» Отличия римантадин и ремантадин: Противовирусное средство Дарница Римантадин — «Римантадин или Ремантадин, в чем разница? Лечение гриппа и ОРВИ.»

Отличия римантадин и ремантадин: Противовирусное средство Дарница Римантадин — «Римантадин или Ремантадин, в чем разница? Лечение гриппа и ОРВИ.»

Отличия римантадин и ремантадин: Противовирусное средство Дарница Римантадин — «Римантадин или Ремантадин, в чем разница? Лечение гриппа и ОРВИ.»

Содержание

Противовирусное средство Дарница Римантадин — «Римантадин или Ремантадин, в чем разница? Лечение гриппа и ОРВИ.»

Все началось с того что дочка заболела, через пару дней муж притащил какой-то вирус. Следом заболел сын, потом опять дочь, сейчас по второму кругу более муж. У детей все симптомы гриппа, да и врач почти на 100 % в этом уверена.

Вот так по кругу уже месяц качает мою семью от одного вируса к другому и лишь мне пока удалось им противостоять. Как-то вечером и я почувствовала недомогание, поднялась температура 37,6, появилась головная боль и начал пробиваться сухой кашель.

И пусть я не верю в силу противовирусных препаратов в этот раз сдалась. Чтоб одолеть ОРВИ и возможно грипп я купила противовирусное Римантадин.

В аптеке меня спросили что дать рЕмантадин или рИмантадин, я в недоумении пожала плечами и мне продали Римантадин-Дарница.

В упаковке 20 таблеток, за которые я заплатила 19 гривен. Смешная цена по нынешним временам.

Таблетки белые, маленького размера.

1 таблетка содержит римантадина гидрохлорида 50 мг

Лечение гриппа (дозировка)

Таблетки принимать внутрь после еды, запивая водой. Перед применением препарата детям обязательно следует проконсультироваться с врачом.

Взрослым и детям старше 14 лет препарат назначать в дозе в 1-й день — 100 мг (2 таблетки) 3 раза в сутки, на 2-й и 3-й день — 100 мг (2 таблетки) 2 раза в сутки, на 4-й и 5-й день — 100 мг 1 раз в сутки. В первый день заболевания возможно применение препарата в дозе 3 таблетки 2 раза в сутки или 6 таблеток за 1 прием.

Детям в возрасте 11-14 лет препарат назначать в дозе 50 мг (1 таблетка) 3 раза в сутки, детям 7-10 лет — 50 мг (1 таблетка) 2 раза в сутки.

Придя домой из аптеки сразу выпила чашку чая с лимоном, таблетку витамина С 500мг. и 2 таблетки Римантадина. Римантадин начала принимать не в профилактической дозе, а согласно инструкции в лечебной.

На ночь 2 таблетки Римантадина, утром у меня не наблюдалось ни единого симптома вируса, даже начинающейся кашель отступил. Но еще 2 дня я пила противовирусные таблетки, на всякий случай так сказать.

Не знаю, возможно Римантадин оказался настолько эффективным что убил вирус так сразу. Возможно мой иммунитет сыграл свою роль, а может иммунитет в комплексе с противовирусными смог победить вирусную инфекцию.

Римантадин рекомендовать буду, а пить его или нет решать конечно же Вам. Самолечением заниматься не советую, хотя я именно так и сделала

 

Всем крепкого здоровья, пусть вирусы Вас и Вашу семью обходят стороной!

 

Кстати, Римантадин или Ремантадин роли не играет, это один и тот же препарат.

Чем «Римантадин» отличается от «Ремантадина»?

Когда вы болеете, вы ищете такое лекарство, которое вылечит вас наверняка. Когда перед вами появляется два таких медикамента, их нужно проанализировать и провести сравнение плюсов и минусов, чтобы остановить свой выбор на одном. В этой статье мы расскажем о двух распространенных средствах против гриппа, а именно «Римантадин» и очень похожий на него по названию «Ремантадин». Мы коснемся некоторых нюансов их практического использования, а также рассмотрим разницу между этими препаратами.

Ценовой вопрос


Каждый раз, когда вам прописывают какое-то лекарство, вы задаетесь вопросом, во сколько оно вам обойдется. Множество работников российских аптек рассказывают, что зачастую пациент начинает подбирать себе более дешевый заменитель выписанного ему препарата. Однако есть такие ситуации, когда этого не надо делать, потому что более дешевый аналог не всегда обладает таким же действием, как оригинальный препарат, и если вы будете принимать дешевый аналог, последствия для вас могут оказаться печальными.

И все-таки, в чем разница?


Каково же отличие между «Римантадином» и «Ремантадином»? В обеих таблетках одно вещество, оказывающее основное действие. Название его — римантадина гидрохлорид. Единственный вариант дозировки, в котором выпускаются таблетки «Римантадин», составляет 50 миллиграмм. «Ремантадин» же выпускается в варианте 50 миллиграмм или 100 миллиграмм. Поскольку можно заключить, что состав препаратов идентичен, это значит, что механизм работы их также идентичен. А значит, эти таблетки являются взаимозаменяемыми аналогами.


Когда патогенный микроорганизм попадает внутрь вашего тела, римантадин связывается с этим вирусом, не позволяя ему тем самым размножаться. Также действие его мешает вирусу связываться с клеткой. Римантадина гидрохлорид очень действенен против различных вирусных инфекций. Также он полезен как иммуномодуляторное средство.

В каких случаях назначают эти препараты?


Каковы показания у таблеток под названием «Ремантадин»? В инструкции по применению сказано, что это препарат против вирусных инфекций, таких как грипп, и многих других, включая, к примеру, энцефалит. Также, согласно инструкции, «Ремантадин» используется в профилактических целях для предотвращения заражения вирусами, с которыми он умеет связываться.


Когда вам могут назначить «Римантадин»? В инструкции написано, что это профилактическое средство, а также средство для лечения вирусных заболеваний. То есть, выражаясь простым языком, поводы для назначения у двух этих лекарств одинаковые.

Когда нельзя назначать эти лекарства?


Дальше начинаются отличия. Какое же главное отличие между таблетками «Ремантадин» и «Римантадин»? Первый вид лекарства не назначают при беременности. Еще, согласно инструкции, его нельзя назначать при патологии печени, тиреотоксикозе и непереносимости отдельных компонентов препарата.


Откроем инструкцию таблеток «Римантадин» и обратимся к разделу «Противопоказания». Там сказано, что препарат нельзя принимать детям до семи лет, а также женщинам в тот период, когда они беременны или же кормят грудью. Ограничения накладываются также на тех пациентов, которые имеют проблемы с печенью, почками и щитовидной железой.К этому, как и в первом случае, добавляется аллергия на один из компонентов таблетки. Как видно, несмотря на то, что у препаратов одинаковое действующее вещество, больше противопоказаний имеет второй вариант лекарства, «Римантадин».

Сколько таблеток принимать?


Теперь рассмотрим, сколько и в какой дозировке придется принимать таблеток. Таблетки пьют один раз в течение суток. Если использовать данный препарат уже для лечения болезни, то длительность применения возрастает в пять-семь раз, а дозировка остается такой же. Для профилактики вирусной инфекции «Римантадин» назначают в количестве двух таблеток в сутки, что в сумме составляет 100 миллиграмм действующего вещества. Дозировку, предназначенную для детского возраста, можно установить из расчета 5 мг на килограмм тела.


Перейдем к «Ремантадину». Вспомним, что это лекарство выпускается в двух вариантах дозировок — по 50 и по 100 миллиграмм, так что будьте внимательны, когда рассчитываете дозу — легко перепутать. Здесь для профилактических целей используют целую таблетку или половину, в зависимости от дозировки препарата, что составляет 50 мг. Если же вы лечитесь от вирусного заболевания, тут лекарство назначается вам на неделю, а дозировка его возрастает до шести или трех таблеток в зависимости от дозировки, то есть до 300 миллиграмм.


Таблетку запивают большим количеством воды и в том и в другом случае. Желательно принимать таблетки после еды.

А где же меньше побочных эффектов?


Любые препараты имеют побочное действие, помимо основного, и рассматриваемые нами лекарства — не исключения. Важно будет узнать, что использование препаратов «Римантадин» и «Ремантадин» обостряет риск инсульта и другие хронические патологии сердечно-сосудистой системы. По этой причине перед началом приема обязательно нужно обратиться к специалисту, который скажет вам, стоит ли вам применять эти таблетки.


В обеих инструкциях приблизительно один и тот же набор побочных эффектов. Первый и самый главный — возможная аллергия на компоненты таблетки. Более редкие явления — болит голова, во рту появляется сухость, в кишечнике — повышенное количество газов. Некоторые пациенты жалуются на боль в брюшине. Остальные эффекты встречаются реже. Со стороны нервной системы принимавшие препарат имели жалобы на раздражительность и отсутствие ночного сна. Пациенты быстро утомляются и у них часто меняется настроение. При передозировках препаратов возникает множество неприятных реакций.

Важные примечания


Инструкция по пользованию таблетками «Ремантадин» не предусматривает ограничений, которые следует оговаривать особо. Напротив, инструкция аналогичного ему лекарства содержит массу ограничений. Например, не допускается прием «Римантадина» с сорбентами — они впитают лекарство и оно не поможет. Не разрешается одновременный прием «Римантадина» с жаропонижающими, которые обесценивают эффект любого противовирусного средства. Если вам нужно сбить температуру, следует выждать не менее трех часов после приема таблетки.

Итак, на чем остановить свой выбор?


Мы разобрали, чем различны по составу два представленных медикамента. Медицинские работники говорят, что лекарство «Ремантадин» исследовалось намного глубже, чем его аналог. Благодаря этому его инструкция более полна — там описано больше побочных действий, потому что препарат проходил тщательную проверку, а значит, он безопаснее своего аналога. Поэтому однозначно стоит выбрать «Ремантадин», в случае, например, если женщина кормит грудью. Но если вы все еще в сомнениях, спросите вашего лечащего врача, чем отличаются «Римантадин» и «Ремантадин». Врач, безусловно, расскажет вам об этом более подробно и вы не уйдете от него без ценного совета. Не болейте!

РИМАНТАДИН АВЕКСИМА | ОАО «Авексима»

  • Регистрационный номер:P N002925/01
  • Международное непатентованное название:римантадин
  • Лекарственная форма:таблетки
  • Фармакотерапевтическая группа:противовирусное средство
  • Форма выпуска:Таблетки 50 мг.
    По 10 или 20 таблеток в контурную ячейковую упаковку из пленки поливинилхлоридной и фольги алюминиевой печатной лакированной.
    По 20 таблеток в банку из полиэтилена низкого давления, укупоренную крышкой с уплотняющим элементом и компенсатором полимерным.
    2 контурные ячейковые упаковки по 10 таблеток, или 1 контурную ячейковую упаковку по 20 таблеток, или 1 банку вместе с инструкцией по медицинскому применению помещают в пачку из картона.

  • Состав:1 таблетка содержит:
    действующее вещество: римантадина гидрохлорид – 50,0 мг.
    вспомогательные вещества: лактозы моногидрат – 60,0 мг, крахмал картофельный – 28,5 мг, кальция стеарат – 1,5 мг, тальк – 1,5 мг, карбоксиметилкрахмал натрия (натрия крахмал гликолят) – 8,5 мг.


Римантадин активен в отношении различных штаммов вируса гриппа А. Являясь слабым основанием, римантадин действует за счет повышения pH эндосом, имеющих мембрану вакуолей, которые окружают вирусные частицы после их проникновения в клетку. Предотвращение ацидификации в этих вакуолях блокирует слияние вирусной оболочки с мембраной эндосомы, предотвращая, таким образом, передачу вирусного генетического материала в цитоплазму клетки. Римантадин также угнетает выход вирусных частиц из клетки, т.е. прерывает транскрипцию вирусного генома.


Важно помнить,
что римантадин не следует принимать одновременно с препаратами, содержащими парацетамол и аскорбиновую кислоту, т.к. они снижают максимальную концентрацию препарата.


Показания к применению


Профилактика и раннее лечение гриппа А у взрослых и детей старше 7 лет.


Способ применения и дозы


Внутрь после еды, запивая водой.


Лечение гриппа следует начинать в течение 24-48 ч после появления симптомов болезни.


Взрослым в первый день назначают по 100 мг 3 раза в день; во второй и третий дни по 100 мг 2 раза в день; в четвертый и пятый день по 100 мг один раз в день. В первый день заболевания возможно применение препарата однократно в дозе 300 мг.


Детям в возрасте от 7 до 10-ти лет назначают по 50 мг 2 раза в день; от 11 до 14 лет – 50 мг 3 раза в день. Старше 14 лет – дозы для взрослых. Принимают в течение 5-ти дней.


Для профилактики гриппа взрослым назначают 50 мг один раз в день в течение до 30-ти дней.


Детям старше 7-ми лет – 50 мг 1 раз в день в течение до 15-ти дней.


Срок годности


5 лет. По истечении срока годности препарат не применять.


Производитель/Организация, принимающая претензии потребителей


ОАО «Ирбитский химфармзавод»


623856, Россия, Свердловская обл. , г. Ирбит, ул. Кирова, д. 172.


Тел./факс: (34355) 3-60-90.


Адрес производства:


Свердловская обл., г. Ирбит, ул. Карла Маркса д. 124-а.

ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ. ПЕРЕД ИСПОЛЬЗОВАНИЕМ ОЗНАКОМЬТЕСЬ С ИНСТРУКЦИЕЙ ИЛИ ПРОКОНСУЛЬТИРУЙТЕСЬ СО СПЕЦИАЛИСТОМ

Рекомендуем

Вернуться к каталогу

Амантадин и римантадин для профилактики и лечения гриппа А у детей и пожилых людей

Вопрос обзора

В соответствии с рекомендациями Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ), осельтамивир (Тамифлю) в настоящее время используется у людей с гриппом А. В предыдущих пандемиях вирус был чувствителен к амантадину и римантадину. Если они являются безопасными, и циркулирующие штаммы окажутся чувствительными к этим лекарствам, они могли бы быть альтернативой для управления гриппом. В связи с этим мы хотели ответить на вопрос, могут ли (или не могут) амантадин и римантадин предотвратить или вылечить грипп А у детей и пожилых людей.

