ложек сахара, что гарантирует дополнительный эффект от быстрых углеводов. Не лишним будет принять порцию после пробуждения, чтобы уберечь мышечные волокна от разрушения.

Аминокислоты бывают двух разных форм:

• в порошке (растворимый вариант).Обладает максимальной эффективностью. Половина состава такого комплекса — лейцин. Недостаток такой формы — неприятный вкус;
• в капсулах. Главный плюс — избавление от неприятного вкуса. Но теряется суть аминокислот — высокая скорость распада в организме и попадания в мышцы. Процесс замедляется за счет капсулы, которой требуется время, чтобы раствориться.

Что выбрать?

Мы рассмотрели каждый из комплексов — белки и BCAA.Какой лучший выбор? Здесь каждый спортсмен решает сам:

• преимущество белка — полный аминокислотный состав плюс bcaa. Обратной стороной является низкая скорость всасывания организмом. Это логично, ведь организм сам должен расщепить белок на ряд незаменимых аминокислот.
• преимуществом летучих мышей является практически мгновенный доступ к мышечным волокнам, что дает оптимальный результат. Минус — неполноценность («урезанный» состав аминокислот).

выводы

Поэтому для достижения максимально длительного результата лучше всего принимать полноценный протеиновый комплекс.Если вам нужен быстрый результат и решение краткосрочных задач (например, похудение, набор веса), то лучше всего подойдут bcaa. Но в идеале эти два комплекса, безусловно, сочетаются. Удачи.

Сегодня мы ответим на один из самых популярных вопросов среди спортсменов — «BCAA или протеин — что выбрать?» Скорее всего, этот выбор возникает, когда у вас ограниченный бюджет, когда вы можете принимать только одну добавку и, конечно, хотите, чтобы она приносила максимальную пользу. Но сравнивать BCAA с белком не совсем разумно, поскольку первые являются неотъемлемой частью вторых.Белковые коктейли уже содержат незаменимые аминокислоты, но, естественно, их меньше, чем в более узких добавках — BCAA. Итак, сегодня мы разберемся, что можно пожертвовать и почему, а от чего отказываться нельзя!

BCAA VS Protein

Белок — важнейший компонент нашего тела, строительный материал для всех клеток. Белок состоит из аминокислот. Если провести небольшую аналогию, то человек — это дом, белки — это кирпичи, а аминокислоты — это то, из чего состоит каждый кирпич.

Есть только 20 незаменимых аминокислот, которые необходимы нашему организму. Они подразделяются на:

• Незаменимые, то есть те, которые вы должны получать с пищей, так как они не могут синтезироваться в нашем организме.
• Условно заменяемые, то есть те, которые организм может синтезировать, но в небольших количествах.
• Заменимые, то есть те, которые могут быть синтезированы нашим организмом в достаточном количестве.

BCAA — это просто незаменимые аминокислоты: лейцин, изолейцин и валин.BCAA может содержать либо одну из этих трех аминокислот, либо все три, чаще всего в соотношении 2: 1: 1. Пропорция рассчитывается исходя из достижения максимального всасывания каждой из аминокислот.

Protein содержит все BCAA и 7 незаменимых аминокислот. Единственная разница в том, что их концентрация здесь намного меньше.

Вывод: потребление одного только белка или только BCAA не даст вам необходимых аминокислот. Вот простой пример: лейцин — одна из важнейших амниотических кислот.Он участвует в энергетическом обмене, отвечает за синтез белка и защищает мышцы от разрушения во время голодания. Но есть еще одна аминокислота, выполняющая аналогичные функции — глютамин. Эта аминокислота содержится в белке. Таким образом, используя эти две добавки вместе, вы можете добиться наилучшего эффекта.

Перейдите по ссылке: покупайте BCAA и аминокислоты, если хотите попробовать продукцию ТОП американских брендов! Есть даже BCAA с прогормоном в максимальной дозировке…

Ищете эксклюзивные прототипы? Вот лучшие белки для набора мышечной массы! Продукты премиум-класса для тех, кто хочет результатов, а не обещаний. Широкий выбор вкусов и видов.

Как принимать BCAA и протеин

И BCAA, и протеин можно принимать в любое время, но BCAA лучше всего принимать утром, за полчаса до тренировки и через полчаса после тренировки через полчаса. Белок — утром, после тренировки через полчаса — час, казеин — перед сном.

BCAA иногда рекомендуется принимать перед тренировкой, поскольку они защищают организм от усталости и дают энергию. Белок не содержит такой концентрации незаменимых аминокислот, поэтому принимать его перед тренировкой бессмысленно.

Иногда рекомендуется смешивать белок и BCAA, так как это соотношение дает лучший эффект.

Лучшие BCAA и протеины по версии журнала Fit!

Здесь мы решили представить вам примеры лучших добавок. Глядя на их состав, вы определите для себя отправную точку качества, а в будущем будете знать, какой белок или BCAA покупать.

Белок

BCAA

Ответы на самые популярные вопросы

В итоге мы решили выделить наиболее часто задаваемые вопросы, чтобы их больше не было:

1. Как правильно сочетать белок и BCAA?

Эти добавки можно принимать вместе, смешивать в шейкере или по отдельности. Лучшая схема:

В дни тренировок:

• После пробуждения — BCAA;
• Между приемами пищи — протеин;
• Предтренировочный — BCAA;
• Посттренировка — BCAA и протеин;
• Перед сном — BCAA и протеин.

В дни отдыха:

• После пробуждения — BCAA;
• Между приемами пищи — протеин и BCAA;
• Перед сном — BCAA и протеин.

2. Можно ли добавлять в протнин BCAA?

Можно, но это зависит от ваших целей. BCAA отличаются высокой скоростью всасывания и поэтому ценятся (всасываются в течение 30 минут после приема). Вы получаете быстрый источник аминокислот для своих мышц. Белок переваривается дольше.Поэтому, когда вы принимаете эти добавки вместе, смешивая их, вы теряете скорость всасывания, но получаете больше чистых аминокислот. Лучше всего принимать только BCAA в то время, когда ваши мышцы срочно в них нуждаются. Если вам просто нужно много белка, то можно смешать BCAA и белок в шейкере.

3. Как принимать BCAA с протеином?