Актуальность

Грипп является респираторной (дыхательной) инфекцией, проявляющейся кашлем, насморком и лихорадкой. Большинство симптомов проходит без лечения в течение трех-семи дней. Однако госпитализация, пневмония и даже смерть являются редкими осложнениями этой болезни, особенно среди детей и пожилых людей. Пандемии также являются причиной для беспокойства.

Основные результаты и качество доказательств

Мы выявили 12 испытаний (2494 участника: 1586 детей и 908 пожилых людей). Мы рассматривали испытания, которые сравнивали амантадин или римантадин с отсутствием вмешательства, плацебо или лекарствами контроля у детей и пожилых людей. Самые недавние поиски были завершены в октябре 2014 года. Мы рассмотрели несколько исходов, включающих грипп А, длительность лихорадки, кашель, головную боль, тошноту/рвоту, головокружение и возбуждение/ бессонницу.

Хотя амантадин был эффективен в предотвращении гриппа А у детей, его необходимо было бы использовать у 17 детей в течение периода от 14 до 18 недель, чтобы предотвратить один случай гриппа А. Кроме того, безопасность лекарства не была окончательно установлена. Качество доказательств было низкое.

Эффективность обоих противовирусных средств ограничивалась пользой римантадина в снижении лихорадки на третий день лечения у детей. Качество доказательств было умеренным. Эта польза не оправдывает рекомендацию использовать римантадин для лечения всех детей с гриппом А.

Римантадин не показал профилактический (превентивный) эффект у пожилых людей. Качество доказательств было очень низким.

Заключение

Качество доказательств в сочетании с отсутствием знаний о безопасности амантадина и ограниченная польза римантадина не указывают на то, что амантадин и римантадин по сравнению с контролем (плацебо или парацетамолом) могут быть полезными в предотвращении, лечении и сокращении продолжительности гриппа А у детей и пожилых людей.

РИМАНТАДИН-ДАРНИЦА инструкция по применению, цена в аптеках Украины, аналоги, состав, показания | RIMANTADINUM-DARNITSA таблетки компании «Дарница»

римантадина гидрохлорид — производное амантадина, обладает выраженной противовирусной активностью. Эффективный в отношении различных вирусов гриппа типа А, а также оказывает антитоксическое действие при гриппе, вызванном вирусом типа В. Римантадин ингибирует репликацию вируса на ранних стадиях цикла за счет нарушения формирования вирусной оболочки. Результаты генетических исследований свидетельствуют, что важное значение в противовирусном влиянии римантадина в отношении вируса гриппа А имеет специфический белок гена М2 вириона. In vitro римантадин ингибирует репликацию всех трех выявленных у человека антигенных подтипов (h2N1, h3N2, h4N3) вируса гриппа. Римантадин не влияет на иммуногенные свойства инактивированной вакцины гриппа А.

Римантадин также эффективен в отношении арбовирусов, которые являются возбудителями клещевого энцефалита.

После одно- и многократного приема препарата пациентами различных возрастных групп корреляция между концентрацией римантадина в плазме крови и его антивирусной активностью не установлена.

После приема внутрь препарат почти полностью всасывается. Абсорбция — медленная. Связь с белками плазмы крови — около 40%. Объем распределения: у взрослых — 17–25 л/кг массы тела, у детей — 289 л/кг. Концентрация в носовом секрете на 50% выше, чем в плазме крови. Сmax действующего вещества в плазме крови при дозе 100 мг 1 раз в сутки — 181 нг/мл, при 100 мг 2 раза в сутки — 416 нг/мл.

Метаболизируется в печени. T½ — 24–36 ч. 75–85% принятой дозы выделяется почками в основном в виде метаболитов, 15% — в неизменном виде.

При ХПН T½ увеличивается в 2 раза. У пациентов с почечной недостаточностью и у лиц пожилого возраста концентрация действующего вещества может повышаться до токсического размера.

У лиц с хроническими заболеваниями печени, в целом с компенсированным циррозом печени, снижение дозы препарата не требуется, поскольку фармакокинетика при однократном приеме в дозе 200 мг значительно не отличается от такого же, как и у здорового человека. Но у больных с тяжелыми нарушениями функции печени при дозе 200 мг значение AUC в 3 раза больше, T½ в 2 раза длиннее, а клиренс на 50% ниже по сравнению с показателями функции печени у здоровых взрослых.

Фармакокинетический профиль римантадина у детей соответствует профилю у здоровых взрослых.

профилактика и лечение гриппа, вызванного вирусом типа А, профилактика клещевого энцефалита вирусной этиологии у взрослых.

применение препарата необходимо начать сразу после появления первых симптомов гриппа. Терапевтический эффект более выражен, если применение препарата начато в течение первых 48 ч.

Лечение гриппа. Таблетки принимать внутрь после еды, запивая водой. Перед применением препарата у детей обязательно следует проконсультироваться с врачом.

Взрослым и детям в возрасте старше 14 лет препарат назначать в дозе в 1-й день — 100 мг (2 таблетки) 3 раза в сутки, на 2- и 3-й день — 100 мг (2 таблетки) 2 раза в сутки, на 4- и 5-й день — 100 мг 1 раз в сутки. В 1-й день заболевания возможно применение препарата в дозе 3 таблетки 2 раза в сутки или 6 таблеток за 1 прием.

Детям в возрасте 11–14 лет препарат назначать в дозе 50 мг (1 таблетка) 3 раза в сутки, детям 7–10 лет — 50 мг (1 таблетка) 2 раза в сутки.

Продолжительность лечения — 5 дней.

Если состояние здоровья ухудшается либо не улучшается в течение 3 дней, следует проконсультироваться с врачом.

Профилактика гриппа. Взрослым и детям в возрасте старше 7 лет препарат назначать в дозе 50 мг 1 раз в сутки. Продолжительность лечения — 10–15 дней.

Профилактика вирусного клещевого энцефалита. Применять препарат в дозе 100 мг (2 таблетки) 2 раза в сутки в течение 3 дней, в отдельных случаях — 5 дней.

Профилактику следует начинать сразу после укуса клеща, но не позднее, чем через 48 ч.

В отдельных случаях (группах риска, участникам походов в лесной местности, при проживании в палатках) взрослым допустима профилактика клещевого энцефалита в дозе 1 таблетка 2 раза в сутки в течение 15 дней.

повышенная чувствительность к соединениям группы адамантана и другим компонентам препарата, острые заболевания печени, острые и хронические заболевания почек, тиреотоксикоз.

обычно побочные эффекты исчезают после окончания приема препарата.

Со стороны сердечно-сосудистой системы: сердцебиение, АГ, церебрососудистые нарушения, сердечная недостаточность, отеки, нарушения проводимости сердца (блокады), тахикардия, обмороки; у лиц пожилого возраста с АГ повышается риск развития геморрагического инсульта.

Со стороны нервной системы: головная боль, головокружение, тремор, атаксия (нарушение координации движений), гиперкинез (спонтанные движения), судороги, бессонница, чрезмерная утомляемость, сонливость, нарушение концентрации внимания, спутанность сознания, повышенная возбудимость, нервозность, беспокойство, депрессия, эйфория, галлюцинации.

Со стороны органов чувств: изменение/потеря вкуса, паросмия, шум в ушах.

Со стороны дыхательной системы, органов грудной клетки и средостения: кашель, одышка, бронхоспазм.

Со стороны иммунной системы, кожи и подкожной клетчатки: кожная сыпь, зуд, бледность кожи, крапивница.

Со стороны пищеварительной системы: диспепсия, тошнота, рвота, сухость во рту, боль в животе, диарея, анорексия.

Другие: галакторея, обострение сопутствующих хронических заболеваний.

максимальный терапевтический эффект достигается при применении препарата в первые 2 дня от начала заболевания.

Препарат назначают с осторожностью лицам с заболеваниями ЖКТ, нарушениями функции печени, тяжелыми заболеваниями сердца и нарушениями сердечного ритма, лицам пожилого возраста. В этих случаях рекомендуется снижение дозы препарата.

При наличии в анамнезе эпилепсии и проведения противосудорожной терапии на фоне применения римантадина повышается риск развития эпилептического приступа. В этом случае дозу препарата следует снизить до 100 мг/сут. Если развивается приступ, прием препарата прекращают.

Возможно появление резистентных к препарату вирусов.

В период лечения следует воздержаться от употребления алкогольных напитков, поскольку при этом могут возникнуть нежелательные побочные эффекты со стороны ЦНС.

Препарат содержит лактозу, поэтому пациентам с редкими наследственными формами непереносимости галактозы, недостаточностью лактазы или синдромом глюкозо-галактозной мальабсорбции нельзя применять препарат.

Применение в период беременности и кормления грудью. Препарат не применять в период беременности. При необходимости применения препарата кормление грудью следует прекратить.

Дети. Препарат применяют у детей в возрасте от 7 лет.

Способность влиять на скорость реакции при управлении транспортными средствами или работе с другими механизмами. При применении препарата следует воздерживаться от управления транспортными средствами и работы с потенциально опасными механизмами.

средства, ощелачивающие мочу (ацетазоламид, натрия гидрокарбонат), циметидин повышают эффективность римантадина.

Средства, закисляющие мочу (аммония хлорид, аскорбиновая кислота), парацетамол, ацетилсалициловая кислота, снижают эффективность римантадина.

Римантадин снижает эффективность противоэпилептических средств и усиливает возбуждающий эффект кофеина.

симптомы: повышенное слезотечение, учащение мочеиспускания, лихорадка, озноб, ажитация, запор, повышенное пототделение, дисфагия, стоматит, гипестезия, боль в глазах.

Лечение: промывание желудка, симптоматическая терапия, меры по поддержанию жизненно важных функций организма. Римантадин частично выводится при гемодиализе.

в оригинальной упаковке при температуре не выше 25 °С.

Дата добавления: 01.04.2021 г.

Вопросы вирусологии №3 2010 стр. 19

Вопросы вирусологии №3 2010

*И. А. Ленева1, И. Т. Федякина2, М. Ю. Еропкин3,
Н. В. Гудова1, А. А. Романовская4, Д. М. Даниленко3,
С. М. Виноградова1, А.  Ю. Лепешкин1, А. М. Шестопалов4

1Центр химии лекарственных средств —
ВНИХФИ, 2НИИ вирусологии им. Д. И. Ивановского РАМН, Москва;
3ГУ НИИ гриппа РАМН, Санкт-Петербург; 4ФГУН ГНЦ ВБ
«Вектор» Роспотребнадзора Новосибирской обл.


Контактная информация:

*Ленева Ирина
Анатольевна, д-р биол. наук, зав. лаб.; e-mail: [email protected] 119815,
Москва, ул. Зубовская, д. 7, стр. 1.

Изучение противовирусной активности отечественных
противогриппозных химиопрепаратов в культуре клеток и на модели животных

Изучение противовирусной активности российских препаратов в культуре
клеток показало, что арбидол и рибавирин подавляли размножение различных
штаммов вирусов гриппа A, включая римантадинрезистентные и
озельтамивиррезистентные, а также вирусов гриппа B (концентрации препаратов,
ингибирующие размножение вируса на 50% (ИК50) составляли 2—8,5
мкг/мл). Римантадин в концентрации 1—5 мкг/мл полностью ингибировал
репродукцию эталонных и озельтамивиррезистентного штаммов вируса гриппа A,
не влияя на размножение вирусов гриппа B, римантадинрезистентных вирусов
гриппа A. Арбидол и рибавирин также подавляли репродукцию пандемических
вирусов A/California/04/2009(h2N1), A/California/07/2009(h2N1) и
A/Moscow/01/2009(h2N1) swl в культуре клеток MDCK (ИК50 — 1,5—4,0
мкг/мл), в то время как римантадин не влиял на их размножение. Нами не
выявлено какой-либо значительной противовирусной активности ингавирина в
культуре клеток в нетоксичных для них концентрациях (до 200 мкг/мл) в
отношении всех изученных штаммов вирусов гриппа A и B, включая штаммы
пандемического вируса гриппа A(h2N1).
На модели гриппозной пневмонии у мышей, инфицированных адаптированным к ним
вирусом гриппа A/Аичи/2/69(h4N2), вы явлена активность арбидола, римантадина
и ингавирина. Профилактическая эффективность трех изученных препаратов была
сходной и наиболее выраженной при использовании их за 96 ч: предотвращена
смертность 40—50% животных и потеря их массы тела, увеличилась
продолжительность жизни в 1,3—1,5 раза. Арбидол и римантадин были более
эффективны при лечебном и лечебно-профилактическом использовании в дозах 30
и 10 мг/кг/день соответственно, защищая от гибели 60—80% инфицированных
животных, увеличивая продолжительность их жизни в 1,7—2 раза и предотвращая
потерю массы тела по сравнению с группой вирусного контроля. Эффективность
ингавирина в этих же опытах была менее выражена, чем у арбидола и
римантадина. Таким образом, арбидол и римантадин обладают выраженной
противовирусной активностью как в культуре клеток, так и на модели
гриппозной пневмонии. Выявленная эффективность ингавирина на интегральной
модели гриппозной пневмонии мышей при отсутствии активности в культуре
клеток, вероятно, обусловлена не прямым вирусспецифическим действием, а
иными фармакологическими свойствами препарата.

Ключевые слова:  вирусы гриппа, пандемический вирус
гриппа A(h2N1), арбидол, римантадин, ингавирин, рибавирин, вирусингибирующая
активность в культуре клеток, гриппозная пневмония мышей

ЛИТЕРАТУРА1. Бурцева Е. И., Шевченко Е. С., Ленева И. А. и др.
Чувствительность к римантадину и арбидолу вирусов гриппа, вызвавших
эпидемические подъемы заболеваемости в России в сезоне 2004—2005 г. // Вопр.
вирусол. — 2007. — № 2. — С. 24—29.

2. Гуськова
Т. А., Глушков Р. Г.
Арбидол-иммуномодулятор, индуктор интерферона,
антиоксидант. — М., 1999. — С. 93.

3. Колубухина
Л. В., Меркулова Л. Н., Щелканов М. Ю.
и др. Эффективность ингавирина
при лечении гриппа у взрослых // Тер. арх. — 2009. — Т. 81, № 3. — С. 51—54.

4. Ленева И. А.,
Гуськова Т. А.
Арбидол — эффективный препарат для лечения и профилактики
гриппа и ОРВИ: обзор результатов клинических исследований // Рус. мед. журн.
— 2008. — Т. 16, № 29. — С. 1972—1976.

5. Логинова
С. Я., Борисевич С. В., Максимов В. А.
и др. Изучение лечебной
эффективности нового отечественного препарата ингавирина в отношении
возбудителя гриппа A(h4N2) // Антибиотики и химиотер. — 2008. — Т. 53,
№ 7—8. — С. 29—30.

6. Логинова
С. Я., Борисевич С. В., Лыков М. В.
и др. Изучение эффективности
ингавирина in vitro в отношении мексиканского пандемического подтипа HINI
вируса гриппа A/ штамма A/California/04/2009 и A/штамма A/California/07/
2009 // Антибиотики и химиотер. — 2009. — Т. 54, № 3— 4. С. 15—20.

7. Львов Д. К.,
Бурцева Е. И., Прилипов А. Г.
и др. Изоляция 24.05.2009 и депонирование
в Государственную коллекцию вирусов (ГКВ № 2452 от 24.05.2009) первого
штамма A/ Moscow/01/2009(h2N1)sw1, подобного свиному вирусу A(h2N1) от
первого выявленного 21.05.2009 больного в г. Москве // Вопр. вирусол. —
2009. — Т. 54, № 6. — С. 10— 14.

8. Методические
указания по изучению специфической противовирусной активности
фармакологических веществ: Руководство по экспериментальному
(доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред. Р. У.
Хабриева. — М., 2005. — С. 532—557.

9. Романовская
А. А., Дурыманов А. М., Шаршов К. А.
и др. Изучение чувствительности
вирусов гриппа A(h2N1), вызвавших заболевания в апреле—мае 2009 года, к
противовирусным препаратам в культуре клеток MDCK // Антибиотики и химиотер.
— 2009. — Т. 54, № 5—6. — С. 41—47.

10. Assay Guidance
Manual. http://www/ncgc.nih.gov/guidance/ section2.html.

11. Boriskin Y.,
Leneva I., Pecheur E.
et al. Arbidol: a broad-spectrum antiviral
compound that bloks viral fusion // Curr. Med. Chem. — 2008. — Vol. 15. —
P. 997—1005.

12. Glushkov
R. G.
Arbidol. Antiviral, immunostimulant, interferon inducer // Drug of
the Future. — 1992. — Vol. 17. — P. 1079— 1081.

13. Hayden F.
WHO guidelines on the use of vaccines and antivirals during influenza. –
Annex 5-Considerations for the use of antivirals during an influenza
pandemic, Geneva, 2—4 October, 2002.

14. Leneva I. A.,
Russell R. J., Boriskin Y. S.
et al. Characteristics of
arbidol-resistant mutants of influenza virus: implications for the mechanism
of anti-influenza action of arbidol // Antiviral Res. — 2009. — Vol. 81. —
P. 132—140.

15. Monto A.
Viral susceptibility and the choice of influenza antivirals // Clin. Infect.
Dis. — 2008. — Vol. 47. — P. 346—348.

16. Shi L., Xiong
H., He J.
et al. Antiviral activity of arbidol against influenza A
virus, respiratory syncytial virus, rhinovirus, coxsackie virus and
adenovirus in vitro and in vivo // Arch. Virol. — 2007. — Vol. 152. —
P. 1447.

17. Update: drug
susceptibility of swine-origin influenza A(h2N1) viruses, April 2009.
Centers for Disease Control and Prevention (CDC) // MMWR Morb Mortal Wkly
Rep. 2009. — Vol. 58. — P. 433—435.

18. Wang M., Cai
B., Li L.
et al. Efficacy and safety of arbidol in treatment of
naturally acquired influenza // Zhongguo Yi Xue Ke Xue Yuan Xue Bao. — 2004.
— Vol. 26. — P. 289—293.

19. Watanabe W.,
Konno K., Ijichi K.
et al. MTT colorimetric assay system for the
screening of anti-orthomyxo- and anti-paramyxoviral agents // J. Virol.
Meth. — 1994. — Vol. 48, N 2— 3. — P. 257—265.

20. Zlydnikov
D. M., Kubar O. I., Kovaleva T. P.
et al. Study of rimantadine in the
USSR: a review of the literature // Rev. Infect. Dis. — 1981. — Vol. 3. —
P. 408—421.

Изучение влияния ремантадина, рибавирина и триазавирина на репродукцию вирусов гриппа а в монослойных и лимфобластоидных клеточных линиях человеческого происхождения Текст научной статьи по специальности «Фундаментальная медицина»

Изучение влияния peмaнтaдинa, pM6aeMpMHa и rpMa3aeMpMHa Ha peпpoдукцию snipY’coe rpnnna А в мoнocлoйныx и лимфoблacтoидныx клeтoчныx линия\ чeлoвeчecкoгo пpoиcxoждeния

Т. Д. СМИРНОВА, Д. М. ДАНИЛЕНКО, M. Ю. ЕРОПКИН, Э. Г. ДЕЕВА, О. И. КИСЕЛЕВ

НИИ гриппа Минздравсоцразвития РФ, Санкт-Петербург

Influence of Rimantadine, Ribavirine and Triazavirine on Influenza A Virus Replication in Human Monolayer and Lymphoblastoid Cell Lines

T. D. SMIRNOVA, D. M. DANILENKO, M. YU. EROPKIN, E. G. DEEVA, O. I. KISELEV

Research Institute of Influenza, St. Petersburg

Изучено влияние противовирусных препаратов — ремантадина, рибавирина и триазавирина на репродукцию вирусов гриппа в клеточных линиях человека. Показано, что все исследуемые препараты подавляют синтез de novo вирусного нуклео-протеина НП. Наибольший эффект отмечен для рибавирина на клетках карциномы лёгкого А-549 и эндотелиальной линии ECV-304. Окрашивание красителем Hoechst-33258 обнаруживало при этом индукцию апоптоза во всех исследуемых линиях. Ремантадин и триазавирин оказывали ингибирующее воздействие на вирус-индуцированный апоптоз, в то время как рибавирин усиливал апоптоз в инфицированных клетках. Этот эффект проявлялся как в монослойных, так и в суспензионных клеточных линиях. Описано воздействие противовирусных препаратов на вирус-индуцированную пролиферацию суспензионных клеточных культур.

Ключевые слова: вирус гриппа, клеточные культуры, апоптоз, стимуляция пролиферации, противовирусные препараты.

The influence of antivirals, such as rimantadine, ribavirine and triazavirine on influenza virus replication in human cell cultures was evaluated. All the antivirals inhibited viral nucleoprotein NP synthesis. The strongest effect was shown for ribavirine in lung carcinoma A-549 cells and endothelial ECV-304 cells. Hoechst-33258 staining revealed induction of apoptosis in all the cell lines. Rimantadine and ribavirine inhibited virus-induced apoptosis while ribavirine enhanced it. The effect was registered in monolayer cell cultures as well as in suspension cell cultures. The influence of the antiviral drugs on the virus-induced cell proliferation in the suspension cell cultures is also described.

Key words: influenza virus, cell cultures, apoptosis, proliferation stimulation, antivirals.

Введение

В связи с появлением нового подтипа пандемического вируса гриппа A(h2N1)v остается актуальным вопрос о рекомендации антивирусных препаратов для лечебного и профилактического применения. Хотя все штаммы пандемического гриппа являются ремантадинорезистентными in vitro и генетически характеризуются мутациями в гене, кодирующем М2 белок, приводящими к такому фенотипу, в клинической практике существуют противоречивые данные об эффективности применения ремантадина в качестве противовирусного препарата при лечении гриппа, что требует проведения отдельных исследований.

Традиционный метод оценки противовирусной активности препаратов заключается в проверке их

© Коллектив авторов, 2011

Адрес для корреспонденции: 197376 Санкт-Петербург, ул. профессора Попова, 15/17. НИИ гриппа

действия на выживаемость белых мышей. Предварительно проводится скрининг исследуемых препаратов в монослойной перевиваемой клеточной линии почки собаки (MDCK) с целью определения цито-токсической и антивирусной доз препарата. Следует отметить, что существуют препараты, которые не демонстрируют антивирусной активности in vitro, однако в условиях in vivo оказываются эффективными.

Наши исследования по репродукции вирусов гриппа А в перевиваемых клеточных линиях, происходящих из гемобластозов человека, показали, что вирусы гриппа А при низких дозах заражения оказывали стимулирующее воздействие на пролиферацию данных клеточных линий, а также эффективно индуцировали апоптоз [1]. 4,5

А/Свинья1976/31 (h2N1) 5,0

Примечание. * — ремантадинорезистентные штаммы.

В задачу нашего исследования входило изучение воздействия трёх препаратов — ремантадина, рибавирина и триазавирина — на репродукцию вирусов гриппа А в монослойных и суспензионных клеточных линиях человека in vitro, а также оценка воздействия данных препаратов на стимулированную вирусом гриппа пролиферацию клеток и вирус-индуцированный апоптоз.

Материал и методы

Вирусы гриппа. В работе использованы вирус гриппа птиц подтипа H5N1 А/Курица/Курган/5/05; вирус «классическо-го»гриппа свиней подтипа h2N1 А/Свинья/1976/31; вирусы гриппа человека подтипа h2N1v (пандемического гриппа) А/Калифорния/07/09, А/С.-Петербург/05/09, подтипа h2N1 (сезонного гриппа) А/Брисбен/59/07 и вирус гриппа подтипа h4N2 А/Брисбен/10/07 из музея вирусов гриппа ФГБУ НИИ гриппа Минздравсоцразвития РФ.

Вирусы поддерживали заражением в аллантоисную полость 9—11-дневных куриных эмбрионов. Через 48—72 ч аллантоисную жидкость собирали, разливали на аликвоты и замораживали на -70°С. Титры вирусов определяли в клетках MDCK по цитопатическому действию и в РГА с эритоцитами кур [2].

Клеточные линии. В работе использовали клеточные линии из Коллекции клеточных линий НИИ гриппа. Моно-слойные клеточные линии — А-549 (перевиваемая линия клеток карциномы лёгкого человека), ECV-304 (перевиваемая линия клеток эндотелия человека) и ФЛЭЧ (диплоидные фибробласты лёгких эмбриона человека) пересевали на 6—7 сутки в среде альфа МЕМ с добавлением 2% фетальной эмбриональной сыворотки коров (ф. с.). Суспензионные перевиваемые клеточные линии человека — Jurkat (Т-лимфоблас-ты), NC-37 (В-лимфобласты) и U-937 (гистиоцитарная лимфома) пересевали каждые 5—7 сутки в среде RPMI-1640 с добавлением 2% ф. с. Все клеточные линии культивировали без антибиотиков. Питательные среды и сыворотки получали в фирме «БИОЛОТ» (Санкт-Петербург).

Заражение монослойных клеточных линий. Заражение монослойных культур вирусами гриппа проводили стандартным методом, как описано ранее [3]. Инфекционную дозу заражения рассчитывали исходя из титров инфекционной активности вирусов в культуре клеток MDCK.

Заражение суспензионных клеточных линий. Для изучения влияния вируса на пролиферацию клеток и индукцию апоп-тоза заражение суспензионных клеток вирусом проводили, как описано ранее [1].

Определение апоптоза. Определение индекса апоптоза проводили стандартным методом окрашивания ядер красителем Hoechst-33258 с последующим подсчётом нормальных и деградирующих ядер в 10 полях зрения, который описан в работе [1].

Метод иммунофлуоресценции (МФА) с применением моноклональных антител (МКА). Использовали непрямой МФА с МКА к нуклеопротеину (НП) вируса гриппа, полученными в

6,3 3,4 6,8

3,0 3,0 6,0

4,0 4,2 6,2

4,5 3,2 5,0

4,5 3,0 4,5

4,5 3,0 5,0

ФГБУ НИИ гриппа Mинздравсоцразвития РФ, как описано в работе [3].

Aнтивиpуcныe npenaparu. В работе использованы три антивирусных препарата: ремантадин (Sigma, Германия), риба-вирин (ICN, США), триазавирин (получен из института органического синтеза Уральского отделения РАН)[4].

Цитотоксическое действие и противовирусную активность препаратов оценивали методами, приведёнными в работе [3]. /СД мл на клетках эндотелиального происхождения и не более 2 lg TЦД50/0,1 мл на клетках карциномы лёгкого и фибробластах лёгкого). При этом репродукция вирусов гриппа свиней и вирусов пандемического гриппа во всех трёх культурах была или очень низкой (не более 1 lg TЦД50/0,1 мл), или же признаков цитопатического действия (ЦПД) и гемагглютинации не отмечалось.