Если вы решили принимать эти добавки вместе, запомните два важных правила:

1. BCAA и белок, взятые вместе, смешиваются только с водой;
2. Готовая смесь не хранится ни часа, а сразу пьется.

Также следует учитывать, что белковая смесь также содержит определенное количество незаменимых аминокислот, которое указано на упаковке. BCAA работают от 30 граммов в день, поэтому вы можете учитывать количество этих аминокислот в своем белке, чтобы сохранить вторую добавку (BCAA).

4. Могут ли аминокислоты заменять белок?

Да, могут, но только если вы купили сложные аминокислоты. Если вы хотите заменить белок BCAA, это не совсем так, поскольку вы получите только 3 аминокислоты, что очень далеко от полного аминокислотного профиля.Комплексная добавка обычно содержит все необходимые амины в довольно большом количестве, но лишена полезных жиров, иммуноглобулинов, лактоглобулинов и других примесей протеинового коктейля, которые являются анаболическими усилителями.

5. Что лучше утром пить протеин или аминокислоты / BCAA?

Утром лучше всего принять порцию аминокислот / BCAA, так как они очень быстро всасываются и защищают ваши мышцы от катаболических процессов. Белок переваривается немного дольше, поэтому его можно использовать между приемами пищи, перед тренировкой и перед сном.

Мы надеемся, что ответили на самые важные вопросы, касающиеся BCAA и потребления белка. Если у вас остались вопросы, задавайте их в комментариях!

Обсуждение: 14 комментариев

что лучше взять в качестве изолята протеина или BCAA ???

Жека, некоторые сомневаются, что не тот изолят — это белок. так я интерпретирую ваш вопрос, как лучше брать изолят или саа? тогда я бы посоветовал вам изолят, так как он включает в себя как btsaa, так и более аминоксов.но лично я покупаю оба.

вы ответили в «что лучше пить BCAA или протеин утром», что лучше bzaa, но почему ??? в белке больше аминокислот?

взял себе новый прайм из Chaos из серии Cannibal. Это здорово! Мало того, что банки мега-стильные, они стоят на полке и бросаются в глаза, как элемент интерьера)) так просто супер вкусно! все три имеют разный состав: один чистый изолят, второй изолят + концентрат, третий многокомпонентный.и это очень удобно! Пью в зависимости от целей, если нужно много энергии, то пью многокомпонентный или концентрат + изолят, если нужно минимум жиров и углей, то чистый изолят. бцаахи не покупал, почему? если у меня столько прота!

eee) BCAA против протеина — это вечная борьба, но я за комбинирование! все равно — это не вариации одной добавки, а совершенно разное спортивное питание. Я принимаю бцаа и прот и пью почти по вашей схеме, иногда вместе принимаю.

Здравствуйте и огромное спасибо консультанту! Моя первая сушка, читала на вашем сайте, что при сушке нужно принимать BCAA и / или протеин. Но я не очень искушен, поэтому не знала, что выбрать и как пить. Питер предложил Brute BCAA. И хотя добавка выглядит брутально, по-мужски, а состав прямо анаболический, через месяц приема я понял, что лучшей поддержки мышц при сушке нет! Мышцы оставались жесткими и объемы сохранились, а жир ушел)) Раньше был опыт похудания, но всегда в итоге получалось дряблое тело.Так что девочкам настоятельно советую обратиться к Питеру и попробовать Брута!

спасибо. понял разницу между BCAA и белком. Я новичок.

Я за то, что беру и прот, и бцаа! У меня не было большого бюджета, поэтому я решил сэкономить на скидках и взял 2 самых доступных и качественных варианта: Cannibal Kraken (более 2 кг за 4 тысячи рублей) и Elite BCAA (аж 60 порции по 1500 р). Получилось очень выгодно и длится долго. Вкусы просто отличные !!

неужели еще есть люди, которые ничего в этом не понимают ????

егор, было бы смешно, если бы не было так грустно) У меня половина людей в зале вообще не знают, что такое бцаа и задают вопрос, сколько можно взять из банки протеина?) Так что там много глупых людей.и самое неприятное, что даже объяснение не факт, что сделает их умнее.

бцаа круглый год покупаю, протеин — только когда позволяют средства.

Мне понравился зеленый BCAA от Xcel! Состав бомба! Оказывается, витаминный комплекс тоже прост. Я заметила более быстрое восстановление после их приема.

не пожалел, что проконсультировался с консультантом. всегда брал бцаа только от Оптимум Нутришн. Но оказалось, что сейчас уже есть бцаахи, намного круче по составу и ненамного дороже по цене.Я взял Brutus BCAA в качестве образца и скажу, что он радикально отличается от всего, что я пробовал!

Мне очень нравится протеин EnergyPro

Рынок спортивных добавок давно уже не является чем-то подобным и прочно вошел в мир любительского спорта. Особой популярностью у посетителей тренажерного зала пользуются спортивные пищевые добавки, ведь спортивное питание по своим свойствам подходит всем: и тем, кто мечтает сжечь ненавистные лишние килограммы, и тем, кто хочет нарастить мышечную массу, и даже тем, кто просто следит за своим здоровьем.Среди тех, кто занимается спортом, особенно популярны протеиновые коктейли и аминокислоты BCAA, и часто возникает вопрос: что еще лучше и нужнее? В этой статье мы постараемся ответить на этот вопрос.

Начнем с объяснения того, что такое белок и BCAA. Белок, он же белок, является основным веществом, которое необходимо человеку для поддержания жизнедеятельности организма, не зря белок содержится практически во всех пищевых продуктах. В спорте белок используется в качестве основного строительного материала для мышц.То есть наши мышцы, как и все ткани, состоят в основном из белка, который, в свою очередь, состоит из аминокислот. Всего для нормального здоровья нам нужно около 20 аминокислот, источником которых является все тот же белок. Из этих 20 аминокислот 9 организмом не синтезируется, то есть мы можем получить их только с пищей. Три из этих девяти аминокислот — это лицин, изолейцин и валин, которые представляют собой BCAA, аминокислоты с разветвленной цепью. Они нужны нам в день тренировки, так как их отсутствие для спортсмена означает плохое восстановление мышц, недостаток энергии и катаболизм, то есть разрушение мышечной ткани.Таким образом, мы можем сделать вывод, что без этих 3 аминокислот ваш прогресс в тренировках остановится.