Поскольку инфекционная активность вирусов гриппа в культурах клеток человека была низкой, предварительная оценка противовирусного действия препаратов была проведена на модельной культуре MDCK (табл. 1). По результатам тестирования было подтверждено, что вирусы пандемического гриппа (h2N1)v и вирус А/Брисбен/10/07 (h4N2) резистентны к ремантадину. Вирусы гриппа птиц (A/H5N1), свиней (A/h2N1) и сезонные вирусы гриппа человека (A/h2N1) чувствительны к ремантадину (10 мкг/мл). Все тестируемые вирусы чувствительны к рибавирину (100 мкг/мл), однако данный препарат обладал более слабой противовирусной активностью по сравнению с ремантадином. Tриазавирин (50 мкг/мл) in vitro не подавлял репродукцию ни одного из тестируемых

а

б

г

Рис. 1. Иммунофлюоресцентное окрашивание клеток ФЛЭЧ с использованием МКА против НП вируса гриппа.

а — контроль клеток; б—свечение ядра; в — свечение цитоплазмы; г —свечение ядерной мембраны.

вирусов, хотя его противовирусное действие in vivo описано в литературе [4].

В работе изучали синтез и распределение вирусного белка НП в клетках человека с помощью моноклональных антител, полученных к НП вируса гриппа А (h4N2), которые вследствие консервативности нуклеопротеина селективно и с высокой аффинностью связываются с НП разных субтипов вируса гриппа А и поэтому используются в диагностических наборах.

Во всех клетках человека (диплоидные фибробла-сты, пневмоциты и эндотелий) через 20—21 час после заражения клеток высокими дозами всех исследуемых вирусов (100—1000 доз) отмечался достаточно заметный уровень синтеза НП всех вирусов. Позднее появлялись признаки цитотоксического действия вирусов в виде разрежения монослоя. Специфическое свечение НП вируса гриппа А отмечалось в эти сроки, в основном, в цитоплазме, (степень свечения в пределах 30—50%), реже светились ядра клеток и очень редко наблюдалось перинуклеарное свечение в виде ободка ядерной мембраны, что указывает на то, что транслокация НП из ядра в цитоплазму в этот период времени уже произошла (рис. 1).

Как свидетельствуют данные приведённые в табл. 2, в клетках А-549 и ECV-304 ремантадин оказывал заметное ингибирующее действие на синтез НП практически всех вирусов, о чем свидетельствует подавление свечения цитоплазмы (за исключением ремантадиноустойчивого вируса пандемического гриппа А/СПб/5/09 в клетках А-549). В клетках ФЛЭЧ ремантадин подавлял синтез НП чувствительных вирусов, но не влиял на устойчивый к ремантадину вирус А/Калифорния/07/09 (h2N1)v и слабочувствительный вирус А/Свинья/1976/31 (h2N1), хотя свечение цитоплазмы в клетках, заражённых устойчивым к ремантадину вирусом А/СПб/5/09 (h2N1)v, было снижено.

В клетках А-549 и ECV-304 в присутствии ри-бавирина наблюдалось не только снижение свечения цитоплазмы, но и наличие ядерного и пе-ринуклеарного свечения, что свидетельствует о подавлении транслокации вирусных НП из ядра в цитоплазму. В клетках ФЛЭЧ рибавирин очень слабо подавлял свечение НП пандемических вирусов А/Калифорния/07/09 и А/СПб/5/09, и не отмечено влияния рибавирина на синтез НП вирусов гриппа птиц (А/ШШ/Курица/Кур-ган/5/05) и свиней (А/ШШ/Свинья/1976/31).

Действие триазавирина было сходным во всех клеточных линиях при заражении всеми вирусами и проявлялось, в основном, в снижении транслокации НП, о чем свидетельствует свечение ядер, и изредка перинуклеарного пространства, при одновременном незначительном подавлении свечения в цитоплазме.

Таким образом, было показано, что ремантадин оказывал ингибирующее действие на синтез и

транслокацию НП не только чувствительных к нему вирусов гриппа (А/НШ1/Брисбен/59/07, А/Н5М/ Курица/Курган/5/05), но и устойчивых, к которым относятся вирусы свиного происхождения. Подобный эффект отмечен и по отношению к триазавири-ну, который при отсутствии ингибирующего действия в отношении ЦПД и ГА всех вирусов, показанного на клетках МБСК, также оказывал заметное подавление на синтез и распределение НП.

Наиболее сильно ингибирующее действие ремантадина и рибавирина проявилось в клетках А-549 и ЕСУ-304, наименьший эффект проявлялся в клетках ФЛЭЧ, тогда как действие триазавири-на было сходным во всех клеточных линиях. Следует отметить тот факт, что ингибирующее действие рибавирина и триазавирина проявлялось не только в виде подавления общего свечения клетки, но и в виде задержки перехода НП из ядра в цитоплазму, на что указывало свечение ядра или перинуклеарное свечение в виде ободка (табл. 1-33258 обнаруживало индукцию деградации хроматина (апоптоз), который наиболее ярко проявлялся в клеточной линии пневмоцитов человека А-549. Определение апоптоза в этой клеточной линии, заражённой исследуемыми вирусами, показало активное влияние всех препаратов на этот процесс. Ремантадин и триазавирин проявили ингибирующее действие на индукцию вирусами апоптоза , тогда как рибавирин, наоборот, значительно усиливал апоптоз в заражённых вирусами клетках А-549 (рис. 2).

Суспензионные гемобластоидные клеточные линии. Как было показано нами ранее, все исследуемые вирусы гриппа А при очень низких дозах заражения (1—10 доз) обладали способностью

Рис. 2. Влияние противовирусных препаратов на индукцию апоптоза вирусами гриппа А в клеточной линии А-549.

Примечание. Контроль — клетки, заражённые вирусом гриппа, без препаратов; [Рт — в присутствии ремантадина в среде; [РЬ — в присутствии рибавирина в среде; Те — в присутствии триазавирина в среде.

1 Р

* и

и

н -с О ш

=■ а: лаз ие.

ы И

н н

ш

7 |

с

ы 3

и е м-| т о

с л оо аз

тв зм

00 Ь

П> Е

т;

в Д

оо

П> «О

н °

о

и /

* Н

п

ГО

П> I

е =

I

33

П>

тз у 5 5

ь тз а

ш о 2 п> с

.

П>

П>

I

;

Ц

+

+

+

Ц

+

,

Ц

+

о

м

а

а

С

П

х

а

и

ф

о

р

а

X

С

5

Ч

ДЦ Ч РЧ

.

у

р

а

а

/

уу

р

3

а

X

2

С

5

Ч

СП

р

а

о

сл

си

а

Ц+++ Ц++ Ц—- Ц+++ * 1 реман- тадин

Ц+++ ЯДРО Ц+++ ЯДРО П/Н Ц+++ /++ = + Ц+++ ЯДРО рибави- рин

ДЦ 0 + Ц+ ЯДРО Ц+ ЯДРО ^Ц^ О + * Ц+ ЯДРО триаза- вирин

Ц ЦПДЦ

и . «Я р Ч О .

с

Ч

/Ц /Ц Х+ Я +

ЬЧ

Д.

тз

О

ЬЧ

Д.

ч

о

ЬЧ

Д.

ч

о

Ц++ ЯДРО П/Н Ц+++ реман- тадин

— щ ! Д 1 рибави- вирин

Ц+ ЯДРО П/Н Ц+ триаза- вирин

я

5 а

я ОХ

и И я и

*0 б и

о

о

ч -8л ё

о

к ё а а т

0)

I

0)

2.

В

I

Л>

а

I

ч

И

«Л

у

п

I

х

п

■п

л>

ш

■п

ш

4 о и н ш л

0 * ш

ы

ш

■Е

5 в «Л у

п

1 О

СП

л>

*

ш

Н

=1

Таблица 3. Влияние ремантадина, рибавирина и триазавирина на пролиферацию и апоптоз гемобластоид-ных клеток человека, заражённых вирусами гриппа А

Вирус гриппа А Пролиферация клеток (% от контроля) Индекс апоптоза

без препарата Rm Rb Tz без препарата Rm Rb Tz

Jurkat

А/Брисбен/10/07 152+7,2 102+3,2 89+4,7 131+5,3 29+1,2 17+1,0 39+2,3 18+1,0

А/Брисбен/59/07 142+8,6 116+4,1 118+7 107+6,7 25+0,9 19+0,9 29+2,5 15+1,3

А/С.Петербург/5/09 157+6,9 128+8,9 118+11,3 112+5,6 30+2,1 14+0,6 41+2,2 14+0,8

А/Калифорния/7/09 152+5,3 147+5,9 84+3,4 107+5,9 32+2,5 19+1,7 43+1,9 20+1,5

А/Свинья/1976/31 196+9,1 81+6,7 93+5,4 NC-37 142+9,3 35+1,8 14+1,3 39+2,1 16+1,1

А/Брисбен/10/07 144+7,3 102+8,2 106+7,6 96+7,6 27+2,2 6+0,2 42+2,5 5+0,4

А/Брисбен/59/07 135+3,6 109+9,8 108+6,3 111+8,4 9+0,7 5+0,3 27+1,3 1,7+0,1

А/С.Петербург/5/09 168+4,9 118+4,7 108+9,9 119+8,6 22+1,2 5+0,8 40+3,6 4+0,3

А/Калифорния/7/09 136+4,1 96+4,9 93+5,3 116+7,2 25+1,6 8+0,7 36+2,7 9+0,3

А/Свинья/1976/31 155+6,4 101+6 108+7,1 U-937 113+9,1 21+0,8 9+0,4 29+1,7 6+0,2

А/Брисбен/10/07 323+19,7 153+13,8 189+11,3 319+20,7 29+2,3 8+0,5 39+3,1 7+0,2

А/Брисбен/59/07 267+16 210+12,1 222+15,2 269+21,6 25+1,5 6+0,5 38+1,5 9+0,6

А/С.Петербург/5/09 313+14,9 256+21,8 203+16,2 315+22 31+1,9 4+0,2 35+2,8 7+0,6

А/Калифорния/7/09 221+15,4 105+4,7 169+9,8 207+16,6 19+1,1 3+0,3 28+1,7 4+0,2

А/Свинья/1976/31 296+14,8 203+15,4 211+10,6 284+25,6 26+1,2 8+0,6 42+3,5 6+0,4

Примечание. Сокращения см. в рис. 2.

стимулировать пролиферацию клеток гемобласто-зов и индуцировать в них апоптоз, с незначительными отличиями в степени воздействия, в зависимости от субтиповой и штаммовой принадлежности [1].

В наших опытах вирусы гриппа А/Брисбен/59/07 (h2N1) и А/СПб/05/09 (h2N1)v показали сходную активность в отношении стимуляции пролиферации и индукции апоптоза в клетках Jurkat, NC-37 и U-937.

Все три исследуемых препарата — ремантадин (10 мкг/мл), рибавирин (50 мкг/мл) и триазавирин (25 мкг/мл) оказывали заметное ингибирующее воздействие на стимулированную вирусами в этих клетках пролиферацию и апоптоз. Исключением явились моноцитарные клетки гистиоцитарной лимфомы U-937, стимулированную вирусами пролиферацию которых не подавлял триазавирин. Ремантадин и триазавирин подавляли вирус-индуци-рованный апоптоз во всех клеточных линиях, в то время как рибавирин его усиливал (табл. 3) также, как и в монослойных клеточных линиях.

Обсуждение результатов

Полученные данные свидетельствуют о том, что исследованные нами препараты, как в случае резистентности к ним вирусов, так и не обнаруживших противовирусной активности при исследовании in vitro на клетках MDCK, проявляют ингибирующие (или стимулирующие) эффекты при использовании других клеточных тест-систем.

Это проявлялось, прежде всего, в подавлении синтеза НП и его транслокации из ядра в цитоплазму. Следует отметить, что очень многие факторы способны повлиять на синтез и распределение этого вирусного белка. После проникновения вируса в клетку и освобождения в эндосоме от поверхностных белков, происходит быстрый переход вирусно-

го рибонуклеопротеина (vRNP) из цитозоля в нук-леоплазму через ядерные поры, где происходит репликация геномных сегментов и синтез вирус-специ-фических мРНК [5]. Вирусный НП и белки полимеразы синтезируютя de novo в цитоплазме, а затем транспортируются в клеточное ядро, где они собираются в рибонуклеопротеин, который позже транслоцируется в цитоплазму для последующей сборки вирусных частиц на клеточной мембране и выхода из клетки путём почкования. На ядерную и цитоплазматическую локализацию нуклеопротеина влияют многочисленные факторы и, прежде всего, этот процесс регулируют сигналы, находящиеся в самом НП [6—8], сигналы ядерного экспорта в вирусном белке NEP (NS2) и вирусный белок M1 [6—8]. Кроме этого, влияние на транслокацию НП оказывает плотность монослоя заражённых клеток и активность клеточных протеинкиназ [9], способность НП и рибонуелеопротеина образовывать комплексы с актиновыми филаментами цитоскелета [10], а импорт белка из цитоплазмы в ядро зависит от степени конформационной зрелости вновь синтезируемого НП [11]. Подобная система сигналов и факторов, регулирующих ядерно-цитоплазменный транспорт НП, его взаимоотношение как с вирусными, так и с клеточными белками в процессе инфекционного цикла, представляет целый комплекс факторов, которые могут быть мишенями воздействия противовирусных препаратов.

Другой эффект, оказываемый исследуемыми препаратами, это влияние на индуцируемый вирусами апоптоз в заражённых клетках. Нами показано, что ремантадин и триазавирин подавляли апоптоз, в то время как рибавирин его значительно усиливал. Хорошо известно, что соединения адамантана, блокирующие раздевание вируса, ингибируют вирус-индуцированный апоптоз [12].

Механизм антивирусного действия рибавирина заключается во внутриклеточном превращении препарата в рибавирин-5-фосфат, ингибирующий активность инозин-5-монофосфатдегидрогеназы, а также в уменьшении количества ксантозин-моно-фосфата и гуанозин-монофосфата в инфицированных клетках. Это приводит к торможению синтеза ксантозиловой кислоты и, в свою очередь, угнетает синтез РНК и ДНК на стадии репликации [13]. Такое влияние препарата на состав пула пуриновых нуклеозидов сопровождается не только прекращением репродукции вируса [14], но и влиянием на метаболизм клетки-хозяина, что выражается в ин-гибиции вирус-индуцированой пролиферации клеток и стимуляции апоптоза в заражённых вирусом клетках. Как известно, рибавирин является мощным индуктором апоптоза в раковых клетках и рассматривается некоторыми авторами как потенциальный противоопухолевый препарат [15].

Данные по воздействию триазавирина на апоптоз в литературе пока не встречаются, однако наши эксперименты показывают, что этот препарат обладает ингибирующим воздействием в отношении вирусов гриппа А, индуцирующих апоптоз.

Учитывая тот огромный вклад, который вносят Т- и В-лимфоциты, моноциты другие клетки крови в патогенез заболеваний, вызываемых вирусами гриппа А, нами был разработан методический подход, позволяющий оценить еще одну сторону взаимоотношений вируса гриппа А и клеток гемоблас-тозов: это стимулирующий эффект, производимый заражением низкими дозами вируса на пролиферацию клеток и индукцию в них апоптоза [1].

Изучение воздействия антивирусных препаратов также обнаружило влияние на эту сторону взаимодействия вирусов и гемобластоидных клеток, которое, в основном, выражалось в ингибиции стимулированной вирусом пролиферации клеток и

ЛИТЕРАТУРА

1. Смирнова Т. Д., Гудкова Т. М., Кузнецова И. К., Рыжак Г. А. Разработка модели взаимоотношения вируса гриппа А с перевиваемыми лимфобластоидными клетками человека для изучения биологических особенностей вируса и определения активности антивирусных препаратов. Инф бюллетень «Клеточные Культуры». СПб.: 2009; Выпуск 24: 25—34.

2. Соминина А. А., Бурцева Е. И., Коновалова Н. И. и др. Выделение вирусов гриппа в клеточных культурах и куриных эмбрионах и их идентификация. Метод реком. М.: 2006; 24.

3. Ленева И. А., Федякина И. Т., Еропкин М. Ю. и др. Изучение противовирусной активности отечественных противогриппозных химиопрепаратов в культуре клеток и на модели животных. Вопр вирусол 2010; 55: 3: 19—27.

4. Karpenko I., Deev S., Kiselev O. et al. Antiviral properties, metabolism, and pharmacokinetics of a novel azolo-1,2,4-triazine-derived inhibitor of influenza A and B virus replication. Antimicrob Agents Chemother 2010; 54: 2017—2022.

5. Bouvier N. M., Palese P. The biology of influenza viruses. Vaccine 2008; 26: D49-D53.

6. Bullido R., Gomes-Puertas P., Albo C., Portella A. Several protein regions contribute to determine the nuclear and cytoplasmic localization of the influenza A virus nucleoprotein. J Gen Virol 2000; 81: 135—142.

индуцируемого в них апоптоза. Исключением явились клетки, имеющие происхождение из моноцитов, на стимулированную вирусом пролиферацию которых триазавирин не оказывал воздействия. Кроме этого, рибавирин, как и в монослойных клеточных линиях, усиливал индуцированный вирусом апоптоз клеток гемобластозов.

Заключение

Полученные нами результаты могут иметь практическое значение, заключающееся в том, что все исследованные нами препараты могут вызывать положительный ингибирующий эффект, даже при высоких дозах инфекции клеток человека резистентными вирусами. Более того, ингибирующее действие препаратов не обязательно должно сопровождаться подавлением репродукции вируса на клетках MDCK, т. к. лежащие в основе их действия механизмы могут иметь другие мишени.

Разработанная нами клеточная модель на основе гемобластоидных клеток, основанная на стимулирующем действии низких доз вируса на пролиферацию и апоптоз клеток, только подтверждает опасность, вызываемую гриппозной инфекцией, даже в лёгкой форме, на возникновение лимфо-лейкозов и обострение после ремиссии. Исследуемые противовирусные препараты ремантадин и триазавирин способны оказать положительный эффект у подобных больных. Особенно интересен препарат рибавирин, значительно усиливающий апоптоз в заражённых вирусом гриппа клетках, что подтверждает его противоопухолевый эффект, описанный в литературе [15].

Полученные нами данные свидетельствуют о необходимости использования дополнительных тест-систем in vitro при исследовании противовирусных препаратов, которые могут обнаружить новые стороны взаимоотношений вируса и клетки.

7. Kao R. Y., Yang D., Lau L. S., Tsui W. H. et al. Identification of influenza A nucleoprotein as an antiviral target. Nat Biotechnol 2010; 28: 6: 600—605.

8. Kesley M., Ari H. Transport of incoming influenza virus nucleocapsids into the nucleus. J Virol 1991; 65: 1: 232—244.

9. Bui M., Meyers J., Whittaker G. Nucleo-cytoplasmic localisation of influenza virus nucleoprotein depends on cell density and phosphorylation. Virus Res 2002; 84: 37—44.

10. Digard P., Elton D., Bishop K. et al. Modulaition of nuclear localisation of the influenza virus nucleoprotein through interaction with actin filaments. J Virol 1999; 73: 3: 2222—2231.

11. Семенова H. П., Чумаков В. М., Григорьева Т. А., Прокудина Е. Н. Зависимость ядерного импорта полимеров нуклеопротеина вируса гриппа от их конформационного статуса. Вопр вирусол 2008; 53: 6: 21—24.

12. Morris S. J., Price G. E., Barnett J. M. Role of neuraminidase in influenza virus-induced apoptosis. J Gen Virol 1999; 80: 137—146.

13. Wrey S. K. Gilbert B. E., Knight V. Effect of ribavirin triphosphate on primer generation and elongation during influenza virus transcription in vitro. Antiviral Res 1985; 5: 39—48.

14. Gilbert B. E., Knight V. Biochemistry and clinical applications of ribavirin. Antimicrob Agents Chemother 1986; 30: 201—203.

15. Kokeny S., Papp J., Weber G. et al. Ribavirin acts via multiple pathways in inhibition of leukemic cell proliferation. Anticancer Res 2009; 29: 1971—1980.

Амантадин и римантадин для профилактики и лечения гриппа А у взрослых — Джефферсон, Т. — 2004

Предпосылки

Гидрохлорид амантадина и гидрохлорид римантадина обладают противовирусными свойствами, но эти препараты широко не используются из-за отсутствия информации об их потенциальной ценности и опасения по поводу возможных побочных эффектов.

Цели

Целью этого обзора было оценить эффективность и безопасность («эффекты») амантадина и римантадина у здоровых взрослых.

Методы поиска

Мы провели поиск в Кокрановском центральном регистре контролируемых исследований (CENTRAL) ( Кокрановская библиотека , выпуск 4, 2003 г.), MEDLINE (с января 1966 г. по 2 ноября 2003 г.), EMBASE (с января 1990 г. по сентябрь 2003 г.) и справочные списки статей. Мы также связались с производителями, исследователями и авторами.

Критерии отбора

Рандомизированные и квази-рандомизированные исследования, в которых сравнивали амантадин и / или римантадин с плацебо, контрольными противовирусными препаратами или отсутствием вмешательства, или сравнивали дозы или схемы приема амантадина и / или римантадина у здоровых взрослых.

Сбор и анализ данных

Для профилактических испытаний было проанализировано количество участников с клиническим гриппом (гриппоподобным заболеванием или ГПЗ), т. Е. Подтвержденным гриппом A, и побочными эффектами. Анализ клинических испытаний включал среднюю продолжительность лихорадки и продолжительность пребывания в больнице, а также количество побочных эффектов.

Основные результаты

Амантадин предотвратил 25% случаев ГПЗ (95% доверительный интервал (ДИ) от 13% до 36%) и 61% случаев гриппа A (95% ДИ от 35% до 76%).Амантадин снижал продолжительность лихорадки на один день (95% ДИ от 0,7 до 1,3). Римантадин продемонстрировал сопоставимую эффективность, но было меньше испытаний, а результаты профилактики не были статистически значимыми. И амантадин, и римантадин вызывали значительные побочные эффекты со стороны желудочно-кишечного тракта. Побочные эффекты со стороны центральной нервной системы и прекращение исследования были значительно более частыми при приеме амантадина, чем римантадина.

Выводы авторов

Амантадин и римантадин обладают сопоставимой эффективностью в профилактике и лечении гриппа А у здоровых взрослых, хотя римантадин вызывает меньше побочных эффектов, чем амантадин.

[Этот реферат был подготовлен централизованно.]

Низкая частота резистентности к римантадину в полевых изолятах вирусов гриппа А | Журнал инфекционных болезней

Абстрактные

Распространение устойчивых к лекарствам вирусов гриппа типа А среди близких людей в семьях, школах и домах престарелых хорошо задокументировано. Чтобы выяснить, циркулируют ли устойчивые к лекарствам вирусы гриппа среди населения в целом, изоляты 2017 года, собранные в 43 странах и территориях в течение 4-летнего периода, были протестированы на лекарственную чувствительность с помощью биоанализа.Устойчивость к лекарствам была подтверждена путем обнаружения специфических мутаций в гене M2, которые, как было показано, придают устойчивость к амантадину или римантадину. Шестнадцать вирусов (0,8%) оказались устойчивыми к лекарствам. Только 2 из этих устойчивых вирусов были выделены от людей, получавших лечение амантадином или римантадином во время сбора образцов. У 12 человек можно было исключить прием амантадина или римантадина, а у остальных 2 пациентов информация о лекарствах была недоступна.Эти результаты показывают, что циркуляция устойчивых к лекарствам вирусов гриппа является редким явлением, но надзор за лекарственной устойчивостью следует продолжать.

Полезность амантадина и римантадина для профилактики и лечения инфекций, вызываемых вирусами гриппа типа A, была хорошо доказана в многочисленных клинических исследованиях [1–7]. При приеме в течение всего периода вспышки эти препараты эффективны в профилактике гриппа на 70–90%. Терапия амантадином или римантадином, начатая в течение первых 2 дней после начала заболевания, может уменьшить продолжительность симптомов и сократить время выздоровления [5, 7].

Лица, получающие амантадин или римантадин для лечения вирусной инфекции гриппа, могут выделять вирусы, устойчивые к этим препаратам [8–13]. По данным одного исследования, до 30% пролеченных пациентов с инфекцией подтипа h4N2 выделяли устойчивый вирус [8]. Эти устойчивые штаммы, по-видимому, могут передаваться тесным контактам и вызывать типичный грипп [8].

Согласно нашим текущим представлениям, амантадин и римантадин ингибируют процесс удаления оболочки вируса гриппа после того, как он проник в клетку-хозяин посредством эндоцитоза [14–18].Подкисление эндосомальной среды приводит к потоку протонов во внутреннюю часть вириона через ионные каналы, образованные гомотетрамерами белка M2, трансмембранного белка. Снижение pH во внутренней части вируса вызывает диссоциацию белка М, основного структурного белка вируса, и рибонуклеопротеидный комплекс высвобождается в цитоплазму инфицированной клетки, чтобы инициировать репликацию вируса. Амантадин и римантадин блокируют поток протонов через ионный канал M2 и, таким образом, предотвращают высвобождение вирусной РНК в цитоплазму инфицированных клеток.В вирусах гриппа человека изменение одной аминокислоты в 4 сайтах на 27 аминокислотах, охватывающих трансмембранный домен белка M2, может вызвать лекарственную устойчивость [18].

Можно было бы ожидать циркуляцию устойчивых к лекарствам вирусов в странах, где амантадин или римантадин или оба использовались в течение нескольких лет, например, в некоторых странах Восточной Европы, а также во Франции, Великобритании и США. В России и других странах бывшего Советского Союза римантадин широко используется более двух десятилетий [19].Во Франции римантадин был лицензирован в 1987 г. [20]. Однако имеется лишь ограниченная информация о возможной циркуляции устойчивых к лекарствам вирусов гриппа в сообществе за пределами затронутых семей и закрытых или полузакрытых учреждений, таких как общежития или дома престарелых. С момента лицензирования римантадина в Соединенных Штатах в 1993 году тестирование на лекарственную чувствительность проводилось в качестве стандартной процедуры при характеристике изолятов вируса гриппа типа A, представленных в Центр сотрудничества Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ) по гриппу при Центрах по заболеваниям. Контроль и профилактика (CDC) в Атланте, Джорджия.Мы представляем данные эпиднадзора, собранные в течение двухлетних периодов до и после утверждения римантадина в США. Эти данные послужат исходной информацией для непрерывного всемирного эпиднадзора за штаммами гриппа.

Материалы и методы

Всего в это исследование были включены вирусы 2017 г., представленные в Сотрудничающий центр ВОЗ по гриппу (CDC) с октября 1991 г. по сентябрь 1995 г. Образец включает все вирусы, представленные в CDC национальными лабораториями ВОЗ по гриппу за пределами США.Вирусы из США представлены во всех географических регионах. Вирусы, полученные в CDC, были изолированы в первичных клетках почек обезьян, клетках почек собак Madin-Darby (MDCK) или яйцах кур с эмбрионами. Полученные из клеток изоляты размножали в клетках MDCK, а изоляты яиц размножали в яйцах после прибытия в CDC. Географическое происхождение вирусов показано в таблице 1.

Таблица 1

Географическое происхождение и год выделения вирусов 2017 г., протестированных на чувствительность к римантадину.

Таблица 1

Географическое происхождение и год выделения вирусов 2017 г., протестированных на чувствительность к римантадину.