Белок (белок) состоит из аминокислот, включая BCAA. Это означает, что с каждой порцией протеина вы будете получать BCA, необходимый для мышц.

Давайте посмотрим на примеры.

Для качественного восстановления вам необходимо в среднем 20 граммов BCAA в день. Чаще всего одна порция протеина (30 граммов) содержит около 5 граммов BCA.Это означает, что вам нужно 4 порции протеина или 2 порции протеина и 10 граммов BCA, полученных из отдельно приобретаемой добавки, чтобы получить норму (см. Состав, описанный на банке с BCAA). Или просто BCAA без белка (20 г).

Конкретный пример — BCAA Ultimate: ароматизированные BCAA (457 г) в мерной ложке 7 граммов порошка, из которых 6 граммов являются чистыми BCAA. Это означает, что вам нужно 3-4 мерные ложки в день, чтобы получить норму.

Плюсы и минусы

Протеин хорош тем, что порция протеина приносит гораздо больше удовольствия, чем порция BCA.30 граммов порошка для медленного всасывания избавят вас от голода и могут заменить весь прием пищи, но 6 граммов мгновенно усваиваемых BCAA не обеспечат вам насыщения. Кроме того, белок — это полноценный белок, содержащий еще 17 аминокислот, которые в той или иной степени необходимы нашему организму.

Plus BCAA в цене. 300 граммов качественного BCAA стоят в среднем 1400 рублей. Столько же этих аминокислот содержится в банке с белком массой 2,2 кг, которая стоит примерно 3200 рублей.

Что выбрать?

Давайте ответим на этот вопрос так: выбирайте и протеин, и BCAA, поскольку только при комплексном подходе к спортивному питанию можно добиться значительных результатов. При использовании этих продуктов в комбинации мы советуем вам пить протеин каждый день по 2-3 порции, между приемами пищи, а также на ночь (если у вас есть казеиновый протеин) и всегда «до» и «после» тренировки. А аминокислоты BCAA — только в день тренировки. Лучше всего пить порошкообразную форму «во время» тренировки, капсулу или таблетку, а также протеин — «до» и «после» тренировки.Если вы приобрели только аминокислоты с разветвленной цепью, то обязательно принимайте их каждый день в дозировке 10-25 граммов. Лучше всего разбить суточную норму на 2-4 приема по 5-7 грамм за раз. В ситуации, когда вам нужно выбрать что-то одно, выбирайте белок, так как любой белок содержит BCAA-аминокислоты, и в этом случае вы получите их из белка.

Эффективное производство белка дрожжами требует глобальной настройки метаболизма

Фенотипическая характеристика

Используя ультрафиолетовый мутагенез и микрофлюидную сортировку капель, мы ранее выделили несколько различных штаммов дрожжей с улучшенной секрецией гетерологичного фермента α-амилазы ¹⁶ .Здесь мы систематически проанализировали эти штаммы, чтобы выявить механизмы эффективной секреции. Все мутантные штаммы вместе с эталонным штаммом выращивали в периодических культурах для получения количественной фенотипической информации (рис. 1а). По сравнению с эталонным штаммом AAC, мутантные штаммы продуцировали значительно больше α-амилазы на протяжении всего процесса культивирования, что приводило к более высокому конечному титру α-амилазы (рис. 1b, c). Увеличение конечного титра α-амилазы было связано с увеличением удельной скорости продуцирования α-амилазы, и эта скорость была увеличена в четыре раза для лучшего штамма B184 по сравнению с AAC (Таблица 1).Интересно, что увеличение продукции α-амилазы было связано с увеличением удельной скорости роста, увеличением скорости поглощения глюкозы, увеличением скорости продукции этанола (таблица 1, дополнительный рис. 1a, b), а также сниженным выходом биомассы на глюкозу и повышенным выходом этанола. на глюкозу (дополнительная таблица 1). Таким образом, конечный выход биомассы большинства мутантных штаммов был немного ниже (около 10%) (за исключением штамма F83, у которого конечный выход биомассы был на 27% ниже) по сравнению с AAC (дополнительный рис.1д). Было замечено, что штамм M715 имел самую низкую удельную скорость продуцирования глицерина и самую низкую удельную скорость продуцирования ацетата, но эти скорости снова увеличивались у потомков M715 (таблица 1, дополнительный рисунок 1c). Более высокий титр α-амилазы в среде и более низкий процент внутриклеточной α-амилазы мутантных штаммов показали, что секреционная способность мутантного штамма была улучшена (дополнительный рисунок 1d). Из этой фенотипической характеристики штаммов ясно, что повышенная секреторная способность белка не налагает никаких штрафов на рост, поскольку мутантные штаммы росли быстрее, но штаммы имеют более высокую скорость поглощения глюкозы, и все большая часть глюкозы направляется на этанол. производство.Поскольку синтез и секреция белка являются энергоемкими процессами, повышенное соотношение продукции АТФ к общему количеству клеточного белка при ферментативном росте ¹⁷ помогает удовлетворить повышенную потребность в энергии у штаммов с более высокой секрецией α-амилазы.

Рис. 1

штаммов дрожжевых грибов с секрецией α-амилазы в периодических культурах. a Эволюционные отношения между штаммами, использованными в этом исследовании. Штаммы были отобраны для более высокой продукции α-амилазы из библиотек ультрафиолетового мутагенеза с микрофлюидным скринингом в более раннем исследовании ¹⁶ . b Титр штаммов α-амилазы в периодических культурах. Клетки культивировали с исходной OD ₆₀₀ 0,01 в среде SD- × SCAA в биореакторе при контролируемой температуре 30 ° C, перемешивании 600 об / мин, потоке воздуха 30 л / ч ^-1 , pH = 6. c конечный выход α-амилазы. Представленные данные представляют собой средние значения ± стандартное отклонение трех или четырех повторов