Чувствительность к лекарствам определяли с помощью биоанализа, который отслеживает синтез вирусных нуклеопротеинов в инфицированных культурах клеток MDCK в присутствии или в отсутствие римантадина в концентрации 1 мкМ / мл [18, 21]. 96-луночные планшеты для культивирования клеток (Costar, Cambridge, MA) засевали клетками MDCK (ATCC CCL34; American Type Culture Collection, Manassas, VA).Приблизительно 2 × 10 4 клеток в 100 мкл л модифицированной Дульбекко среды Игла с добавлением 1% фетальной бычьей сыворотки, 0,2% бычьего сывороточного альбумина, 25 мкл. M HEPES, пенициллин и стрептомицин были добавлены в каждую лунку. и планшеты инкубировали при 36 ° C в увлажненной атмосфере с 5% CO 2 в течение ночи. На следующее утро, без предварительного удаления питательной среды, вирусы добавляли в 3 полулогарифмических разведениях, начиная с 1: 1000 для изолятов, выращенных из яиц, и 1: 330 для вирусов, выращенных на клеточной культуре.В каждую из 4 лунок добавляли пятьдесят микролитров разведения вируса. Дополнительные 50 мкл л среды, содержащей 0,2% бычьего сывороточного альбумина, антибиотики и 8 мкл г 1-тозиламид-2-фенилэтилхлорметилкетон-трипсина, добавляли в 2 лунки каждого разведения вируса. В другие 2 лунки пипеткой добавляли 50 мкл мкл той же среды, содержащей 4 мкл г римантадина. Вирусы A / Singapore / l / 57 (чувствительные) (h3N2) и A / Turkey / Oregon / 71 (устойчивые) (H7N3) были включены в качестве контролей в каждый тест [18, 21].Планшеты оборачивали пластиковой пленкой и центрифугировали при 700 g при температуре окружающей среды в течение 45 мин. Затем обертку удаляли, и планшеты инкубировали при 36 ° C в течение 6 часов. После этого среду отсасывали, клетки дважды промывали PBS, фиксированным 80% ацетоном в PBS при температуре окружающей среды в течение 10 мин, и снова дважды промывали PBS. ИФА для количественной оценки синтеза нуклеопротеинов проводился в лунках, и ингибирование синтеза нуклеопротеинов ≥50% при разведении вируса ≥1 в присутствии римантадина считалось чувствительной картиной.Устойчивость к лекарственным средствам подтверждали анализом частичной нуклеотидной последовательности гена M2 [11] или анализом рестрикции полимеразной цепной реакции [22].

Результаты

Шестнадцать (0,8%) вирусов 2017 г. были устойчивы к римантадину и обладали лекарственно-устойчивым генотипом, что подтверждено обнаружением соответствующих мутаций в трансмембранном домене гена M2 (таблица 2). Пятнадцать вирусов имели замену аминокислоты в остатке 31 (серин на аспарагин) и 1 в остатке 30 (аланин на треонин).Более 80% всех проанализированных вирусов, включая все 16 устойчивых вирусов, относились к подтипу h4N2. Пять устойчивых вирусов были обнаружены в течение первого года наблюдения, 2 — в течение второго, 8 — в течение третьего и 1 — в течение четвертого года. Восемь устойчивых к лекарствам вирусов были из США, а 8 — из 4 других стран или территорий. Пять устойчивых вирусов из Австралии, собранных в течение первого года наблюдения. Ни один из австралийских изолятов, уже представленных в CDC для трех последующих лет наблюдения (1992, 1993 и 1994), не оказался устойчивым.Однако обнаружение этого кластера устойчивых вирусов побудило нас запросить и исследовать 104 дополнительных вируса, которые были доступны в коллекции штаммов Сотрудничающего центра ВОЗ по справочной информации и исследованиям гриппа в Парквилле, штат Виктория. Эти дополнительные вирусы были собраны с 1989 по 1993 годы. Четыре из этих вирусов были устойчивыми; 3 из них были изолированы в 1992 г. и 1 — в 1993 г. (данные не показаны). Всего было проанализировано 198 вирусов из Австралии, из которых 9 (4,5%) оказались устойчивыми к лекарствам.

Таблица 2

Шестнадцать резистентных к римантадину изолятов гриппа А.

Таблица 2

Шестнадцать резистентных к римантадину изолятов гриппа А.

Два пациента (изоляты 94017156 и 94016508, таблица 2) получали амантадин и / или римантадин во время выделения устойчивых к лекарствам вирусов. Два других человека с устойчивыми изолятами (изоляты 93012047 и 93011761, таблица 2) жили или работали в учреждениях, где другие люди получали амантадин или римантадин во время сбора лекарственно-устойчивого изолята.Два человека с вирусами, устойчивыми к двум препаратам (изоляты 94017935 и 95021738, таблица 2), жили на базах вооруженных сил США, где применялся амантадин.

Обсуждение

Результаты этого исследования показывают, что выделение устойчивых к лекарствам вирусов гриппа — редкое событие. Устойчивыми оказались менее 1% проанализированных вирусов. В более раннем исследовании [23] 5 (2%) из 246 изолятов, собранных в течение 10 лет у пациентов в Хантингтоне, Западная Вирджиния, были устойчивы к амантадину и римантадину.Все 5 устойчивых вирусов были получены от 3 членов одной семьи, которые получали римантадин для лечения или профилактики инфекции вируса гриппа. В другом исследовании ни один из 105 вирусов, собранных в течение 2 эпидемических сезонов подряд во Франции, не был устойчив к римантадину [20].

В нескольких исследованиях была описана явная передача лекарственно-устойчивых вирусов близким, восприимчивым контактам в семьях и других полузакрытых условиях [8, 10]. Недавно сообщалось, что лекарственно-устойчивый вирус был изолирован от жителя дома престарелых, который не получал ни амантадин, ни римантадин, и не имел каких-либо задокументированных контактов с людьми, принимавшими оба препарата [11].Профилактика и лечение амантадином были начаты в этом доме престарелых через 1 день после сбора образца, содержащего устойчивый вирус.

В этом исследовании известно, что только 2 из 16 пациентов, изоляты которых были устойчивыми, получали амантадин и / или римантадин для лечения инфекций вируса гриппа. Передача устойчивых к лекарствам вирусов тесным контактам в полузакрытых учреждениях является наиболее вероятным объяснением существования двух других изолятов, устойчивых к римантадину. Один из этих двух человек был жителем дома престарелых, где амантадин использовался для лечения некоторых жителей во время эпидемии гриппа (изолят 93012047, таблица 2).Другой человек, рентгенолог, работал в больнице, где применялись амантадин и римантадин (изолят 93011761, таблица 2). Еще два устойчивых вируса были получены от людей, проживавших на 2 разных базах вооруженных сил США. Один из этих людей не принимал амантадин или римантадин; для другого человека информация об использовании противовирусных препаратов недоступна. Однако амантадин использовался на обоих основаниях. Для 9 из 10 оставшихся пациентов использование амантадина или римантадина можно исключить, а для 1 пациента получить информацию не удалось.

Ни один из 156 изолятов из стран Европы, где применялись амантадин и римантадин, не оказался устойчивым. В Соединенных Штатах амантадин был одобрен в 1976 году, а римантадин был лицензирован в 1993 году. Все 3 резистентных американских изолята, для которых не удалось установить связь с употреблением наркотиков, были изолированы во время сезона гриппа сразу после одобрения римантадина в Соединенных Штатах. Один из этих изолятов был получен от 33-летнего мужчины с инфекцией верхних дыхательных путей (изолят 94016797, таблица 2).Два других резистентных вируса были получены от 12-месячного ребенка, госпитализированного с инфекцией верхних дыхательных путей и фебрильными судорогами (изолят 94016414, таблица 2), и от 6-летнего ребенка с лихорадкой и респираторной инфекцией (изолят 94016568, таблица 2). ).

Относительно молодой возраст большинства пациентов, от которых были изолированы устойчивые вирусы, удивляет, но это частично отражает возрастную структуру пациентов, изоляты которых были получены в Центре контроля заболеваний. Возраст пациента можно было определить по 4515 изолятам, представленным в течение 4-летнего периода исследования.На момент сбора образца 79% этих пациентов были в возрасте <40 лет.

В нашем исследовании ни один из 193 изолятов из Китая, Гонконга и Сингапура не оказался устойчивым. Однако один устойчивый вирус был изолирован от годовалого ребенка на Тайване. Никакой дополнительной информации об этом пациенте не было. Другой устойчивый вирус из Восточной и Юго-Восточной Азии был связан с возможным использованием амантадина на военной базе вооруженных сил США на Гуаме. Использование амантадина в Китае и Гонконге в последние годы делает надзор в Азии за устойчивостью все более важным, поскольку многие эпидемические штаммы были впервые обнаружены в азиатских странах [24].

Все 5 устойчивых вирусов, выделенных в течение первого года нашего исследования, были получены в отдельных случаях, не связанных между собой в Австралии. Общий процент устойчивых вирусов, полученных из Австралии (9 из 198 изолятов, собранных за 6 лет), оказался неожиданным, поскольку в Австралии мало используется амантадин или римантадин для профилактики или лечения инфекций, вызванных вирусом гриппа. Все 9 устойчивых вирусов имели аминокислотную замену серина на аспарагин в положении 31. Чтобы изучить возможность лабораторного заражения, мы выровняли нуклеотидные последовательности M2 этих 9 вирусов с последовательностями контрольных вирусов и устойчивого эталонного штамма A / Puerto. Rico / 8/34.Нуклеотидная гетерогенность была достаточной, чтобы сделать вывод, что это были 9 отдельных вирусов, четко отличимых друг от друга и от любого из контрольных вирусов (данные не показаны). Не исключено, что лица, у которых были выделены эти устойчивые вирусы, контактировали с пациентами, которые использовали амантадин по неврологическим показаниям. Также возможно, что эти вирусы являются естественно устойчивыми вирусами, циркулирующими в течение ограниченного периода времени. Учитывая высокую частоту мутаций генов вируса гриппа, кажется вероятным, что естественно устойчивые вирусы могут возникать и циркулировать в популяции.Неизвестно, обладают ли вирусы с чувствительным фенотипом избирательным преимуществом перед вирусами с устойчивым фенотипом. Однако было показано, что устойчивые вирусы могут передаваться через 6 последовательных поколений подвергшихся воздействию цыплят [25].

В заключение, наши данные показывают, что изоляция вирусов гриппа, устойчивых к амантадину или римантадину, происходит нечасто. Наша выборка не показывает тенденции к увеличению частоты циркуляции лекарственно-устойчивых вирусов с течением времени.На основании этих данных, похоже, нет необходимости изменять существующие рекомендации по применению амантадина и римантадина [26, 27]. Текущая программа эпиднадзора будет продолжена, и при необходимости может быть включен скрининг на устойчивость к ингибиторам нейраминидазы, новому классу противогриппозных препаратов [28, 29].

Список литературы

1.,,,,,.

Контролируемое испытание амантадина и римантадина в профилактике инфекций гриппа A

,

N Engl J Med

,

1982

, vol.

307

(стр.

580

4

) 2.,.

Защитная эффективность низких доз амантадина у взрослых, зараженных вирусом гриппа A дикого типа

,

Противомикробные агенты Chemother

,

1987

, vol.

31

(стр.

1470

3

) 3.,,,,,.

Профилактика римантадином у детей: повторное исследование

,

Pediatr Infect Dis J

,

1988

, vol.

7

(стр.

379

83

) 4., , , и другие.

Безопасность и профилактическая эффективность низких доз римантадина у взрослых во время эпидемии гриппа A

,

Противомикробные агенты Chemother

,

1990

, vol.

34

(стр.

1633

6

) 5.,,, Et al.

Дети с гриппом А: лечение римантадином

,

Педиатрия

,

1987

, vol.

80

(стр.

275

82

) 6.,.

Использование гидрохлорида римантадина и гидрохлорида амантадина при инфекциях, вызванных вирусом гриппа A

,

Infect Dis Clin North Am

,

1987

, vol.

1

(стр.

459

78

) 7 ..

Профилактика и лечение гриппа

,

N Engl J Med

,

1990

, vol.

322

(стр.

443

50

) 8.,,,,,.

Возникновение и очевидная передача вируса гриппа A, устойчивого к римантадину, в семьях

,

N Engl J Med

,

1989

, vol.

321

(стр.

1696

702

) 9.,,,,,.

Восстановление лекарственно-устойчивого вируса гриппа A при терапевтическом применении римантадина

,

Противомикробные агенты Chemother

,

1991

, vol.

35

(стр.

1741

7

) 10.,,,,.

Амантадин-устойчивый грипп A в учреждении сестринского ухода

,

Arch Intern Med

,

1992

, vol.

152

(стр.

390

2

) 11.,,,,.

Амантадин-устойчивый грипп A в домах престарелых

,

Arch Intern Med

,

1995

, vol.

155

(стр.

533

7

) 12 …

Амантадин и римантадин — клинические аспекты

,

Устойчивость к противовирусным препаратам

,

1996

Chichester

John Wiley

(стр.

59

77

) 13.,,, И др.

Распространенное появление устойчивых к амантадину и римантадину вирусов гриппа А у взрослых с симптомами иммунодефицита

,

Clin Infect Dis

,

1998

, vol.

26

(стр.

1418

24

) 14 ..

Действие адамантанаминов против вирусов гриппа A: ингибирование белка ионного канала M2

,

Semin Virol

,

1992

, vol.

3

(стр.

21

30

) 15.,,.

Белок М2 вируса гриппа имеет активность ионных каналов

,

Cell

,

1992

, vol.

69

(стр.

517

28

) 16.,,,.

Активность ионных каналов белка M2 вируса гриппа A: характеристика амантадинового блока

,

J Virol

,

1993

, vol.

67

(стр.

5585

94

) 17.,,,.

Белок ионного канала M2 вируса гриппа A: структурно-функциональный анализ

,

J Virol

,

1994

, vol.