Таблица 1 Физиологические параметры мутантных штаммов

Транскрипционное профилирование

Относительный выход амилазы рассчитывали для экспоненциальной фазы и конца культивирования, соответственно.Мутантные штаммы показали более высокий выход амилазы в экспоненциальной фазе по сравнению с эталонным штаммом AAC (дополнительный рис. 2a, b). Об устойчивом транскрипционном состоянии сообщалось в экспоненциально растущих дрожжевых клетках, и поэтому анализ транскриптома в экспоненциальной фазе является надежным ¹⁸ . Поэтому образцы клеток отбирали в ранней экспоненциальной фазе (OD ₆₀₀ ≈ 1) для секвенирования РНК, чтобы выявить важные факторы, влияющие на секрецию белка. Коэффициент корреляции Спирмена между образцами при попарном сравнении показал высокую воспроизводимость биологических повторов (рис.2а). Кроме того, этот анализ показал, что штаммы можно разделить на три группы: группа 1 содержала AAC и M715; группа 2 содержала Mh33 и F83; группа 3 содержала Mh44, D5, B130 и B184. Эта группировка соответствовала эволюционной родословной штаммов (рис. 1а) и была выявлена ​​с помощью анализа главных компонентов (дополнительный рис. 3). Эти результаты показали, что у группы 2 и группы 3 были разные эволюционные пути к увеличению секреции белка. В отличие от штамма M715, у штаммов с более высоким уровнем продуцирования α-амилазы из группы 2 и группы 3 была значительно повышена или понижена регуляция большего количества генов (дополнительный рис.4). Это указывает на то, что значительное улучшение продукции α-амилазы, полученное в штаммах из этих двух групп, было связано с глобальной модуляцией экспрессии генов, что может быть связано с необходимостью регулировки многих различных клеточных процессов для поддержки повышенной продукции α-амилазы. . Хромосома III была дублирована в Mh44 и его потомках D5, B130 и B184, и в этих штаммах многие гены, расположенные на этой хромосоме, показали примерно двукратное увеличение на уровне транскрипции.

Рис. 2

Обзор данных транскриптома. a Тепловая карта коэффициента корреляции Спирмена для сходства профилей выражения экспоненциальной фазы между различными образцами при попарном сравнении. b Общие очень значимо дифференциально экспрессируемые гены ( P -adj <0,05 (метод Бенджамини – Хохберга) и abs (log ₂ кратное изменение)> 1) в мутантных штаммах по сравнению с эталонным штаммом AAC. Под названием штамма указано количество генов, экспрессирующихся в значительной степени по-разному в каждом штамме. c Уровни экспрессии общих значительно дифференциально экспрессируемых генов в мутантных штаммах

Для выявления общих изменений экспрессии в штаммах в группе 2 и группе 3 на диаграмме Венна были нанесены гены, экспрессирующиеся по-разному (рис. 2b). Таким образом, был идентифицирован в общей сложности 31 обычно дифференциально экспрессируемый ген во всех мутантных штаммах в этих двух группах, и уровни дифференциальной экспрессии этих 31 гена по сравнению с эталонным штаммом суммированы на рис.2c. Несколько генов, включая ANB1 , TIR3 , CYC7 , DAN1 и AAC3 , которые экспрессируются в анаэробных / гипоксических условиях и / или необходимы для анаэробного роста ^{19, 20} , значительно активированы в мутантные штаммы. Поскольку уровни растворенного кислорода в среде на момент отбора проб клеток для экстракции РНК составляли около 90% для всех штаммов (дополнительный рис. 2c), это означает, что мутантные штаммы проявляли анаэробные характеристики, несмотря на аэробную среду.Большинство значительно подавленных генов были генами, чувствительными к фосфату. PHO12 , PHO84 , PHO89 и SPL2 , и все они связаны с использованием и регулированием фосфатов. GIT1 участвует в метаболизме фосфолипидов, а PHM6 регулируется уровнями фосфата ²¹ .

Анализ репортерных TF и ​​анализ терминов онтологии репортерного гена (GO)

Для выявления основных транскрипционных регуляторных ответов в мутантных штаммах данные транскриптома были интегрированы с сетью факторов транскрипции (TF) и связанных генов для идентификации так называемого репортера. ТФ для мутантных штаммов из группы 2 и группы 3 ^{22, 23} .На основании этого анализа было оценено 308 TF. Пять ведущих репортерных ТФ каждого штамма предположительно представляли важную регуляторную сеть, связанную с повышенной секрецией белка, и были представлены направленными значениями их генов-мишеней, которые, как было обнаружено, регулировались с повышением или понижением (рис. 3a). Также оценивали уровень экспрессии репортерных ТФ (рис. 3б). Чтобы изучить, влияет ли уровень экспрессии генов на дублированной хромосоме III на репортерный анализ, мы провели анализ репортерных TF, в котором мы удалили все гены на chr III из анализа, а затем повторно выполнили анализ репортерного TF для штаммов Mh44, D5, B130 и B184 (дополнительный рис.5). Идентифицированные TF с помощью репортерного анализа без включения генов на chr III были почти такими же, как идентифицированные TF с помощью репортерного анализа с использованием данных для всех генов (рис. 3a), хотя значения были разными. Только SNF2 не идентифицирован в репортерном анализе, не включая гены на chr III. Это предполагает, что ключевая информация в глобальных ответах регулятора транскрипции, вызванных мутациями и дупликацией chr III, не определяется уровнем экспрессии генов на chr III.

Рис. 3

Анализ репортерных факторов транскрипции (TF) выявил важные ответы транскрипционной сети у мутантных штаммов. TF оценивали по модуляции уровня экспрессии генов, которые контролируются TF. a Отобраны пять лучших репортерных TF для каждого штамма в классе четко направленного вверх (красный) и класса четко направленного вниз (синий) и представлены по их значимости. b Уровни экспрессии сообщенных ТФ в мутантных штаммах по сравнению с эталонным штаммом AAC.Повышенная продукция α-амилазы за счет сверхэкспрессии ТФ c или делеции ТФ d , данные представляют собой средние значения ± стандартное отклонение дубликатов

Rox1p — это регулятор транскрипции, который подавляет гены, вызванные гипоксией ²⁰ . Анализ репортерных TF показал повышенную регуляцию генов, репрессированных Rox1p, что согласуется с идентификацией обычно значительно повышенных генов в мутантных штаммах. Кроме того, было обнаружено, что экспрессия гена ROX1 снижена в большинстве мутантных штаммов.Ген, регулируемый с помощью TUP1p, элемента комплекса Tup1p-Cyc8p, обеспечивающего репрессию анаэробных генов с помощью Rox1p ²⁴ , также был обнаружен в мутантных штаммах с повышенной регуляцией. Hap1p представляет собой гем-зависимый активатор транскрипции и репрессор транскрипции в аэробных и анаэробных условиях соответственно ²⁵ . HAP2 , HAP3 , HAP4 и HAP5 кодируют белки с образованием CCAAT-связывающего комплекса Hap2p / 3p / 4p / 5p, который является активируемым гемом и подавляющим глюкозу активатором транскрипции и глобальным регулятором дыхательной системы. экспрессия гена ²⁶ .Было обнаружено, что гены, регулируемые Hap1p и Hap2p / 3p / 4p / 5p CCAAT-связывающим комплексом, подавлены в мутантных штаммах. Все эти результаты показали, что мутантные штаммы экспрессировали гены, как если бы они находились в состоянии гипоксии, что может способствовать эффективной секреции белка.

Помимо анаэробного метаболизма, с помощью анализа репортерных ТФ были идентифицированы другие типы регуляции, включая передачу сигналов питательных веществ, синтез нуклеотидов и метаболизм фосфатов, клеточный цикл и т. Д. (Рис. 3a). MSS11 и TEC1 участвуют в реакции на голодание и отвечают за регуляцию питательных веществ ²⁷ , и оба представляют собой репортерные TF для активированных генов.Поскольку производство гетерологичного белка конкурирует с внутриклеточными ресурсами, которые могут быть использованы для роста клеток, для эффективных штаммов секреции белка были обнаружены несколько более низкие конечные выходы биомассы (дополнительный рис. 1e). Фактически, α-амилаза, продуцируемая лучшим штаммом-продуцентом B184, составляла около 13% от общего продуцируемого клеточного белка (дополнительный рис. 2d). Сильная конкуренция за ресурсы может привести к индукции реакции частичного голодания по питательным веществам, следовательно, активируются регуляторы, связанные с питательными веществами, такие как Mss11p и Tec1p.Bas1p отвечает за индукцию экспрессии генов, участвующих в синтезе нуклеотидов и потреблении фосфатов, за счет взаимодействия с Pho2p ²⁸ . Подавление генов, регулируемых Bas1p, в мутантных штаммах указывает на то, что секреция белка может выиграть от такого ответа. Первые две стадии синтеза пиримидина de novo катализируются Ura2p, который по обратной связи ингибируется уровнем UTP. Было обнаружено, что ген URA2 подавляет активность ( P -adj <0.05, метод Бенджамини-Хохберга) в наших мутантных штаммах. FUR1 , который кодирует фермент для превращения урацила в UMP в пути спасения, оказался активным в мутантных штаммах, что указывает на то, что биосинтез нуклеотидов может перейти к использованию пути спасения. Анализ репортерных TF также показал, что гены, регулируемые с помощью Mbp1p и Swi4p, были активированы. И Mbp1p, и Swi4p могут взаимодействовать с Swi6p с образованием комплекса MBF (Mbp1p / Swi6p-зависимый бокс-фактор связывания клеточного цикла) и комплекса SBF (Swi4p / Swi6p-зависимый бокс-фактор связывания клеточного цикла), соответственно, которые регулируют экспрессию генов во время G1 / S переход клеточного цикла ²⁹ .

Чтобы проверить, представляют ли идентифицированные репортерные TF ключевые точки в регуляции секреции белка, для оценки были выбраны некоторые из TF. Ранее было показано, что конструирование TF посредством делеции или сверхэкспрессии гена влияет на секрецию белка, и наш анализ репортера TF мутантных штаммов согласуется с этими исследованиями. Таким образом, анализ репортера TF показывает, что делеция ROX1 или активация UPC2 должны улучшать продукцию белка, что действительно имеет место ³⁰ , и что делеция HAP1 должна улучшать продукцию белка ³¹ .Чтобы оценить, влияют ли некоторые из дополнительных репортерных ТФ, идентифицированных в этом исследовании, на секрецию белка, мы удалили или чрезмерно экспрессировали некоторые из соответствующих генов в соответствии с их измененным уровнем экспрессии в мутантных штаммах. Следовательно, MBP1 , MSS11 , SWI4 и SUT1 были сверхэкспрессированы, а BAS1 , HAP2 и HAP4 были удалены в штамме AAC (рис. 3c, d). TUP1 расположен на хромосоме III и имел высокий уровень экспрессии в мутантных штаммах из-за дупликации всей хромосомы III.Как упоминалось выше, Tup1p взаимодействует с Rox1p, и, поскольку было обнаружено, что делеция ROX1 оказывает положительное влияние на секрецию белка, мы также удалили TUP1 (Fig. 3d). За исключением сверхэкспрессии SWI4 , все стратегии инженерии привели к повышенной секреции белка, и это показывает, что эффективная секреция белка может быть достигнута путем глобальной настройки экспрессии генов путем инженерии экспрессии TF. Кроме того, эти результаты подтверждают, что идентифицированные с помощью вычислений репортерные TF для мутантных штаммов могут быть использованы в качестве мишеней для улучшения секреции белка.

Мы также вычислили репортерные GO-термины для мутантных штаммов из группы 2 и группы 3. Таким образом, мы обнаружили, что гены, связанные с GO-терминами, связаны с функцией митохондрий, генерацией метаболитов-предшественников и энергией, клеточным дыханием, клеточным процессом обмена аминокислот и т.д. были понижены. Напротив, гены, связанные с терминами GO, связаны с функцией рибосом, цитоплазматической трансляцией, регуляцией организации органелл, транспортом везикул Гольджи, липидизацией белков, процессом липидного обмена и т. Д.были активированы (дополнительный рис. 6). Эти результаты согласуются с фенотипическим анализом, который показал, что мутантные штаммы демонстрируют сниженное дыхание и повышенный синтез белка и транспорт белков. Кроме того, изменения липидного обмена у мутантных штаммов могут способствовать увеличению секреции белка ^{32, 33} .