68

(стр.

1551

63

) 18.,,,,.

Генетические основы устойчивости к римантадину, возникающей при лечении инфекции вируса гриппа

,

J Virol

,

1988

, vol.

62

(стр.

1508

12

) 19.,,,.

Исследование римантадина в СССР: обзор литературы

,

Rev Infect Dis

,

1981

, vol.

3

(стр.

408

21

) 20.,,,.

Чувствительность к римантадину вирусов гриппа A / h2N1 и A / h4N2, выделенных во время эпидемий 1988–1989 и 1989–1990 годов

,

Противомикробные агенты Chemother

,

1993

, vol.

37

(стр.

2239

40

) 21 ..

Эталонные вирусы для использования в тестировании на чувствительность к амантадину вирусов гриппа А человека

,

Antivir Chem Chemother

,

1991

, vol.

2

(стр.

115

8

) 22.,,,,,.

Длительное выделение устойчивых к амантадину вирусов гриппа A пациентами с иммунодефицитом: обнаружение с помощью анализа ограничения полимеразной цепной реакции

,

J Infect Dis

,

1995

, vol.

172

(стр.

1352

5

) 23.,,,,.

Устойчивость вируса гриппа A к амантадину и римантадину: результаты десятилетнего наблюдения

,

J Infect Dis

,

1989

, vol.

159

(стр.

430

5

) 24.,,.

Грипп: глобальный эпиднадзор за вариантами эпидемии и пандемии

,

Eur J Epidemiol

,

1994

, vol.

10

(стр.

467

70

) 25.,,.

Биологический потенциал вируса гриппа А, устойчивого к амантадину, у птиц, модель

,

J Infect Dis

,

1989

, vol.

159

(стр.

1050

6

) 26.

Центры по контролю и профилактике заболеваний

Профилактика гриппа и борьба с ним; рекомендации Консультативного комитета по практике иммунизации (ACIP)

,

MMWR Morb Mortal Wkly Rep

,

1996

, vol.

45

RR-5

(стр.

1

24

) 27.,.

Значение вирусной устойчивости к амантадину в борьбе с гриппом A

,

Clin Infect Dis

,

1992

, vol.

15

(стр.

362

7

) 28.,,, Et al.

Рациональный дизайн мощных ингибиторов репликации вируса гриппа на основе сиалидазы

,

Nature

,

1993

, vol.

363

(стр.

418

23

) 29., , , и другие.

Получение и характеристика варианта нейраминидазы вируса гриппа с пониженной чувствительностью к нейраминидазоспецифическому ингибитору 4-гуанидино-Neu5Ac2en

,

Virology

,

1995

, vol.

214

(стр.

475

84

)

Заметки автора

© 1999 Американского общества инфекционистов

% PDF-1.4
%
49 0 объект
>
эндобдж
48 0 объект
> поток
2007-03-07T15: 37: 59Z2021-05-28T22: 02: 17-07: 002021-05-28T22: 02: 17-07: 00XPPapplication / pdf

  • uuid: 5da6ec8c-1dd2-11b2-0a00-3b09275dc400uuid: 5da6ec8f-1dd2-11b2-0a00-810000000000

  • dc: создатель
  • dc: название
  • dc: описание
  • конечный поток
    эндобдж
    46 0 объект
    >
    эндобдж
    44 0 объект
    >
    эндобдж
    88 0 объект
    >
    эндобдж
    89 0 объект
    >
    эндобдж
    21 0 объект
    > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Rotate 0 / TrimBox [9 9 594 792] / Type / Page >>
    эндобдж
    24 0 объект
    > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Rotate 0 / TrimBox [9 9 594 792] / Type / Page >>
    эндобдж
    27 0 объект
    > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Rotate 0 / TrimBox [9 9 594 792] / Type / Page >>
    эндобдж
    30 0 объект
    > / Font> / ProcSet [/ PDF / Text] >> / Rotate 0 / TrimBox [9 9 594 792] / Type / Page >>
    эндобдж
    90 0 объект
    > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB] / XObject >>> / Type / Page >>
    эндобдж
    91 0 объект
    > / ProcSet [/ PDF / Text / ImageB / ImageC] / XObject >>> / Type / Page >>
    эндобдж
    110 0 объект
    [113 0 R 114 0 R]
    эндобдж
    111 0 объект
    > поток
    q
    354.9945831 0 0 77.5988159 124.0027008 630.4011841 см
    / Im0 Do
    Q
    BT
    / T1_0 1 Тс
    12 0 0 12 228,00604 551,99991 тм
    (DOI: 10.1542 / peds.2007-0224) Tj
    5.527 1 тд
    (2007; 119; 852) Tj
    / T1_1 1 Тс
    -4.36101 0 Тд
    (Педиатрия \ 240) Tj
    / T1_0 1 Тс
    -1,88801 1,00001 тд
    (Комитет по инфекционным болезням) Tj
    / T1_2 1 Тс
    -6.16898 1 тд
    (Противовирусная терапия и профилактика гриппа у детей) Tj
    ET
    BT
    / T1_0 1 Тс
    12 0 0 12 433,164 469,99994 тм
    () Tj
    0 0 1 рг
    -21.944 0 Тд
    (http://pediatrics.aappublications.org/content/119/4/852)Tj
    0 г
    3.7375 1 тд
    (находится в Интернете по адресу:) Tj
    -9.01349 1.00001 Td
    (Онлайн-версия этой статьи вместе с обновленной информацией и s \
    услуги, is) Tj
    ET
    93 193 417 52 пере
    0 0 мес.
    S
    BT
    / T1_0 1 Тс
    10 0 0 10 103 198,99991 тм
    (Американской академией педиатрии. Все права защищены. Печатать ISSN: \
    1073-0397. ) Tj
    0 1 ТД
    (Американская академия педиатрии, 345 Парк-авеню, Итаска, Иллинойс, 6 \
    0143. Copyright \ 251 2007) Tj
    0 1.00001 TD
    (издается непрерывно с 1948 года. Педиатрия принадлежит, издайте \
    ed, и товарный знак) Tj
    0 1 ТД
    (Педиатрия — официальный журнал Американской академии педиатрии \
    .Ежемесячное издание, it) Tj
    ET
    q
    389 0 0 57,5 ​​107 81,5 см
    -1 TL / Im1 Do
    Q
    BT
    / T1_0 1 Тс
    8 0 0 8 339,37592 34 тм
    (гостем 28 мая 2021 г.) Tj
    0 0 1 рг
    -12.60901 0 Тд
    (www.aappublications.org/news)Tj
    0 г
    -7.55398 0 Тд
    (Скачано с) Tj
    ET

    конечный поток
    эндобдж
    112 0 объект
    > / Filter / FlateDecode / Height 388 / Length 137508 / Name / X / Subtype / Image / Type / XObject / Width 1775 >> stream
    H ֻ JA @ xE, | 7m ץ $ ku3L

    Чемодан для римантадина, который будет продаваться в Канаде для профилактики вирусной инфекции гриппа a

    ЦЕЛЬ: оценить эффективность и безопасность амантадина и римантадина, противовирусных препаратов первого поколения, для вирус гриппа.ИСТОЧНИКИ ДАННЫХ: был проведен систематический поиск англоязычной литературы с использованием MEDLINE, EMBASE, Current Contents и базы данных Cochrane с 1966 по апрель 2002 года, а также ручной поиск ссылок из найденных статей. Рассматривались контролируемые клинические испытания амантадина и римантадина для профилактики естественного гриппа А. В контрольной группе использовалось либо плацебо, либо противовирусный агент. ИЗВЛЕЧЕНИЕ ДАННЫХ: каждое испытание оценивалось двумя авторами для определения адекватности рандомизации и описания исключений.Данные об эффективности были извлечены в соответствии с заранее определенным протоколом. Расхождения в извлечении данных среди исследователей были разрешены консенсусом. Девять исследований по профилактике амантадина и римантадина соответствовали критериям этого систематического обзора. СИНТЕЗ ДАННЫХ: семь испытаний амантадина в сравнении с плацебо (n = 1797), три исследования римантадина в сравнении с плацебо (n = 688) и два исследования амантадина в сравнении с римантадином (n = 455). были включены в метаанализ по профилактике гриппа А. Обобщение результатов относительной вероятности заболевания показало снижение на 64% в группе амантадина по сравнению с плацебо (OR 0.36, 95% ДИ от 0,23 до 0,55, P≤0,001), снижение заболеваемости на 75% в группе римантадина по сравнению с плацебо (ОШ 0,25, 95% ДИ от 0,07 до 0,97, P = 0,05) и отсутствие значимых различий в шансах болезнь для групп амантадина по сравнению с группами римантадина (OR 1,15, 95% CI 0,57–2,32, P = 0,32). Обобщение результатов изучения побочных эффектов показало значительно более высокие шансы побочных реакций со стороны центральной нервной системы и преждевременного исключения из клинических испытаний в группе, получавшей амантадин, чем в группе, получавшей плацебо.По сравнению с группой, получавшей плацебо, в группе, получавшей римантадин, не было значительно более высокой частоты абстинентного синдрома или событий со стороны центральной нервной системы. Однако было значительное увеличение вероятности нежелательных явлений со стороны желудочно-кишечного тракта у пациентов, получавших римантадин, по сравнению с теми, кто получал плацебо (OR 3,34, 95% ДИ 1,17–9,55, P = 0,03). В сравнительных испытаниях амантадина и римантадина римантадин был связан с 82% снижением вероятности событий со стороны центральной нервной системы (OR 0.18, 95% ДИ от 0,03 до 1,00, P = 0,05) и 60% снижение вероятности прекращения лечения (OR 0,40, 95% ДИ от 0,20 до 0,79, P = 0,009). ЗАКЛЮЧЕНИЕ: Этот метаанализ демонстрирует, что амантадин и римантадин превосходит плацебо в профилактике гриппа А. Оба противовирусных средства имеют повышенное количество побочных эффектов по сравнению с плацебо; однако использование амантадина связано со значительно более высоким числом событий со стороны центральной нервной системы и прекращением лечения по сравнению с римантадином.Таким образом, римантадин должен быть предпочтительным агентом этого класса для предотвращения инфекции вируса гриппа А и должен быть доступен в Канаде.

    Авторское право

    Авторское право © 2003 Hindawi Publishing Corporation. Это статья в открытом доступе, распространяемая по лицензии Creative Commons Attribution License, которая разрешает неограниченное использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии правильного цитирования оригинальной работы.

    Обзор: Амантадин и римантадин эффективно предотвращают и лечат грипп у здоровых взрослых, но римантадин лучше переносится

    Джефферсон Т.О., Демичели В., Дикс Дж. Дж., Риветти Д. Амантадин и риманта-дин для профилактики и лечения гриппа А у взрослых. Кокрановский обзор, последняя версия 19 февраля 1999 г. В: Кокрановская библиотека. Оксфорд: Обновите программное обеспечение.

    Вопрос

    Какова эффективность и безопасность амантадина и римантадина для профилактики и лечения гриппа у взрослых?

    Источники данных

    исследования были идентифицированы из Кокрановского реестра контролируемых исследований, баз данных MEDLINE и EMBASE / Excerpta Medica; библиографии соответствующих статей; и связаться с авторами, исследователями и производителями лекарств.

    Выбор исследования

    Исследования были отобраны, если они были рандомизированными контролируемыми испытаниями (РКИ) или квази-рандомизированными испытаниями здоровых взрослых людей в возрасте от 14 до 60 лет. Критерии включения: сравнение амантадина, римантадина или обоих с плацебо, контрольными противовирусными средствами или отсутствие вмешательства; и сравнение доз или режимов приема амантадина, римантадина или того и другого для профилактики или лечения гриппа.

    Извлечение данных

    Были извлечены данные об исследованиях и характеристиках участников, вмешательствах, количестве и тяжести случаев гриппа, смерти и побочных эффектах.

    Основные результаты

    17 испытаний по профилактике (15 РКИ; среднее количество участников 596; средняя продолжительность наблюдения 28 дней) и 10 исследований лечения (9 РКИ; среднее количество участников 161; средняя продолжительность наблюдения 25 дней) соответствовали критериям включения. . Амантадин предотвращал как клинически, так и серологически определенный грипп лучше, чем плацебо (таблица). Амантадин и римантадин индивидуально снижали лихорадку у пациентов с гриппом через 48 часов (таблица) и сокращали продолжительность лихорадки на 1.00 дней (95% ДИ 0,73–1,29) и 1,27 дня (ДИ 0,77–1,77), соответственно, больше, чем плацебо. Профилактические исследования показали, что по сравнению с амантадином римантадин был связан с меньшим риском побочных эффектов на центральную нервную систему { P <0,001} * и отмены из-за побочных эффектов { P <0,01} *.

    Заключение

    Амантадин и римантадин одинаково эффективны для профилактики и лечения гриппа у здоровых взрослых, но римантадин вызывает меньше побочных эффектов.

    Источник финансирования: Нет внешнего финансирования.

    Для корреспонденции: проф. Т. Джефферсон, Cochrane Vaccines Field, Министерство обороны, Медицинское управление армии, здание 21a, Казармы Кеога, Эш-Вейл, Олдершот, GU12 5RR Хэмпшир, Англия, Великобритания. ФАКС 44-1252-340-368.

    * P значение рассчитано по данным в статье.

    Резюме и комментарии также опубликованы в ACP Journal Club . 1999; 131: 68.