Мы также экспериментально проверили некоторые бессмысленные мутации в генах, связанных с идентифицированными терминами GO. Таким образом, PGM2 , кодирующая фосфоглюкомутазу, участвующую в биосинтезе гликогена, и PXA1 , кодирующая одну из субъединиц переносчика жирных кислот в пероксисомы, несут нонсенс-мутации и, следовательно, нефункциональны.Поэтому мы оценили влияние удаления этих генов на секрецию белка в эталонном штамме AACK и обнаружили, что эти делеции приводят к 30-45% улучшению продукции белка (дополнительный рис. 7), что, таким образом, подтверждает наш анализ GO-термина.

Анализ транскрипции генов в углеводном обмене

Поскольку макроскопические потоки, такие как скорость поглощения глюкозы и скорость продукции этанола, были изменены в мутантных штаммах, и в то же время были изменены условия GO, связанные с клеточным дыханием и образованием метаболитов-предшественников и энергетическим метаболизмом. Мы исследовали уровни транскрипции генов, связанных с углеводным метаболизмом, в мутантных штаммах.Уровни экспрессии генов были представлены на карте центрального углеродного метаболизма (рис. 4). HXT1 , кодирующий низкоаффинный транспортер глюкозы ³⁴ , был подавлен в мутантных штаммах из группы 3. Напротив, гены, кодирующие высокоаффинные транспортеры гексозы, были активированы почти во всех мутантных штаммах. Этот измененный уровень транскрипции генов переносчиков гексозы несовместим с высокой концентрацией глюкозы в среде и, следовательно, указывал на аномальное восприятие глюкозы у мутантных штаммов, но все же приводил к увеличению скорости поглощения глюкозы (таблица 1).Анализом мутаций и дифференциальной экспрессии генов в мутантных штаммах ¹⁶ (дополнительные данные 1) с помощью метода тонкого картографирования GO было обнаружено, что мутантный ген SNF3 связан с термином GO для транспорта углеводов. Поскольку SNF3p является сенсором глюкозы плазматической мембраны, участвующим в регуляции экспрессии транспортеров гексозы ³⁵ , аномальное восприятие глюкозы и измененный уровень транскрипции генов транспортеров гексозы, вероятно, были затронуты мутацией в SNF3 .У мутантных штаммов подавлялась регуляция большинства генов центрального углеродного метаболизма. Для цикла TCA это соответствовало снижению дыхания и увеличению продукции этанола у этих штаммов, тогда как снижение экспрессии гликолитических генов казалось несовместимым с увеличением скорости поглощения глюкозы. Однако хорошо известно, что гликолитический поток не контролируется в первую очередь на уровне транскрипции, в отличие от цикла TCA и дыхания ³⁵ .

Рис. 4

Транскрипционные изменения генов, участвующих в углеводном обмене.Большинство генов центрального углеродного метаболизма были подавлены, а гены, кодирующие высокоаффинные транспортеры гексозы, были активированы в мутантных штаммах

.

Аминокислоты являются строительными блоками для синтеза белка. Многие гены, участвующие в пути биосинтеза аминокислот, были подавлены в мутантных штаммах (дополнительный рис. 8). Было обнаружено, что гены CHA1 , HIS4 , ILV6 и THR4 активируются в штаммах Mh44, D5, B130 и B184, но это можно приписать расположению этих генов на дублированной хромосоме III. GDh4 , GLN1 и GLT1 , участвующие в биосинтезе глутамата и глутамина, также были активированы ³⁶ . И глутамат, и глутамин служат донорами амино. Кроме того, гены AAT1 , ALT1 и BAT1 , которые кодируют трансаминазы для обратимого преобразования между глутаматом и другими аминокислотами ^37,38,39 , были усилены. Эти результаты показали, что глутамат и глутамин играют важную роль в синтезе белка.Превращение аминокислот с помощью трансаминаз для баланса внутриклеточного пула аминокислот имеет решающее значение для эффективного производства белка, в частности, когда аминокислоты доставляются через среду, как в нашем случае. При сравнении аминокислотного состава α-амилазы с аминокислотным составом белков дрожжевых клеток было обнаружено, что потребность в цистеине для производства того же количества α-амилазы в 9,3 раза выше, чем при среднем биосинтезе того же количества. белков дрожжевых клеток (дополнительная таблица 2).Фактически, потребность в цистеине у мутантных штаммов увеличилась на 25–85% по сравнению с эталонным штаммом AAC (дополнительная таблица 3). Однако гены пути биосинтеза цистеина все еще не проявляли повышенной экспрессии (дополнительный рис. 8). Тем не менее, из анализа генов, участвующих в транспорте аминокислот, мы обнаружили, что YCT1 и ERS1 , ответственные за транспорт цистеина, были значительно активированы ^{40, 41} (дополнительный рисунок 9), и это может помочь мутантным штаммам соответствовать повышенная потребность в цистеине при увеличении продукции α-амилазы (дополнительная таблица 3).

Анализ и инженерия биосинтеза тиамина

В нашем предыдущем исследовании ¹⁶ было показано, что глюкан-1,4-α-глюкозидаза Rhizopus oryzae также имеет повышенную секрецию мутантными штаммами, а что касается α-амилазы. штамм B184 был безусловно лучшим с точки зрения секреции белка. Поэтому мы протестировали этот штамм на его способность продуцировать два других белка, сывороточный альбумин человека и Trichoderma reesei эндо-1,4-бета-ксиланазу II. По сравнению с эталонным штаммом CEN.PK 530.1C, оба белка показали более высокий выход белка в B184 (дополнительный рис. 10). Эти результаты свидетельствуют о том, что наши результаты не ограничиваются конкретным белком и могут быть применимы в целом. Поэтому мы провели более подробный анализ транскриптома лучшего штамма B184 с точки зрения секреции белка.