    Амантадин или римантадин в сравнении с плацебо в исследованиях профилактики (P) или лечения (T) взрослых больных гриппом при среднем сроке наблюдения от 25 до 28 дней *

    Тип гриппа Сравнение Взвешенная частота событий RRR (95% ДИ) NNT (ДИ)

    (тип исследования) Вмешательство Плацебо

    CS, определенный Амантадин (P) 8% 20% 63% (42-76) 9 (6-17)

    C определенный Амантадин (P) 28% 33% 23% (от 11 до 34) 20 (от 12 до 56)

    С лихорадкой через 48 ч Амантадин (Т) 8% 41% 79% (от 35 до 93) 4 (от 2 до 7)

    Римантадин (T) 6% 48% 81% (от 53 до 92) 3 (от 2 до 4)

    * CS = клинически и серологически; C = клинически.Все другие сокращения, определенные в Глоссарии; RRR, NNT и CI рассчитаны по данным статьи.

    Каждую зиму случаются вспышки гриппа. Многие исследования показали экономическую эффективность и пользу для здоровья ежегодной иммунизации против гриппа (1), которая является основным методом профилактики гриппа. Метаанализ, проведенный Джефферсоном и его коллегами, ясно показывает эффективность как амантадина, так и римантадина в снижении риска гриппа у подвергшихся воздействию, но незатронутых людей и в сокращении продолжительности заболевания у инфицированных людей.

    Основным ограничением рассмотренных исследований является то, что большинство участников были здоровыми мужчинами в возрасте от 20 до 30 лет. Ежегодно грипп приводит к множеству смертей, в основном среди людей старше 65 лет. Хотя противовирусные агенты рекомендуются для использования у взрослых из групп высокого риска, таких как пожилые люди, эта рекомендация сделана в основном на основе нескольких наблюдательных исследований среди жителей домов престарелых (2).

    Амантадин и римантадин сокращают клиническое течение заболевания только примерно на 1 день, их необходимо принимать в течение 48 часов с момента появления симптомов, и они эффективны только против изолятов гриппа A (грипп B вызывает клинически неотличимое заболевание).Занамивир, недавно одобренный ингибитор нейраминидазы, может быть более полезным, поскольку он обладает активностью против вирусов гриппа как типа A, так и типа B (3). Наконец, поскольку побочные эффекты амантадина (головокружение и падения) особенно вредны для пожилых людей, в этой группе предпочтительнее римантадин, несмотря на более высокую стоимость (1,75 доллара США за капсулу против 0,20 доллара США за капсулу).

    Брэдли С. Бендер, Мэриленд

    Университет Флориды

    Гейнсвилл, Флорида, США


    Список литературы

    1.Профилактика и борьба с гриппом: рекомендации Консультативного комитета по практике иммунизации (ACIP). MMWR Morb Mortal Wkly Rep.1999; 48 (RR-4): 1-28.

    2. Дринка П.Дж., Гравенштейн С., Шиллинг М. и др. Продолжительность противовирусной профилактики во время вспышек гриппа A в домах престарелых: сравнение двух протоколов. Arch Intern Med. 1998; 158: 2155-9.

    3. Монто А.С., Робинсон Д.П., Херлохер М.Л. и др. Занамивир в профилактике гриппа среди здоровых взрослых: рандомизированное контролируемое исследование.ДЖАМА. 1999; 282: 31-5.

    Механизмы сопротивления

    Ингибиторы гриппа A M2

    Амантадин и римантадин связываются с участком внутри поры тетрамерного канала M2. Единичные аминокислотные замены в четырех остатках (26, 27, 30 и 31), которые выстилают поры канала и мешают связыванию лекарств, в основном ответственны за высокий уровень перекрестной устойчивости природных изолятов к амантадину и римантадину. S31N является основной заменой, придающей устойчивость нынешним вирусам A (h4N2) и A (h2N1) pdm09, а также некоторым классам вирусов A (H5N1), хотя V27A, отдельно или вместе с S31N, присутствует в других вирусах H5N1.

    Ингибиторы нейраминидазы гриппа (NAI)

    Пониженная чувствительность циркулирующих вирусов гриппа к ингибиторам нейраминидазы (NAI) в основном обусловлена ​​мутациями в NA, которые непосредственно снижают ингибирование активности ферментов. Мутации в HA, которые снижают аффинность связывания рецептора и потребность в NA, были выбраны в культуре клеток. Хотя некоторые мутации НА были замечены в клинических изолятах, их роль в влиянии на чувствительность к лекарствам остается неясной.

    Основные мутации устойчивости к NA проявляют специфичность типа и подтипа, а уровень «устойчивости» зависит от ингибитора (и используемого анализа). Замена h375Y рядом с активным центром фермента придает высокий уровень устойчивости к осельтамивиру у вирусов N1 (IC 50 обычно> 1000 нМ), включая сезонные A (h2N1), A (h2N1) pdm09 и A (H5N1) до 2009 г. вирусы. Перекрестная резистентность к перамивиру находится на более низком уровне. R292K и E119V ответственны за высокий уровень устойчивости вирусов A (h4N2) к осельтамивиру.Вирусы с мутациями h375Y или E119V сохраняют чувствительность к занамивиру, в то время как R292K оказывает небольшое влияние на связывание занамивира и перамивира. Были только один или два случая выбора клинической устойчивости к занамивиру из-за R152K или I223R, и они были у пациентов с ослабленным иммунитетом. Другие мутации, N294S (N1 и N2) и I223V / L / R (N1), снижают восприимчивость в меньшей степени, при этом некоторые влияют только на связывание осельтамивира, а другие снижают восприимчивость к занамивиру и перамивиру.Другие мутации, влияющие на восприимчивость изолятов гриппа B, включают: I222T, D198N, D198E, S250G и G402S.

    Для высокоаффинного связывания осельтамивира и перамивира вращение E276 в активном центре для образования солевой связи с R224 необходимо для образования гидрофобного кармана, который вмещает этилпропокси боковые цепи этих ингибиторов. Структурная основа пониженного связывания осельтамивира с мутантными НА h375Y, N294S и R292K проиллюстрирована на рисунках 1, 2 и 3 ниже.

    Хотя очевидно, что высокий уровень резистентности ставит под угрозу клиническую эффективность противовирусного препарата, влияние более низкого уровня пониженной чувствительности («резистентности») NA на эффективность противовирусного средства в целом не установлено.

    «Устойчивость» к препаратам NI не является абсолютной, и ее чувствительность может снижаться в несколько раз до> 1000 раз. Существуют типичные диапазоны значений IC 50 , которые различаются между подтипами гриппа и между осельтамивиром и занамивиром для каждого подтипа.Кроме того, значения IC 50 , полученные методами флуоресценции и хемилюминесценции, не следует сравнивать напрямую, поскольку значения, полученные с помощью анализов хемилюминесценции, обычно ниже, чем значения для того же вируса и лекарства в тесте флуоресценции.

    Вирусы гриппа В обычно имеют значения IC 50 для осельтамивира в 10–100 раз выше, чем вирусы гриппа А. Эта более низкая восприимчивость может коррелировать с сообщениями о снижении клинической эффективности. Для занамивира значения IC50 для вирусов гриппа B лишь в несколько раз выше, чем для вирусов гриппа А.Значения IC 50 для вирусов h2N1 обычно выше для занамивира, чем для осельтамивира, тогда как обратное верно для вирусов h4N2, где значения IC 50 обычно выше для осельтамивира, чем для занамивира.

    Хотя не существует абсолютного определения «резистентности», отчасти из-за отсутствия консенсуса, многие определяют «резистентность» как значение IC 50 , по крайней мере, в 10 раз превышающее среднее значение IC 50 для аналогичных вирусов в тот же сезон гриппа. Однако, учитывая, что базовый уровень IC 50 для вирусов гриппа B уже часто в 10 раз выше, чем для вирусов гриппа A, может быть более уместным определять «устойчивые» вирусы по кратному увеличению IC 50 , относительного к значению базовой линии.Это необходимо определять отдельно для каждого из анализов флуоресценции и хемилюминесценции.

    Филогенетическое дерево генов NA сезонных вирусов h2N1 показывает родственные связи вирусов, устойчивых к осельтамивиру (красный цвет), из-за замены h375Y, появившейся в конце 2007–2008 годов, на современные чувствительные к осельтамивиру вирусы (черный цвет). Вирусы эталонной вакцины выделены синим цветом. Указаны общие аминокислоты, которые различают разные клады (Collins et al ., 2009)

    вверх страницы


    Рис. 1. Расположение аминокислотных замен, которые снижают чувствительность к осельтамивиру за счет изменения взаимодействия лекарственного средства с гидрофобным карманом активного сайта NA.

    Наложены структуры открытой (золотой) и закрытой (зеленый) конформаций N1, а также N2 и B. Делеция остатков 244-247 в N2 показана красным. Остатки нумеруются согласно нумерации N2. (Хэй и др. ., 2008).

    Рис. 2: Структурный анализ эффектов замены h375Y.

    Рентгеновские структуры комплексов осельтамивира и занамивира с наложенными N1 дикого типа (желтый) и мутантного (зеленый) N1, демонстрирующие влияние замены h375Y (нумерация N1) на ориентацию E277 и взаимодействие лекарств (Collins et al. al ., 2009).

    наверх

    Рисунок 3: Структурный анализ эффектов замещения N295S.

    Наложение рентгеновских структур комплексов осельтамивира с N1 дикого типа (желтый) и мутантного (зеленый) N1, демонстрирующее влияние замены N295S (нумерация N1) на взаимодействие осельтамивира (Collins et al ., 2009).

    Рис. 4. Структурный анализ эффектов замены R292K.

    Наложенные изображения комплексов осельтамивира с NAs R292 и K292 N9, показывающие отсутствие полного вращения E276 в мутанте K292, что приводит к частичному вытеснению осельтамивира из активного сайта.(Varghese и др. ., 1998)

    Артикул:

    Коллинз, П. Дж., Л. Ф. Хейр, Ю. П. Лин, Дж. Лю, Р. Дж. Рассел, П. А. Уокер, С. Р. Мартин, Р. С. Дэниелс, В. Грегори, Дж. Дж. Скехел, С. Дж. Гамблин и А. Дж. Хэй. 2009. Структурные основы устойчивости вирусов гриппа к осельтамивиру. Vaccine 27: 6317-23.

    Хэй, А.Дж., Коллинз, П.Дж., Рассел, Р.Дж. (2008) Противовирусные препараты и резистентность. При птичьем гриппе. Кленк, Х.-Д., Матросович, М.N. and Steck, J., ed. Monogr Virol. 27. (Базель, Каргер), стр. 251-270.

    Варгезе, Дж. Н., П. В. Смит, С. Л. Соллис, Т. Дж. Блик, А. Сахасрабудхе, Дж. Л. МакКимм-Брешкин и П. М. Колман. 1998. Разработка лекарств против изменяющейся цели: структурная основа устойчивости к ингибиторам в варианте нейраминидазы вируса гриппа. Структура 6: 735-46.

    вверх страницы

    противовирусных препаратов в иммунокомпетентном хозяине: Часть II. Лечение гриппа и респираторно-синцитиальных вирусных инфекций

    1.Справочник врачей. Проверено в ноябре 2002 г. по адресу: www.pdr.net (с паролем) ….

    2. Лекарства от вирусных инфекций, не связанных с ВИЧ. Med Lett Drugs Ther .
    1999; 41: 113–20.

    3. Профилактика гриппа 2002–2003 .. Med Lett Drugs Ther .
    2002; 44: 75–6.

    4. Профилактика гриппа 2001–2002 .. Med Lett Drugs Ther .
    2001; 43: 81–2.

    5. Van Voris LP,
    Бетц РФ,
    Хайден Ф.Г.,
    Рождество WA,
    Дуглас Р.Г. мл.Успешное лечение естественного гриппа A / USSR / 77 h2N1. ЯМА .
    1981; 245: 1128–31.

    6. Кушетка РБ.
    Профилактика и лечение гриппа. N Engl J Med .
    2000; 343: 1778–87.

    7. Демичели В,
    Джефферсон Т,
    Риветта Д,
    Дикс Дж.
    Профилактика и раннее лечение гриппа у здоровых взрослых. Вакцина .
    2000. 18: 957–1030.

    8. Симметрел [листок-вкладыш].Чаддс Форд, Пенсильвания: Endo Pharmaceuticals, 2002.

    9. Долин Р.,
    Райхман Р.К.,
    Мадоре HP,
    Мейнард Л,
    Линтон П.Н.,
    Уэббер-Джонс Дж.
    Контролируемое испытание амантадина и римантадина для профилактики инфекции гриппа А. N Engl J Med .
    1982; 307: 580–4.

    10. Lalezari J,
    Горицвет К,
    Кин О,
    Силаги К.
    Занамивир для лечения инфекции гриппа A и B у пациентов из группы высокого риска: объединенный анализ рандомизированных контролируемых исследований. Арк Интерн Мед. .
    2001; 161: 212–7.

    11. Макклеллан К.,
    Перри СМ.
    Осельтамивир: обзор его использования при гриппе. Наркотики .
    2001. 61: 263–83.

    12. Monto AS,
    Моулт А.Б.,
    Sharp SJ.
    Влияние занамивира на продолжительность и разрешение симптомов гриппа. Клин Тер .
    2000; 22: 1294–305.

    13. Уитли Р.Дж.,
    Хайден Ф.Г.,
    Райзингер К.С.,
    Молодой N,
    Дутковски Р,
    Ипе Д,

    и другие.Пероральное лечение гриппа осельтамивиром у детей. Педиатр Инфекция Дис J .
    2001. 20: 127–33.

    14. Монтальто, штат Нью-Джерси,
    Камедь КД,
    Эшли СП.
    Обновленное лечение гриппа A и B. Am Fam Physician .
    2000; 62: 2467–76.

    15. Профилактика респираторно-синцитиальных вирусных инфекций: показания к применению паливизумаба и обновленная информация об использовании RSV-IGIV.

    Leave a Reply

    Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

    You may use these HTML tags and attributes:

    <a href="" title=""> <abbr title=""> <acronym title=""> <b> <blockquote cite=""> <cite> <code> <del datetime=""> <em> <i> <q cite=""> <s> <strike> <strong>