Значительно повышенная или пониженная регуляция генов в этом штамме была проанализирована с помощью обогащения биопроцессом ГО (рис. 5а и дополнительный рис. 11), и этот анализ показал, что гены, участвующие в биосинтезе тиамина, имеют значительно повышенную экспрессию (рис.5а). Термин GO, связанный с метаболизмом тиаминсодержащих соединений, включает процесс биосинтеза тиамина, процесс биосинтеза тиаминсодержащего соединения и процесс метаболизма тиамина. Наложив экспрессию генов для штаммов на карту путей биосинтеза тиамина, стало также ясно, что уровни экспрессии генов, связанных с этим путем, были повышены в штамме B184 (фиг. 5b). Было замечено, что эти гены также были активированы в штаммах F83, D5 и B130. Все эти четыре штамма были получены во втором раунде скрининга и показали более высокий уровень секреции белка по сравнению с их предковыми штаммами.Основываясь на этой информации, мы предположили, что тиамин может потребоваться для эффективной секреции белка. Поэтому мы провели эксперименты с дополнительным тиамином, добавленным к среде, но из этих экспериментов было обнаружено, что эталонный штамм AAC не показал разницы в секреции α-амилазы, а лучший мутантный штамм B184 даже продемонстрировал небольшое снижение секреции α-амилазы. при дополнительном добавлении тиамина (рис. 5c). Затем мы дополнительно исследовали транскрипционный контроль генов биосинтеза тиамина.Сообщалось, что экспрессия генов биосинтеза тиамина контролируется Thi2p вместе с Thi3p и Pdc2p, а транскрипция THI2 негативно регулируется внутриклеточным уровнем тиамина ⁴² . Поскольку уровни экспрессии THI2 и THI3 в мутантных штаммах были повышены, это означало, что клетки, эффективно секретирующие α-амилазу, могут находиться в низком клеточном тиаминовом статусе. Тем не менее, низкий статус тиамина запускает механизм ответа тиамина, который пытается уравновесить уровень тиамина за счет повышения транскрипции генов биосинтеза тиамина.Следовательно, THI2 , THI3 и THI4 были удалены в штаммах AAC и B184, чтобы снизить биосинтез тиамина, а единственная делеция гена привела к увеличению секреции белка в фонах обоих штаммов (рис. 5d). Несколько тиаминсодержащих белков (тиаминдифосфат-зависимые ферменты), кодируемые ARO10 , ILV2 , KGD1 и THI3 , участвуют в метаболизме аминокислот (рис. 5e) ^{42, 43} и уровни их экспрессии были ниже у мутантных штаммов.Следовательно, снижение концентрации тиамина может дополнительно снизить активность этих ферментов, предполагая, что ослабление активности этих путей может способствовать секреции белка. Поэтому мы удалили эти гены в AAC, и удаление каждого из этих генов привело к увеличению секреции белка (рис. 5f).

Рис. 5

Низкий уровень тиамина благоприятен для продукции α-амилазы. a GO, обогащенный биопроцессом большинства генов активации ( P -adj <0.05 (метод Бенджамини – Хохберга) и log ₂ -кратное изменение> 0,5) в штамме B184. b Уровни транскрипции генов, связанных с биосинтезом тиамина. 1: гидроксиметилпиримидин; 2: гидроксиметилпиримидинфосфат; 3: 2-метил-4-амино-5-гидроксиметилпиримидиндифосфат; 4: 1-глицин; 5: аденилированный тиазол; 6: 4-метил-5- (β-гидроксиэтил) тиазолфосфат; 7: тиаминфосфат; 8: тиамин; 9: дифосфат тиамина. c Продукция α-амилазы в среде SD-2 × SCAA, снабженной различным количеством тиамина. d Удаление THI2 , THI3 и THI4 усиливает продукцию α-амилазы. e Тиаминдифосфат-зависимые ферменты, участвующие в метаболизме аминокислот. Дигидроксиацетонфосфат DHAP; E4P эритрозо-4-фосфат; F6P, фруктозо-6-фосфат; FBP, фруктозо-1,6-бисфосфат; G6P, глюкозо-6-фосфат; G3P, глицеральдегид-3-фосфат. f Удаление ILV2 , ARO10 и KGD1 усиливает продукцию α-амилазы.Данные, приведенные в c , d , f , представляют собой средние значения ± стандартное отклонение дубликатов

Анализ пониженного стресса ER

Продукция гетерологичного белка часто создает бремя сворачивания белка в клетке и, следовательно, вызывает окислительный стресс в эндоплазматическом ретикулуме (ER) ⁴⁴ . Путь развернутого белкового ответа (UPR) активируется возникающим окислительным стрессом в ER, что способствует снижению клеточного стресса.Hac1p является ключевым UPR-индуцированным TF для транскрипционной активации генов, кодирующих шапероны ER, включая KAR2 , ERO1 и т.д. ⁴⁵ . Сообщалось, что сверхэкспрессия HAC1 усиливает секрецию белка ⁴⁶ . Было обнаружено, что мутантные штаммы Mh33 и F83 из группы 2 имеют повышенные уровни экспрессии HAC1 и ERO1 . В отличие от группы 2, у мутантных штаммов Mh44, D5, B130 и B184 из группы 3 обнаружено подавление HAC1 , ERO1 и KAR2 (дополнительный рис.12а). Однако было замечено, что как PDI1 , так и EMC1 , ответственные за эффективную укладку белков в ER, были активированы в штаммах Mh44, D5, B130 и B184. Повышенная регуляция PDI1 и EMC1 была обусловлена ​​их расположением на дуплицированной хромосоме III. Было обнаружено, что несколько других генов, участвующих в сворачивании белка, EMC2-6 , имеют повышенную регуляцию, и степень экспрессии была более значительной в штаммах из группы 3. Эти результаты предполагают, что штаммы из группы 2 и группы 3 использовали разные механизмы для высвобождения окислительного стресс от производства гетерологичного белка.Группа 2 в основном полагалась на путь UPR, тогда как группа 3 полагалась на прямую активацию ключевых шаперонов в ER, обеспечивая более эффективный фолдинг белка.

Чтобы оценить, влияет ли измененная экспрессия шаперонов в ЭР на окислительный стресс, мы измерили уровень активных форм кислорода (АФК) в штаммах. По сравнению с непродуцирующим контрольным штаммом все штаммы, продуцирующие α-амилазу, имели более высокий уровень АФК, что указывает на повышенный стресс ER из-за продукции гетерологичного белка (дополнительный рис.12б). Среди этих продуцирующих α-амилазу штаммов штамм AAC дикого типа показал самый высокий уровень ROS. Это указывает на то, что снижение окислительного стресса может быть достигнуто как активацией UPR, так и повышением способности к сворачиванию белка. Накопленные ROS также наблюдали визуально с помощью флуоресцентной микроскопии (дополнительный рис. 12d). Учитывая, что мутантные штаммы продуцируют больше α-амилазы, данные по накоплению АФК указывают на то, что образование АФК связано с продукцией гетерологичного белка, т.е.е. АФК на единицу выхода α-амилазы была снижена в мутантных штаммах (дополнительный рис. 12с). Снижение окислительного стресса в мутантных штаммах также поддерживалось сниженными уровнями экспрессии генов ответа на окислительный стресс (дополнительный рис. 12a).

Мутантные штаммы несут мутации в нескольких генах, связанных со стрессом ER или транспортом органелл, таких как EMC1 , ERV29 , USO1 , VPS10 , SNC2 , что согласуется с нашими результатами анализа транскриптома. .В нашем предыдущем исследовании ¹⁶ мы подтвердили, что секреция белка связана с ERV29 и SNC2 ; и делеция SNC2 привела к улучшенному продуцированию белка. Чтобы дополнительно оценить, есть ли общее влияние модуляции стресса ER или транспорта органелл, мы дополнительно оценили EMC1 , USO1 и VPS10 . Эти гены были удалены в AACK, и было обнаружено, что делеция EMC1 и VPS10 улучшает продукцию белка на 10-40%, тогда как делеция USO1 не влияет на продукцию белка (дополнительный рис.7). Мутантные штаммы также имеют дупликации генов в генах, участвующих в стрессе ER, например, PDI1 , и поэтому мы сверхэкспрессировали это в AACK и обнаружили, что это приводит к улучшению продукции белка.

Снижение окислительного стресса также может быть связано с улучшенным поступлением НАДФН. Повышенное поступление НАДФН через пентозофосфатный путь (PPP) было показано полезным для более высокой продукции белка в клетках яичника китайского хомячка (CHO) и Pichia pastoris
^{47, 48} .Хотя не наблюдали повышенной экспрессии генов, связанных с PPP, мы обнаружили снижение выхода биомассы мутантных штаммов. Поскольку многие пути биосинтеза требуют НАДФН в качестве восстанавливающих эквивалентов, снижение выхода биомассы позволит клеткам сохранять больше НАДФН для поддержания окислительно-восстановительного баланса (защиты от окислительного стресса). Таким образом, мутантные штаммы, по-видимому, удовлетворяли потребности в НАДФН, связанные с увеличением продукции амилазы за счет перераспределения ресурсов. Это подтверждается общим содержанием белка в мутантных штаммах.По мере увеличения содержания амилазы общий белок (белок дрожжевых клеток и амилаза) не увеличивался в мутантных штаммах по сравнению с эталонным штаммом AAC (дополнительный рис. 13).

ПРАЙМ PubMed | Связывание амилоида А сыворотки человека (hSAA) и его комплекса липопротеинов высокой плотности (hSAA-HDL3) с нейтрофилами человека. Возможное влияние на функцию белка с неизвестной физиологической ролью

Citation

Preciado-Patt, L, et al. «Связывание амилоида а сыворотки человека (hSAA) и его комплекса липопротеинов 3 высокой плотности (hSAA-HDL3) с нейтрофилами человека.Возможное влияние на функцию белка неизвестной физиологической роли ». International Journal of Peptide and Protein Research, vol. 48, no. 6, 1996, pp. 503-13.

Preciado-Patt L, Pras M , Фридкин М. Связывание амилоида А сыворотки человека (hSAA) и его комплекса липопротеинов 3 высокой плотности (hSAA-HDL3) с нейтрофилами человека. Возможное влияние на функцию белка неизвестной физиологической роли. Int J Pept Protein Res 1996; 48 (6): 503-13.

Preciado-Patt, L., Прас, М., и Фридкин, М. (1996). Связывание амилоида А сыворотки человека (hSAA) и его комплекса липопротеинов высокой плотности (hSAA-HDL3) с нейтрофилами человека. Возможное значение для функции белка неизвестной физиологической роли. Международный журнал исследований пептидов и белков , 48 (6), 503-13.

Preciado-Patt L, Pras M., Фридкин М. Связывание амилоида a сыворотки человека (hSAA) и его комплекса липопротеинов высокой плотности (hSAA-HDL3) с нейтрофилами человека.Возможное влияние на функцию белка неизвестной физиологической роли. Int J Pept Protein Res. 1996; 48 (6): 503-13. PubMed PMID: 8985783.

TY — JOUR
T1 — Связывание амилоида А сыворотки человека (hSAA) и его комплекса липопротеинов 3 высокой плотности (hSAA-HDL3) с нейтрофилами человека. Возможное значение для функции белка неизвестной физиологической роли.
AU — Preciado-Patt, L,
AU — Прас, М,
AU — Фридкин, М,
PY — 1996/12/1 / pubmed
PY — 1996/12/1 / medline
PY — 1996/12/1 / entrez
SP — 503
EP — 13
JF — Международный журнал исследований пептидов и белков
JO — Int J пепт протеиновый рес
ВЛ — 48
ИС — 6
N2 — Сывороточный амилоид A (SAA) — это сывороточный белок острой фазы, который существует в организме в комплексе с липопротеином высокой плотности (HDL3).Он пока неизвестным образом участвует в хронических воспалениях и опухолевых заболеваниях. Чтобы понять возможную физиологическую роль SAA, мы начали исследование его ассоциации с провоспалительными клетками крови, с которыми он может функционально взаимодействовать in vivo. Ниже мы описываем характеристики связывания рекомбинантных SAA человека с нейтрофилами человека (полиморфноядерными лейкоцитами; PMNL) и их плазматическими мембранами. Анализ Скэтчарда кривых связывания и вытеснения rSAA выявил Kd в наномолярном диапазоне.Было обнаружено, что С-концевой домен белка, то есть аминокислотные остатки 77-104, которые могут находиться в сыворотке после деградации SAA и образования амилоида А, эффективно ингибирует связывание всего белка с нейтрофилами. Также изучалось взаимодействие SAA и родственных ему пептидов, образующих комплекс в HDL3, с человеческими PMN. Результаты предполагают, что SAA может быть вовлечена пока неизвестным образом в воспалительный механизм, связанный с нейтрофилами.